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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(ELISA)2025.01.231. ELISA ELISA는 효소면역정량법으로 Antigen-Antibody interaction을 이용하여 antigen or antibody를 정성, 정량할 수 있는 실험법입니다. 항체에 효소를 부착한 후 항원-항체 반응과 효소-기질 반응을 통해 양을 측정합니다. ELISA는 Direct, Indirect, Sandwich, Competitive 방법으로 나뉩니다. 이번 실험에서는 Indirect ELISA 방법을 사용하여 항원의 유무와 농도에 따른 항체 및 효소의 결합을 정량적으로 분석하였습니다. 2. 항원-항체 반응 ELIS...2025.01.23
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효소 면역 측정법(ELISA)2025.01.291. 항원항체 반응 항원은 외부에서 침입한 세균, 바이러스, 독소 등의 이물질을 말하고, 항체는 항원에 결합하는 면역 단백질로 B림프구에 의해 생성되어 주로 혈장에 존재한다. 항원 항체 반응은 한 가지 항체에 한 가지 항원만 반응한다는 특이성을 보이며 항원을 중성화, 응집, 침전시켜 백혈구의 식세포 작용이 잘 일어나게 한다. 2. 효소 면역 측정법(ELISA) ELISA는 항체-항원 반응을 이용하여 시료에 존재하는 물질(일반적으로 단백질)의 양과 항원-항체 반응 강도를 정량적으로 측정할 수 있는 방법이다. 직접 ELISA, 간접 E...2025.01.29
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ELISA-효소면역측정법2025.01.171. ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 생물학 및 의학 연구에서 항원과 항체를 이용하여 특정 단백질, 바이러스, 세균 등의 존재와 농도를 정량화하는 데 널리 사용되는 강력한 기술이다. 이 효소 면역측정법은 항원-항체 상호작용을 기반으로 하여 높은 민감도와 특이성을 제공하며, 다양한 형태의 ELISA(간접 ELISA, 경쟁적 ELISA, 샌드위치 ELISA 등)를 통해 여러 실험 목적에 맞게 적용될 수 있다. 2. 간접 ...2025.01.17
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MTT assay (WST-8 assay)2025.01.181. Tetrazolium Tetrazolium은 dehydrogenase 등의 효소에 의해 쉽게 환원되어 유색의 formazan을 형성한다. 이러한 원리로 가장 널리 사용되는 MTT tetrazolium은 노란색 수용성 기질로, 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan 이라고 불리는 crystal을 형성한다. 따라서 세포사멸에 의해 미토콘드리아가 제 기능을 하지 못하게 되면 MTT를 처리해도 formazan을 형성하지 못하게 된다. 2. MTT assay MTT assa...2025.01.18
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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_면역세포에서 항염증 효과 확인(cell treat)2025.01.211. 대식세포의 염증 반응 대식세포 표면의 TLR이 PAMP를 인식하거나, 특정 cytokine에 대해 수용체에서 인식하는 경우 대식세포가 활성화 된다. 대식세포가 활성화되면, 표식작용이 증가하고 항미생물 작용이 증가하며, ROS의 활성이 증가하게 되는데 이는 iNOS의 활성을 증가시키고 아르기닌이 산소와 NADPH와 반응하여 NO가 생성되는 반응이 일어나게 된다. 활성화된 대식세포에서 IL-1, TNF-α, IL-6 등을 분비하게 되고, 이들은 염증반응 매개 물질로 림프구의 활성을 증가시킨다. 2. RAW 264.7 세포주 RAW...2025.01.21
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[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] ELISA2025.01.211. ELISA ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA...2025.01.21
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화공생물공학 단위조작실험1 Enzyme kinetic assay : Horseradish Peroxidase2025.01.151. Michaelis–Menten 방정식 Michaelis–Menten kinetics는 생화학분야에서 가장 잘 알려진 효소와 반응속도론에 관한 모델 중 하나이다. 이 식을 Michaelis–Menten 식이라고 부르며, 단일 기질-효소 촉매반응의 속도식의 기본이 된다. 효소 반응속도론은 효소(E)-기질(S)의 복합체[ES] 형성단계의 가역반응과 ES 복합체의 비가역 해리단계의 2단계의 반응체계로부터 구할 수 있다. 빠른 평형 가정이나 유사 정상상태 가정을 통해 Michaelis-Menten 속도식을 유도할 수 있다. 2. 효소 ...2025.01.15
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ELISA 실험 보고서2025.01.031. ELISA 실험 이번 실험은 ELISA 중에서도 sandwich ELISA를 수행하였다. 항원-항체 특이적 결합반응과 효소를 이용한 발색반응을 통해 target을 정성, 정량적으로 분석하는 방법을 익히기 위한 실험이다. 실험 과정에서 coating, blocking, sample dilution, incubation, washing, substrate 반응 등의 단계를 거쳤으며, 실험 결과 sample의 IL-6 농도를 정량적으로 측정할 수 있었다. ELISA는 항원-항체 반응을 이용하여 미량의 항원이나 항체를 측정하는 방법으...2025.01.03
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생명과학실험 ELISA 실험 레포트2025.01.161. 항원-항체 반응 항체(antibody) 또는 면역글로불린(immunoglobulin, Ig)은 항원(antigen)과 특이적으로 결합하여 항원-항체 반응을 일으키는 물질이다. 항체의 기본 구조는 Y자 모양이며, heavy chain 2개와 light chain 2개로 이루어져 있다. 항체의 결합 특이성은 무거운 사슬과 가벼운 사슬의 가변 영역의 아미노산 잔기에 의해 결정된다. 2. ELISA 실험 방법 ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)는 항원-항체 상호작용을 이용해 항원이나 항체를 정성 ...2025.01.16
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생명과학실험1 ELISA2025.01.171. ELISA 실험의 원리 ELISA 실험은 항원-항체 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 특정 항원의 존재 여부 및 농도를 분석하는 기법이다. 항체와 항원의 특이적 결합과 효소-기질 반응을 이용하여 목표 항원을 검출할 수 있다. 2. ELISA의 종류 ELISA에는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA 등 다양한 방식이 있다. 각 방식은 항원과 항체의 배치와 사용되는 항체의 수에 따라 차이가 있다. Indirect ELISA는 2차 항체를 사용하여 다양한 1차 항체에 대한 검출...2025.01.17
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