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포유세포의 동결보존2025.01.021. 포유세포 동결보존 포유세포를 장기간 배양하면 오염이나 유전적 변이로 인해 세포가 소실되거나 변화할 수 있다. 따라서 세포를 동결보존하여 안정적으로 유지하고 보관하는 것이 중요하다. 동결보존 과정에서는 동결보호제를 사용하여 얼음 결정 형성을 억제하고 세포 손상을 방지한다. 대표적인 동결보호제로는 DMSO, glycerol, ethylene glycol 등이 있으며, 이들은 세포막을 투과할 수 있는 특성을 가지고 있다. 동결 및 해동 속도 또한 세포 생존에 중요한 요인이므로 주의해야 한다. 1. 포유세포 동결보존 포유세포 동결보존...2025.01.02
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RNA 추출 및 정량 실험 결과 보고서2025.01.041. RNA 추출 실험의 목적은 Trizol을 이용하여 RNA를 추출하고 정제하는 방법을 익히고, 추출된 RNA의 품질과 양을 확인하는 것입니다. 실험 방법으로는 6-well plate에 세포를 준비하고, PBS로 세척한 후 Trizol을 처리하여 RNA를 추출하는 과정이 포함됩니다. 이를 통해 RNA 추출 및 정량 기술을 습득할 수 있습니다. 1. RNA 추출 RNA 추출은 생물학 및 의학 연구에서 매우 중요한 과정입니다. RNA는 유전 정보를 전달하고 단백질 합성에 관여하는 핵산으로, 세포의 다양한 기능을 이해하는 데 필수적입니...2025.01.04
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험을 위해 clean bench 내부를 소독하고 실험 재료를 준비합니다. 배양액을 37°C로 유지하고, 세포 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신을 처리하여 세포를 분리합니다. 분리된 세포를 원심분리하여 세포 펠릿을 수집하고, 새로운 배양액에 재현탁하여 새로운 배양접시에 분주합니다. 2. 현미경 관찰 세포 배양 접시를 현미경 위에 올려놓고 세포의 상태를 관찰합니다. 세포 밀도가 70-80% 정도인지 확인합니다. 3. 트립신 처리 트립신-EDTA 용액을 세포 배양 접시...2025.04.25
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[A+ 리포트] 100pi dish를 이용한 Cell counting and seeding (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험에 필요한 재료와 기구를 준비하고, 세포 배양 온도와 동일한 37°C로 배양액을 유지하는 것이 중요합니다. 또한 세포 배양 접시의 상태를 확인하고, 세포를 분리하기 위해 트립신-EDTA를 처리하며, 분리된 세포를 수집하고 원심분리하여 세포 펠릿을 얻는 과정을 거칩니다. 2. 세포 계수 세포 계수를 위해 세포 현탁액을 만들고 trypan blue로 염색한 후 혈구 계산기를 이용하여 세포 수를 세는 과정을 거칩니다. 이를 통해 세포 밀도와 총 세포 수를 계산할 수 있습니다. 3. 세포 분주 세포 계수 결과...2025.04.25
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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Cell Culture and Cell Counting using a hemocytometer 보고서2025.01.211. 세포 배양 세포 배양은 동물이나 식물에서 채취한 세포를 인공적으로 조성된 환경에서 성장시키는 과정입니다. 세포 배양에는 세포 배양 플라스틱, 세포 배양 배지, 트립신 등이 사용됩니다. 세포 배양 시 무균 상태를 유지하고 각 세포 유형에 맞는 환경을 제공해야 합니다. 2. 세포 계수 세포 계수는 세포의 수를 측정하는 과정입니다. 트립판 블루 염색법을 이용하여 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 혈구 계산기, 유세포 분석기, 쿨터 계수기 등 다양한 방법으로 세포를 계수할 수 있습니다. 3. NIH-3T3 세포 배양 ...2025.01.21
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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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