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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.031. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 단백질(표적 핵산)을 증폭해서 검출하는 검사법으로, 두 개의 primer(시발체) 사이에 낀 DNA를 시험관 내에서 대량(20만~50만배)으로 증폭시킬 수 있는 혁명적인 방법입니다. PCR은 DNA의 해리(denaturation), primer와 주형 DNA의 결합(Annealing), DNA의 신장(Extension)의 3단계로 이루어지며, 이를 1 cycle로 하여 2의 제곱으로 증폭됩니다. PCR은 생물의 분류, 의료(유전병 진단), 범죄 수사(DNA 지문 분석) 등 DNA를 취급하는 ...2025.01.03
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양파 뿌리의 체세포 분열 관찰2025.01.031. 세포 분열 세포 분열은 하나의 세포가 두 개로 나뉘어 세포의 개수가 늘어나는 생명 현상입니다. 세포 분열에는 체세포 분열과 감수 분열이 있으며, 이 실험에서는 체세포 분열을 관찰하였습니다. 체세포 분열은 핵을 가진 진핵세포에서 일어나며, 세포 내 유전자 양이 변하지 않습니다. 체세포 분열의 과정은 간기(G1기, S기, G2기)와 분열기(전기, 중기, 후기, 말기)로 나뉩니다. 2. 양파 뿌리의 활용 양파 뿌리는 생장점이 있어 체세포 분열이 활발하게 일어나므로, 체세포 분열 과정을 관찰하기 위해 실험에 사용되었습니다. 양파 뿌리...2025.01.03
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 효소반응2025.01.131. 효소 반응 이번 효소 반응 실험은 온도와 pH에 변화를 주면서 전분 분해효소 아밀라제가 활성화되는 최적의 조건을 찾는 실험을 진행하였다. 효소는 각각 최적의 온도와 pH가 있는데 실험에 사용한 아밀라제의 경우 이론 상 최적의 pH는 6.7~7이고, 알파 아밀라제는 36.5이고 베타 아밀라제는 55~65 이다. 실험 결과 pH와 온도 모두 이론값과 일치하는 것을 알 수 있었다. 다만 85도의 3pH에서도 흡광도가 비교적 큰 값이 나온 것은 실험 과정에서 오류가 발생했을 것으로 추정된다. 2. 아밀라제 아밀라제는 아밀레이스라고도 ...2025.01.13
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 원생생물 관찰 결과보고서2025.01.131. 원생생물의 중요성 원생생물은 의학적으로 중요한 역할을 하며, 생태학적으로는 수서 생태계에서 작은 크기의 조류와 박테리아를 포식하는 등 영양염 순환에 중요한 역할을 한다. 또한 원생생물에 대한 연구는 진핵생물의 진화적 다양성을 이해하는 데 도움을 준다. 2. 원생생물의 분류 원생생물은 진핵 생물 중에 동식물과 균계에 속하지 않는 생물로 분류된다. 원생생물에는 위족, 섬모, 편모, 식포, 수축포 등의 세포소기관이 있다. 원생생물은 독립영양생물과 종속영양생물로 구분된다. 3. 독립영양생물의 종류 독립영양생물에는 황적조류, 유글레나류...2025.01.13
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생명과학실험1 단백질 정제 및 기능 분석을 위한 DEAE sepharose anion exchange chromatography2025.01.171. 단백질 정제 이 실험에서는 E.coli에서 추출한 alkaline phosphatase(AP) 단백질을 DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 정제하는 과정을 다루고 있습니다. AP는 E.coli의 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 periplasmic space에 위치하며, osmotic shock을 통해 추출할 수 있습니다. 추출된 AP 단백질 혼합물은 열처리, 투석, ion exchange chromatography 등의 과정을 거쳐...2025.01.17
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SDS-PAGE를 이용한 AP 단백질 분석 및 Coomassie Blue Staining2025.01.171. SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석 SDS-PAGE 실험을 통해 AP 단백질의 크기와 순도를 확인할 수 있었습니다. SDS-PAGE 과정에서 단백질의 3차 구조를 제거하고 크기에 따라 분리되도록 하여, 목표 단백질인 AP 단백질을 선별적으로 확인할 수 있었습니다. 또한 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질 밴드를 시각화하여 분석할 수 있었습니다. 2. 단백질 정제 과정 단백질 정제 과정에서 target 단백질 이외의 비특이적으로 결합한 단백질들이 씻겨나가면서 target 단백질의 순도가 높아지는 것을 확인할 수 있었...2025.01.17
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생명과학실험1 ELISA2025.01.171. ELISA 실험의 원리 ELISA 실험은 항원-항체 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 특정 항원의 존재 여부 및 농도를 분석하는 기법이다. 항체와 항원의 특이적 결합과 효소-기질 반응을 이용하여 목표 항원을 검출할 수 있다. 2. ELISA의 종류 ELISA에는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA 등 다양한 방식이 있다. 각 방식은 항원과 항체의 배치와 사용되는 항체의 수에 따라 차이가 있다. Indirect ELISA는 2차 항체를 사용하여 다양한 1차 항체에 대한 검출...2025.01.17
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식물 세포의 DNA 추출 및 전기 영동2025.01.171. DNA 추출 식물 세포의 DNA를 추출하는 과정을 설명하였습니다. 세포벽, 세포막, 핵막을 파괴하고 DNA와 결합한 단백질을 제거하는 과정을 거쳤습니다. 세제와 소금을 이용하여 세포막과 핵막을 융해하고, 에탄올을 사용하여 DNA를 분리하는 방법을 사용하였습니다. 2. 전기 영동 추출한 DNA를 이용하여 전기 영동 실험을 진행하였습니다. 전기장 내에서 DNA가 크기와 전하에 따라 이동하는 원리를 설명하였습니다. 1X TAE 버퍼, 6X 로딩 버퍼, DNA 래더 등을 사용하여 DNA 밴드를 관찰할 수 있었습니다. 전압 조절에 따른...2025.01.17
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