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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 5. Restriction Enzyme Cutting2025.01.041. Restriction Enzyme Cutting 이번 실험은 지난 실험에서 E.coli 배양액에서 Alkaimen Lysis mothod으로 추출한 plasmid DNA를 restriction enzyme을 사용하여 절단하였다. 그리고 gel electrophoresis를 통해, 절단된 plasma DNA를 확인하는 것을 목표로 하였다. 실험 결과, 5,000~6,000 bp의 band와 700~1,000 bp의 bnad로 2개의 주요한 DNA band를 관찰할 수 있었다. 추가로, gel 아랫부분에 몇 개의 DNA band가...2025.01.04
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[A+] 서강대학교 일반생물학실험1 실험 11. Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동 풀레포트2025.01.021. DNA 운반체 (Vector) DNA 운반체인 vector는 종류가 다양하며, DNA의 유지와 복제가 가능한 DNA분자이다. 그 중 plasmid는 가장 널리 쓰이는 vector이며, circular구조의 이중가닥 형태를 갖는다. plasmid는 bacteria 또는 몇몇 eukaryotic cell에 존재하는 DNA molecules로 extrachromosomal circular, double stranded의 특징을 갖는다. Chromosomal DNA와는 독립적으로 자가복제가 가능하며 일반적인 bacteria genom...2025.01.02
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식물분자생물학실험 Genotyping 결과보고서2025.01.181. Genotyping 이 보고서는 식물 샘플에서 추출한 Genomic DNA를 PCR로 증폭하고 gel electrophoresis를 통해 DNA 삽입 여부를 확인하는 실험 결과를 다루고 있습니다. 실험 결과, T-DNA-specific primer를 사용한 샘플에서 600~700bp 사이의 밴드가 검출되었으며, 이는 해당 식물에 T-DNA가 Homozygote 상태로 삽입되었음을 의미합니다. 이러한 실험 기법은 형질전환 식물에서 유전적 특성의 안정적인 유지를 증명하고 연구 및 상업적 활용에 있어 예측 가능성을 제공하는 데 중요...2025.01.18
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[A]서강대학교 현대생물학실험2_2차 풀레포트_TA Cloning과 Mini-Prep, Restriction enzyme & Gel electrophoresis2025.01.181. TA Cloning TA Cloning은 PCR을 거친 product의 3'에 존재하는 A overhang과 T vector의 3'의 T overhang의 상보성으로 인해 cloning을 진행하는 기법이다. Lac Z selection을 통해 blue colony와 white colony를 확인하여 insert DNA가 정상적으로 삽입되었는지 확인할 수 있다. Self-ligation을 줄이기 위해 alkaline phosphatase 처리나 T-overhang cloning protocol 수정 등의 방법을 사용할 수 있다....2025.01.18
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DNA Ligation & Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA Restriction enzyme & Gel electrophoresis2025.01.181. DNA Ligation & Transformation 제한효소를 처리하여 얻어낸 insert DNA를 T4 DNA ligase를 이용하여 vector에 삽입한다. DNA strand의 5'에 존재하는 인산기와 3'에 존재하는 OH기 사이에 phosphodiester bond를 형성하여 ligation하고, ligation product를 competent cell에 형질전환한 다음 plate에 ampicillin resistance에 의해 생성된 colony를 selection한다. 2. Mini-scale preparatio...2025.01.18
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인천대학교 나노바이오실험(1) Genomic DNA prep & Gel Electrophoresis2025.01.141. Genomic DNA Genomic DNA는 염색체 DNA로, Plasmid DNA와 같은 Extra-chromosomal DNA와 대조되는 개념이다. 대부분의 생물은 모든 세포에서 같은 Genomic DNA를 갖지만, 특정 gene의 발현으로 cell type과 function이 달라진다. 어떤 organism의 genomic DNA인지에 따라 바이러스, 박테리아, 진핵생물 등의 특성을 지닌다. 2. DNA 추출 방법 DNA 추출은 Lysis, Precipitation, Purification 3단계로 이루어진다. Lysis...2025.01.14
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Restriction Enzyme Digestion and Gel Electrophoresis 레포트2025.01.211. Plasmid DNA와 Vector Plasmid DNA는 박테리아 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 독자적으로 복제, 증식할 수 있는 원형 DNA 분자를 말한다. Plasmid Vector는 원하는 특정 유전자를 운반할 수 있고, 한 세대의 박테리아로부터 다음 세대로 전달되기 때문에, DNA 클로닝을 위한 핵심적인 도구이다. Vector에는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site과, 클로닝이 이루어진 후 많은 박테리아 중에서 vector를 가지고 있는 박테리아만 분리할 수 있도록 하는...2025.01.21
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PCR (Polymerase Chain Reaction) 레포트2025.01.211. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA polymerase를 통해 원하는 DNA를 증폭하는 기술입니다. 아주 미량의 DNA 시료에서 원하는 특정 DNA를 수시간 내에 약 20~50만배로 증폭시킬 수 있습니다. PCR 과정은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 이루어지며, 약 30번의 cycle을 거치면 target DNA가 약 230개로 증폭됩니다. DNA polymerase는 DNA를 template으로 하...2025.01.21
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[서강대학교 현대생물학실험2] (1차 풀레포트) Competent Cell, PCR, gel electrophoresis2025.01.221. 배지 세포를 배양하기 위해 영양분을 함유한 물질을 배지라고 한다. Sterilization은 무균 상태의 배지를 조제할 때 필요한 과정으로, heat, chemical, radiation 등의 방법으로 멸균 처리할 수 있다. 2. Competent cell Competent cell은 외부 유전물질을 수용하여 세포의 형질을 전환시킬 수 있는 세포이다. 본실험은 LB(Luria-Bertani) 배지를 액체와 고체 상태로 조제하여 고온, 고압의 수증기로 멸균하였고, 조제한 배지에 항생제 내성 유전자를 가진 plasmid를 삽입한 ...2025.01.22