총 31개
-
SDS-PAGE2025.01.121. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분리하는 기술로, 전기영동 이동성을 이용한다. 단백질은 SDS 처리를 통해 균일하게 음전하를 띠게 되어 분자량에 따라 분리될 수 있다. 이 실험에서는 단백질 발현에 IPTG의 영향을 확인하고자 하였으나 이전 실험 결과의 불확실성으로 인해 IPTG의 영향을 명확히 알기 어려웠다. 단백질 염색 결과를 통해 약 45 kDa 크기의 단백질이 분리된 것을 확인할 수 있었다. 2. Discontinuous Buffer System Discontinuous buffer system은 stackin...2025.01.12
-
임상화학 기기분석법 보고서2025.01.021. Ion-exchange chromatography (이온교환크로마토그래피) 이온 교환 크로마토그래피(Ion Exchange Chromatography, IEC)는 전하 차이를 이용하여 화학종을 분리하는 방법입니다. 양이온은 양이온-교환물질(교환체)에, 음이온은 음이온-교환물질에 의해 분리됩니다. 이온교환크로마토그래피는 원하지 않는 이온을 제거하고 원하는 이온을 농축하는 데 사용됩니다. 2. HPLC(High perfomance liquid chromatography, 고속액체크로마토그래피) HPLC는 고압 또는 고속액체크로마토...2025.01.02
-
[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] Immunoprecipitation2025.01.211. Immunoprecipitation Immunoprecipitation(IP)은 antigen-antibody interaction을 이용해 sample 용액으로부터 원하는 단백질을 분리하는 실험 기법입니다. 여러 가지 단백질이 섞인 용액에서 특정 단백질만을 분리하고 싶을 경우, 해당 단백질에 specific 하게 결합하는 antibody를 표지로 삼아 이를 얻을 수 있습니다. 만약 target 단백질과 specific 하게 결합하는 antibody가 존재하지 않을 경우, 해당 단백질에 다른 단백질을 tagging 하여 이를 ...2025.01.21
-
생화학 실험 보고서 - 전기영동을 통한 단백질 관찰 (SDS-PAGE)2025.01.271. 단백질 분리 및 분석 이번 실험에서는 SDS-PAGE를 사용하여 단백질을 분리하고 관찰하였습니다. SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리되는 원리를 이용하는 전기영동 방법입니다. 실험 결과 MCF-7 세포에서 추출한 단백질 샘플에서 약 45kDa와 60kDa 크기의 단백질이 관찰되었습니다. 이를 통해 MCF-7 세포에 다양한 크기의 단백질이 존재함을 확인할 수 있었습니다. 2. 전기영동 기술 전기영동은 단백질, 핵산 등 생체 고분자를 분리하고 분석하는 데 널리 사용되는 기술입니다. 이번 실험에서는 SDS-PAGE 기법을 ...2025.01.27
-
생명과학실험1 단백질 정제 및 기능 분석을 위한 DEAE sepharose anion exchange chromatography2025.01.171. 단백질 정제 이 실험에서는 E.coli에서 추출한 alkaline phosphatase(AP) 단백질을 DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 정제하는 과정을 다루고 있습니다. AP는 E.coli의 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 periplasmic space에 위치하며, osmotic shock을 통해 추출할 수 있습니다. 추출된 AP 단백질 혼합물은 열처리, 투석, ion exchange chromatography 등의 과정을 거쳐...2025.01.17
-
단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
-
[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
-
생화학 크로마토그래피 발표A+ 받은 자료2025.05.071. 크로마토그래피 크로마토그래피란 정지상과 이동상을 사용해 시료들이 섞여 있는 혼합액을 이동속도 차이를 이용하여 분리하는 방법입니다. 크로마토그래피는 이동상과 고정상에 따라 기체-고체, 기체-액체, 액체-액체, 액체-고체 등으로 분류할 수 있습니다. 기체크로마토그래피는 기화가 가능한 시료를 사용하고 액체크로마토그래피는 용해성이 있는 시료를 사용합니다. 크로마토그래피의 특징은 여러 가지 용매로 실험을 해볼 수 있고 정확한 분리가 가능하며, 간단하고 빠르게 수행할 수 있다는 장점이 있습니다. 2. 기체크로마토그래피 기체크로마토그래피는...2025.05.07
-
Gel 제조 (SDS-PAGE 실험을 위한 사전 준비) 보고서2025.01.131. 전기영동 전기영동은 DNA와 단백질과 같은 생체 고분자들을 분리 및 정제하는 방법입니다. 전기영동 원리는 음전하를 띄고 있는 생체고분자(DNA/단백질)들에게 전기적 힘(-음전하 ->＋양전하)을 가해주어, 물질이 사이즈에 따라 분리되는 것입니다. DNA 전기영동과 단백질 전기영동(SDS-PAGE)의 차이는 DNA는 음전하를 띄고 있어 Agarose(한천) Gel에서 관찰할 수 있지만, 단백질은 양, 음전하를 갖고 있어 SDS-sample buffer와의 혼합이 필요하며 Poly Acrylamide gel에서 관찰할 수 있습니다....2025.01.13
-
IP (Immunoprecipitation)2025.01.231. IP (Immunoprecipitation) 실험주제는 IP (Immunoprecipitation)입니다. IP 기법은 항체를 이용하여 목적 단백질을 침강시켜 분리하는 실험 기법입니다. 실험에서는 FLAG 태그가 붙은 A 단백질을 발현시키고 IP 기법을 통해 분리하였습니다. Western blotting 결과에서 110kDa 부근에서 FLAG-A 단백질이 검출되었고, 50kDa와 26kDa 부근에서는 heavy chain과 light chain이 검출되었습니다. 또한 70kDa 부근에서 non-specific하게 반응된 단백질...2025.01.23
1 / 4
