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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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Cell Culture and Cell Counting using a hemocytometer 보고서2025.01.211. 세포 배양 세포 배양은 동물이나 식물에서 채취한 세포를 인공적으로 조성된 환경에서 성장시키는 과정입니다. 세포 배양에는 세포 배양 플라스틱, 세포 배양 배지, 트립신 등이 사용됩니다. 세포 배양 시 무균 상태를 유지하고 각 세포 유형에 맞는 환경을 제공해야 합니다. 2. 세포 계수 세포 계수는 세포의 수를 측정하는 과정입니다. 트립판 블루 염색법을 이용하여 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 혈구 계산기, 유세포 분석기, 쿨터 계수기 등 다양한 방법으로 세포를 계수할 수 있습니다. 3. NIH-3T3 세포 배양 ...2025.01.21
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[A+ 리포트] 100pi dish를 이용한 Cell counting and seeding (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험에 필요한 재료와 기구를 준비하고, 세포 배양 온도와 동일한 37°C로 배양액을 유지하는 것이 중요합니다. 또한 세포 배양 접시의 상태를 확인하고, 세포를 분리하기 위해 트립신-EDTA를 처리하며, 분리된 세포를 수집하고 원심분리하여 세포 펠릿을 얻는 과정을 거칩니다. 2. 세포 계수 세포 계수를 위해 세포 현탁액을 만들고 trypan blue로 염색한 후 혈구 계산기를 이용하여 세포 수를 세는 과정을 거칩니다. 이를 통해 세포 밀도와 총 세포 수를 계산할 수 있습니다. 3. 세포 분주 세포 계수 결과...2025.04.25
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세포 배양법2025.05.141. 세포 배양법 세포 배양은 생물체에서 분리해낸 세포를 체내 환경이 아닌 액체 배지, 고체 배지와 같은 외부 환경에서 키우는 것으로, 의과학과 생물학에서 자주 활용되는 기술이다. 세포 배양은 목적한 세포를 증식시키거나, 관찰하기 때문에 세포에 따라 온도, pH 등과 같은 적절한 생장 환경을 설정해야 한다. 일반적으로 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위한 amino acid, glucose와 같은 영양분이 첨가되며, 때로는 목적한 세포를 제외하고 모두 제거하기 위해 항생물질을 첨가하기도 한다. 2. LB 배지 LB는 Lysoge...2025.05.14
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[생화학실험] A+, 동물세포 배양 및 세포계수2025.01.031. 효소 반응 및 활성 이 실험에서는 효소인 트립신을 이용하여 우유의 주요 단백질인 카제인을 분해하는 과정을 관찰하였다. 온도에 따른 트립신의 활성을 확인하였는데, 0°C에서는 거의 활성이 없었고 37°C와 65°C에서는 카제인이 분해되어 우유의 투명도가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해 효소 반응에 영향을 미치는 요인 중 온도의 중요성을 알 수 있었다. 2. 단백질 분해 효소 이번 실험에서 사용된 트립신은 단백질을 펩티드로 가수분해하는 효소이다. 트립신은 아르기닌, 리신 등의 C말단 펩티드 결합을 절단하는 엔도펩티다아...2025.01.03
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23
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동물세포의 배양 및 관찰2025.01.231. 동물세포 배양 이 실험의 목적은 동물 세포 배양에 대해 알고 실험을 통해 세포의 계대배양 기술을 익히는 것입니다. 실험 방법에는 현미경으로 MCF-7 세포를 관찰하고, 세포를 계대배양하는 과정이 자세히 설명되어 있습니다. 이를 통해 동물 세포 배양 기술을 습득할 수 있습니다. 1. 동물세포 배양 동물세포 배양은 의학 및 생명공학 분야에서 매우 중요한 기술입니다. 이를 통해 다양한 세포 및 조직을 실험실에서 생산할 수 있어 질병 치료, 신약 개발, 줄기세포 연구 등에 활용할 수 있습니다. 동물세포 배양 기술은 지속적으로 발전하고...2025.01.23
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