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DNA ligation, Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA2025.01.221. DNA ligation DNA ligation은 T4 DNA ligase 효소를 이용하여 DNA 말단을 phosphodiester 결합으로 연결하는 과정이다. 이 과정에서 vector와 insert의 ligation, vector의 self-ligation, insert의 self-ligation 등 세 가지 형태가 나타날 수 있다. 본 실험에서는 HindⅢ와 NdeⅠ로 double-digestion한 vector와 insert를 T4 DNA ligase로 ligation하였다. 2. Transformation ligation...2025.01.22
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생물공정실험 결과보고서: Bacterial identification2025.01.041. Bacterial identification 이 실험 보고서는 Durham test와 Gram staining을 통해 샘플 박테리아를 식별하는 내용을 다루고 있습니다. Durham test 결과, 1조의 박테리아는 E. coli로 확인되었고, 2,3조의 박테리아는 Enterococcus faecalis와 Salmonella typhimurium으로 추정되었습니다. Gram staining 결과, 1,2조의 박테리아는 그람 음성균, 3조의 박테리아는 그람 양성균으로 확인되었습니다. EMB agar 실험을 통해 1조의 E. col...2025.01.04
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미생물 배양_예비2025.01.221. 미생물 배양 미생물 배양학에 대한 기본적인 이론과 실험 방법을 설명하고 있습니다. 배지의 종류와 특성, 미생물의 개념, 배양 방법 등을 다루고 있습니다. 특히 평판도말법과 획선도말법을 통한 미생물 배양 실험 과정을 자세히 기술하고 있습니다. 2. E.coli 균주 대장균(E.coli)은 실험에 널리 사용되는 미생물 균주로, 번식 속도가 빠르고 배양이 쉬워 다양한 실험에 활용된다고 설명하고 있습니다. 3. 효모(Yeast) 균주 효모(Yeast)는 실험실에서 대량 배양이 가능하지만 대장균보다 고등한 생물이기 때문에 실험에 많이 ...2025.01.22
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재결합 단백질의 발현/ Expression of recombinant proteins in E. coli2025.01.121. GST-tagged Proteins glutathione S-transferase (GST), histidine (HIS), 기타 친화성 태그를 이용하여 단백질을 정제하게 되면 기존에 잘 알려진 생화학적 특성을 가진 단백질과 알려지지 않은 생화학적 특성을 가진 재조합 단백질의 N 말단에 결합하여 정제를 도와준다. GST 단백질은 번역 시에 안정적이고 가용성이 높은 단백질로 빠르게 접히기 때문에, GST 태그를 포함하면 태그가 없을 때보다 더 잘 발현하고 용해도를 촉진하는 경우가 많다. 2. BCA assay BCA는 Lowry...2025.01.12
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아주대 생실1) Plasmid DNA 추출 보고서2025.05.101. 플라스미드 DNA 추출 이 실험을 통해 플라스미드 DNA를 추출하고 전기영동을 통해 플라스미드 DNA의 형태를 관찰할 수 있었습니다. 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체 DNA와 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자로, E.coli 세균에서 플라스미드를 추출하여 DNA를 관찰했습니다. 실험에서는 여러 가지 버퍼를 사용했는데, 이는 플라스미드 DNA 추출을 위한 것입니다. 실험 결과 3kb와 10kb 부분에서 플라스미드 DNA가 관찰되었으며, 3kb 부분은 Linear DNA, 10kb 부분은 Open-circu...2025.05.10
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[생물공정실험] 4주차 Bacterial Identification(Durham bubble test & Gram staining) 결과보고서2025.04.261. Bacterial Identification 이번 실험에서는 Durham bubble test, EMB plate, Gram staining을 통해 그람양성균과 그람음성균을 분류해보았다. Durham bubble test를 통해 lactose를 분해하는 균을 확인하였고, EMB agar test를 통해 균의 증식 및 색상 변화를 관찰하여 균의 종류를 추정하였다. Gram staining을 통해 세포벽 구조의 차이를 이용하여 최종적으로 균의 종류를 확인하였다. 2. Durham Bubble Test Durham bubble te...2025.04.26
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생명과학실험1 단백질 정제 및 기능 분석을 위한 DEAE sepharose anion exchange chromatography2025.01.171. 단백질 정제 이 실험에서는 E.coli에서 추출한 alkaline phosphatase(AP) 단백질을 DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 정제하는 과정을 다루고 있습니다. AP는 E.coli의 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 periplasmic space에 위치하며, osmotic shock을 통해 추출할 수 있습니다. 추출된 AP 단백질 혼합물은 열처리, 투석, ion exchange chromatography 등의 과정을 거쳐...2025.01.17
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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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세포 배양법2025.05.141. 세포 배양법 세포 배양은 생물체에서 분리해낸 세포를 체내 환경이 아닌 액체 배지, 고체 배지와 같은 외부 환경에서 키우는 것으로, 의과학과 생물학에서 자주 활용되는 기술이다. 세포 배양은 목적한 세포를 증식시키거나, 관찰하기 때문에 세포에 따라 온도, pH 등과 같은 적절한 생장 환경을 설정해야 한다. 일반적으로 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위한 amino acid, glucose와 같은 영양분이 첨가되며, 때로는 목적한 세포를 제외하고 모두 제거하기 위해 항생물질을 첨가하기도 한다. 2. LB 배지 LB는 Lysoge...2025.05.14
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E.coli 형질전환 실험보고서2025.01.041. 형질전환의 원리 형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 현상을 말한다. 1928년 영국의 F. 그리피스가 폐렴쌍구균을 이용한 실험을 통해 발견되었다. 형질전환에 필요한 최소 DNA량은 약 10만분의 1 mol이며, double strand DNA가 single strand DNA보다 전환을 일으키기 쉽다. 형질전환 실험을 통해 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다. 2. 형질전환의 메커니즘 Competent 세포는 적절한 크기의 DNA 단편과 결합할 수 있다. DNA 흡수에는 에너지가 소...2025.01.04
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