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Gel extraction 예비레포트 결과레포트2025.05.161. Gel Extraction 이번 실험의 목적은 전기영동한 Gel로부터 원하는 DNA를 추출하기 위해 Gel Purification Kit을 이용하여 DNA를 정제하는 것이었다. 실험 결과 DNA 농도가 예상보다 낮게 나왔는데, 이는 버퍼로 계속 씻어주어 DNA 양이 줄어들었거나, 원심분리가 제대로 되지 않아 원하는 DNA가 하층액에 섞여 버려졌을 가능성, 또는 DNA가 단백질이나 페놀로 오염되었을 가능성 때문인 것으로 보인다. 이를 해결하기 위해서는 원심분리 시간을 늘리거나, 이소프로판올을 추가로 넣어 DNA를 더 잘 침전시키...2025.05.16
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전기영동을 이용한 단백질의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 전기영동 전기영동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 겔 전기영동법은 전기영동 현상을 단백질 분석에 응용한 초기 형태로, 단백질 크기에 따라 분리가 가능하다. 전기영동 실험에서는 SDS 처리를 통해 단백질의 전하를 균일하게 만들어 오직 크기에 따른 분리가 이루어지도록 한다. 또한 isoelectric focusing과 2D 전기영동법 등 다양한 전기영동 기법이 있다. 2. 겔 제조 겔은 acrylamide와 bisacrylamide를 혼합하여 중합 반응을 통해 만든다...2025.01.16
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생화학 실험 보고서 - 단백질 분리2025.01.271. 단백질 분리 이번 실험에서는 MCF-7 세포를 이용하여 동물 세포에서의 단백질 분리 과정을 이해하고 단백질 분석 및 연구를 위한 준비를 하였습니다. 단백질 분리를 위해서는 세포를 깨뜨리고 안정적인 버퍼 환경을 만드는 것이 중요합니다. 다양한 방법으로 세포를 파괴할 수 있으며, 이번 실험에서는 scraper를 사용하여 MCF-7 세포를 깨뜨리고 RIPA 버퍼와 protease 억제제를 첨가하여 단백질을 추출하였습니다. 최종적으로 원심분리를 통해 상층액에 분리된 단백질을 -80°C에 보관하였습니다. 1. 단백질 분리 단백질 분리는...2025.01.27
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단백질의 분리(생화학실험)2025.01.161. 단백질 단백질이란 생화학에서 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기 물질이다. 수많은 아미노산의 연결체로 이루어져 있으며, 생물체 내의 구성 성분, 세포 안의 각종 화학반응의 촉매 역할(효소), 항체를 형성하여 면역을 담당하는 등 여러 가지 형태로 중요한 역할을 수행한다. 2. 단백질 추출 단백질을 추출하기 위해서는 버퍼를 넣고 세포나 조직을 깨뜨려줄 필요가 있다. 세포 및 조직을 깨트리는 방법에는 homogenization, sonication, french pressure cell, grinding, glass bead vort...2025.01.16
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바이오 디젤 합성 실험 - 결과 보고서 (화학공학실험)2025.01.131. 바이오 디젤 합성 이 실험은 바이오 디젤 합성 과정을 다루고 있습니다. 실험에서는 식용유, 메탄올, 수산화칼륨(KOH) 및 알루미나(KOH/Alumina)를 사용하여 무촉매, 균일계 촉매, 불균일계 촉매 조건에서 바이오 디젤을 합성하고 그 결과를 비교하였습니다. 실험 과정에는 반응기 준비, 교반 및 가열, 원심분리를 통한 분리, 메틸 에스테르 층 측정 등의 단계가 포함되어 있습니다. 1. 바이오 디젤 합성 바이오 디젤 합성은 화석 연료 의존도를 낮추고 환경 친화적인 대체 연료를 개발하는 데 있어 매우 중요한 기술입니다. 바이오...2025.01.13
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단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
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DNA 구조 및 추출2025.01.191. DNA 구조 DNA는 데옥시리보뉴클레오타이드라고 하는 단량체가 사슬의 형태로 연결된 중합체이며, 2개의 폴리뉴클레오타이드 가닥으로 이루어진 이중나선 구조의 고분자 화합물이다. DNA를 구성하는 각각의 뉴클레오타이드는 아데닌(A), 사이토신(C), 타이민(T), 구아닌(G) 중에서 하나의 질소 함유 염기를 가진다. 이 질소 함유 염기는 피리미딘과 퓨린의 2종류로 나뉘며, 각 염기에는 작용기가 부착되어 있어 단 한 가지 종류의 짝과 수소결합을 형성할 수 있다. 2. DNA 추출 DNA 추출 과정에서 buffer1의 EDTA는 세포...2025.01.19
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아주대 생실1) Plasmid DNA 추출 보고서2025.05.101. 플라스미드 DNA 추출 이 실험을 통해 플라스미드 DNA를 추출하고 전기영동을 통해 플라스미드 DNA의 형태를 관찰할 수 있었습니다. 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체 DNA와 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자로, E.coli 세균에서 플라스미드를 추출하여 DNA를 관찰했습니다. 실험에서는 여러 가지 버퍼를 사용했는데, 이는 플라스미드 DNA 추출을 위한 것입니다. 실험 결과 3kb와 10kb 부분에서 플라스미드 DNA가 관찰되었으며, 3kb 부분은 Linear DNA, 10kb 부분은 Open-circu...2025.05.10
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[A+ 리포트] Cell thawing and Seeding (세포생물학실험 프로토콜)2025.04.251. 세포 해동 세포는 액체질소의 극초저온 상태에서 DMSO(동결보존제)와 함께 보관된다. DMSO는 세포 내 물이 얼지 않도록 하여 세포 구조를 안정적으로 유지시킨다. 세포 해동 시 DMSO의 독성을 피하기 위해 얼음 결정이 사라질 정도로만 해동시킨다. 2. 세포 배양 세포 배양을 위해 37°C로 가열된 배지를 사용한다. 이는 냉장 보관된 배지를 그대로 사용하면 세포에 스트레스를 줄 수 있기 때문이다. 세포를 배양할 때는 CO2 incubator에서 배양하며, 배양 접시에 세포주, 번호, 날짜 등을 표기한다. 3. 원심분리 세포 ...2025.04.25
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[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험을 위해 clean bench 내부를 소독하고 실험 재료를 준비합니다. 배양액을 37°C로 유지하고, 세포 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신을 처리하여 세포를 분리합니다. 분리된 세포를 원심분리하여 세포 펠릿을 수집하고, 새로운 배양액에 재현탁하여 새로운 배양접시에 분주합니다. 2. 현미경 관찰 세포 배양 접시를 현미경 위에 올려놓고 세포의 상태를 관찰합니다. 세포 밀도가 70-80% 정도인지 확인합니다. 3. 트립신 처리 트립신-EDTA 용액을 세포 배양 접시...2025.04.25
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