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동물세포의 배양(생화학실험)2025.01.161. 세포 배양 세포 배양이란 일반적으로 자연환경 외부의 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 말한다. 세포는 살아있는 조직에서 분리된 후에는 신중하게 제어된 조건에서 후속적으로 유지되어야 한다. 이러한 조건은 각 세포 유형에 따라 다르지만 일반적으로 필수 영양소, 성장인자, 호르몬, 가스를 공급하는 기질 또는 배지가 있는 적합한 용기로 구성된다. 세포 배양에는 1차 배양, 2차 배양, 계대 배양 등의 방법이 사용된다. 2. 동물세포의 특성 대부분의 동물세포들은 영양분이 아무리 잘 공급된다 하더라도 증식하지 않으며, 필요에 따라서...2025.01.16
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세포 계대배양 Cell subculture 및 cell thawing 프로토콜2025.01.241. 세포 계대배양 세포 계대배양은 세포를 새로운 배양 용기로 옮겨 배양하는 과정입니다. 이 프로토콜에서는 세포 해동, 세포 계수, 세포 계대배양 등의 단계를 자세히 설명하고 있습니다. 세포 배양 시 배지, 혈청, 항생제의 비율과 사용량, 배양 온도 및 CO2 농도 등의 조건을 잘 관리해야 합니다. 2. 세포 해동 세포를 액체 질소 탱크에서 꺼내어 37°C 수조에서 1-2분 내에 해동시킵니다. 해동된 세포를 배지가 든 falcon 튜브에 옮기고 원심분리하여 상층액을 제거한 뒤 새로운 배지를 넣어 세포를 현탁합니다. 이후 세포 수를 ...2025.01.24
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[일반생물학실험]원핵세포 배양 및 관찰2025.01.231. 원핵세포 배양 및 관찰 이번 실험은 사람의 손에 묻은 다양한 종류의 균을 관찰하기 위해 고체 배지에 접종하고 배양하여 세균들을 키운 다음, 음성균과 양성균이 얼마나 도포되어 있는지 모르기 때문에 음성과 양성을 구별하지 않는 단일염색법을 통해 세균의 형태를 관찰하였다. 그리고 증식한 세균 콜로니 하나를 액체 배지에 넣어 배양하고 다시 고체 배지에 도말하여 배양하면 어떤 모습을 띠는지 실험하였다. 1. 원핵세포 배양 및 관찰 원핵세포는 진핵세포와 달리 세포핵이 없는 단순한 구조를 가지고 있습니다. 이러한 원핵세포를 배양하고 관찰하...2025.01.23
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23
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LDH assay2025.01.231. 단백질 정제 실험 주제에서 다루고 있는 LDH assay는 단백질 정제 과정에 대한 내용을 포함하고 있습니다. 단백질 정제는 다양한 종류의 단백질이 섞여 있는 샘플에서 원하는 단백질을 분리하는 작업입니다. 크로마토그래피, SDS-PAGE, Western blot 등의 방법을 통해 단백질의 순도를 점차 높여나가는 과정이 설명되어 있습니다. 2. 효소 활성 측정 이 실험에서는 LDH(Lactate Dehydrogenase)라는 효소의 활성을 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 효소 활성은 반응 속도, 특정 활성, 수율 등으로...2025.01.23
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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동물세포의 배양 및 관찰2025.01.231. 동물세포 배양 이 실험의 목적은 동물 세포 배양에 대해 알고 실험을 통해 세포의 계대배양 기술을 익히는 것입니다. 실험 방법에는 현미경으로 MCF-7 세포를 관찰하고, 세포를 계대배양하는 과정이 자세히 설명되어 있습니다. 이를 통해 동물 세포 배양 기술을 습득할 수 있습니다. 1. 동물세포 배양 동물세포 배양은 의학 및 생명공학 분야에서 매우 중요한 기술입니다. 이를 통해 다양한 세포 및 조직을 실험실에서 생산할 수 있어 질병 치료, 신약 개발, 줄기세포 연구 등에 활용할 수 있습니다. 동물세포 배양 기술은 지속적으로 발전하고...2025.01.23
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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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간 배양 실습레포트2025.01.221. 간의 기능 간은 산소가 풍부한 동맥혈과 산소가 적은 정맥피가 함께 섞이는 특별한 장소이며 혈액의 창고라고 할 만큼 우리 몸 전체 혈액의 3분의 1정도가 항상 존재한다. 간은 angiotensin 1을 만드는 angoitensinogen을 분비하고, glucose를 glycogen으로 만들어 저장하며, 공복 시 저장된 glycogen을 분해하여 혈중으로 포도당을 내보내 혈중농도를 일정하게 유지시킨다. 또한 간은 오래된 erythrocytes를 파괴하고, 혈액 응고, 물질 이동, 철 결합, 단백질 분해 억제에 관련된 많은 단백질을...2025.01.22
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