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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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분자생물학 실험 (A+) Bacterial Cell culture 예비보고서2025.01.041. 분자생물학 분자생물학은 생물체의 기본 단위인 세포 내에서 일어나는 생명 현상을 분자 수준에서 연구하는 학문입니다. 이 실험 보고서에서는 박테리아 세포 배양 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 박테리아 세포 배양은 실험실에서 박테리아를 증식시키는 기술로, 분자생물학 연구에 필수적인 기법입니다. 2. 세포 배양 세포 배양은 실험실에서 세포를 인위적으로 증식시키는 기술입니다. 이 보고서에서는 박테리아 세포 배양에 대해 다루고 있습니다. 박테리아 세포 배양은 분자생물학 실험에서 중요한 기술로, 다양한 실험을 위해 필요한 세포를 확보...2025.01.04
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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분자생물학 실험 (A+) Bacterial Cell culture 결과보고서2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 세포 배양 실험 결과를 다루고 있습니다. 세포 배양은 살아있는 세포를 실험실 환경에서 증식시키는 기술로, 생물학 및 의학 연구에 널리 사용됩니다. 이 실험에서는 대장균 세포를 배양하여 성장 곡선, 배양액 pH 변화 등을 관찰하고 분석했습니다. 세포 배양 기술은 질병 치료제 개발, 유전자 조작, 조직 공학 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. 대장균 배양 이 보고서는 대장균 세포를 배양하여 실험을 진행했습니다. 대장균은 대표적인 박테리아로, 유전자 조작 및 단백질 생산 등의 연구에 널리 사용됩니다. ...2025.01.04
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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세포 계수 및 배양접시 seeding2025.01.021. Hemocytometer를 이용한 세포 계수 Hemocytometer는 혈액 중의 적혈구, 백혈구, 호산구 등의 세포를 세기 위해 고안된 현미경 슬라이드입니다. Hemocytometer의 격자 구조와 틈새 높이를 이용하여 세포 현탁액의 농도를 계산할 수 있습니다. 또한 trypan blue 염색을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 이를 통해 실험에 필요한 적절한 농도의 세포를 준비할 수 있습니다. 2. 세포 계수 방법 Hemocytometer 외에도 flow cytometry, CFU counting, s...2025.01.02
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포유세포의 동결보존2025.01.021. 포유세포 동결보존 포유세포를 장기간 배양하면 오염이나 유전적 변이로 인해 세포가 소실되거나 변화할 수 있다. 따라서 세포를 동결보존하여 안정적으로 유지하고 보관하는 것이 중요하다. 동결보존 과정에서는 동결보호제를 사용하여 얼음 결정 형성을 억제하고 세포 손상을 방지한다. 대표적인 동결보호제로는 DMSO, glycerol, ethylene glycol 등이 있으며, 이들은 세포막을 투과할 수 있는 특성을 가지고 있다. 동결 및 해동 속도 또한 세포 생존에 중요한 요인이므로 주의해야 한다. 1. 포유세포 동결보존 포유세포 동결보존...2025.01.02
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[생화학실험] A+, 동물세포 배양 및 세포계수2025.01.031. 효소 반응 및 활성 이 실험에서는 효소인 트립신을 이용하여 우유의 주요 단백질인 카제인을 분해하는 과정을 관찰하였다. 온도에 따른 트립신의 활성을 확인하였는데, 0°C에서는 거의 활성이 없었고 37°C와 65°C에서는 카제인이 분해되어 우유의 투명도가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해 효소 반응에 영향을 미치는 요인 중 온도의 중요성을 알 수 있었다. 2. 단백질 분해 효소 이번 실험에서 사용된 트립신은 단백질을 펩티드로 가수분해하는 효소이다. 트립신은 아르기닌, 리신 등의 C말단 펩티드 결합을 절단하는 엔도펩티다아...2025.01.03
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