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생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06
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배양세포로부터 단백질 분리 실험2025.12.181. 단백질 분석 과정 단백질 분석은 buffer 준비, 세포 용해, 농도 결정, 농축, 전기영동, Western blot 분석 등의 단계를 거친다. 본 실험에서는 buffer 준비와 세포 용해 단계를 수행하며, 이를 통해 배양 세포로부터 단백질을 효과적으로 추출하고 분석하는 원리를 이해한다. 2. Buffer와 완충용액 Buffer는 약산과 짝염기의 혼합물로 pH 변화를 억제하는 용액이다. pKa를 기준으로 약 ±1 pH 단위 범위에서 효과적으로 작용하며, 약산과 짝염기의 농도가 높을수록 완충용량이 커진다. 단백질 분리용 buff...2025.12.18
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닭 배아 단백질 전기영동 결과보고서2025.04.261. 전기영동 전기 영동은 시료 속 단백질 아미노산의 R group이 특유의 전하를 모두 음극 처리하여 단백질의 질량에 따라 ladder가 나타나도록 하는 방법입니다. 이때 단백질과 결합력이 좋은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate buffer를 이용하면 단백질의 구조를 풀어 선형으로 만들고, 구조가 풀린 단백질에 달라 붙어 음극을 띠도록 만들 수 있습니다. 이러한 방법으로 단백질이 분자량에 따라 이동하도록 만들 수 있습니다. 2. RIPA buffer RIPA buffer는 pH를 유지하는 완충용액 역할을 하며,...2025.04.26
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단백질 분리 및 정량 실험 보고서2025.12.121. 웨스턴 블로팅 (Western Blot) 웨스턴 블로팅은 타깃 단백질의 발현 여부와 양을 측정하는 방법으로, 항체를 이용하여 특정 단백질을 검출한다. SDS-PAGE을 통해 단백질을 분리하고, 분리된 단백질을 필터 멤브레인으로 옮기는 블로팅 과정을 거쳐, 최종적으로 항체를 이용하여 원하는 단백질을 검출해낸다. 이 실험은 웨스턴 블로팅을 위한 전 단계로 세포를 용해하고 단백질을 분리하는 과정이다. 2. RIPA Buffer (세포 용해액) RIPA buffer는 Radio Immuno Precipitation Assay buff...2025.12.12
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단백질의 분리(생화학실험)2025.01.161. 단백질 단백질이란 생화학에서 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기 물질이다. 수많은 아미노산의 연결체로 이루어져 있으며, 생물체 내의 구성 성분, 세포 안의 각종 화학반응의 촉매 역할(효소), 항체를 형성하여 면역을 담당하는 등 여러 가지 형태로 중요한 역할을 수행한다. 2. 단백질 추출 단백질을 추출하기 위해서는 버퍼를 넣고 세포나 조직을 깨뜨려줄 필요가 있다. 세포 및 조직을 깨트리는 방법에는 homogenization, sonication, french pressure cell, grinding, glass bead vort...2025.01.16