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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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immunoblots2025.01.221. Immunoblotting Immunoblotting(western blotting)은 전기영동 후 단백질, 특히 양이 적은 단백질의 면역검출을 위한 강력하고 중요한 절차이다. Immunoblotting을 통해 nitrocellulose 또는 polyvinylidene fluoride(PVDF)와 같은 단백질 유지 막 지지체에 고정된 단백질 항원을 검출할 수 있다. 관심 단백질의 검출은 membrane에 노출된 관심 단백질을 특이적으로 인식하는 항체의 결합에 의존한다. 2. House keeping gene House keep...2025.01.22
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[생화학실험] Western blot Analysis 완충용액 제조와 시약 제조 시 유의사항2025.01.291. Western Blot Analysis Western Blot은 전기영동을 통해 분리된 단백질 중 항원-항체 반응을 이용하여 특정 단백질의 존재를 확인하는 방법입니다. 실험 과정 중 과도한 pH 변화를 안정화시키기 위해 완충용액(Buffer)를 사용하는데, Western Blot Analysis에 필요한 완충용액은 Tris-Buffered Saline, Tris-Glycine, Transfer Buffer 등이 있습니다. 2. Tris-Buffered Saline Tris-Buffered Saline은 용액의 pH를 조절하는 ...2025.01.29
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생화학 실험 보고서 - PCR2025.01.271. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합효소 연쇄반응으로, 열을 가하여 DNA의 특정 부분을 증폭시키는 기술이다. reverse transcription PCR은 mRNA에 대해 PCR을 적용하기 위한 방법으로, mRNA를 역전사시켜 cDNA를 합성하고 primer와 DNA polymerase를 이용해 DNA의 일부분을 복제, 증폭시킨다. PCR은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행되며, 주형 DNA, primer, dNTP, DNA polymerase가 ...2025.01.27