총 30개
-
TRIS 완충용액 제작 방법 및 특징2025.01.141. 완충용액 완충용액은 화학적으로 안정적인 pH 값을 유지하는 용액으로, 화학 실험, 생물학 연구, 의학 등 다양한 분야에서 중요한 역할을 한다. 완충용액은 주로 약한 산과 그 상응염기 조합으로 만들어지며, pH를 상대적으로 안정적으로 유지할 수 있게 한다. 2. Tris 완충용액 Tris 완충용액은 트리스(트리스아민)와 트리스염(트리스하이드록시메틸아미노메탄)을 혼합하여 만든 완충용액으로, pH 7.0에서 9.0까지의 범위에서 안정성을 유지할 수 있다. 트리스의 약한 산성 특성과 염기 특성을 활용하여 산과 염기의 중화 반응을 통해...2025.01.14
-
대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
-
[생화학실험] A+, 세포파쇄 및 단백질 정량법 실험2025.01.031. 세포막 구조 동·식물(진핵세포)의 세포막은 단백질과 인지질로 구성된 이중막 구조이며, 박테리아(원핵세포)의 세포막도 이와 유사한 구조를 가지고 있다. 단백질은 온도, pH 등의 요인에 의해 구조와 기능이 변화할 수 있다. 2. 세포 파쇄 방법 세포막을 파쇄하여 세포 내 단백질 및 대사체를 안정적으로 추출하는 다양한 방법이 있다. 초음파 파쇄, 칼날 분쇄, 막자와 막자사발 분쇄, 효소 파쇄, 삼투압 파쇄, 알칼리 처리, 압착법 등이 있으며 각각의 원리와 특징이 다르다. 3. 단백질 추출 및 정량 단백질은 온도, pH 등의 요인에...2025.01.03
-
[생화학실험] A+, 동물세포 배양 및 세포계수2025.01.031. 효소 반응 및 활성 이 실험에서는 효소인 트립신을 이용하여 우유의 주요 단백질인 카제인을 분해하는 과정을 관찰하였다. 온도에 따른 트립신의 활성을 확인하였는데, 0°C에서는 거의 활성이 없었고 37°C와 65°C에서는 카제인이 분해되어 우유의 투명도가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해 효소 반응에 영향을 미치는 요인 중 온도의 중요성을 알 수 있었다. 2. 단백질 분해 효소 이번 실험에서 사용된 트립신은 단백질을 펩티드로 가수분해하는 효소이다. 트립신은 아르기닌, 리신 등의 C말단 펩티드 결합을 절단하는 엔도펩티다아...2025.01.03
-
A+ 생화학실험 <13주차. His6-tagged Protein Purification> 레포트2025.01.201. 단백질 정제 단백질 정제(Protein Purification)는 생물학적 연구 및 산업적 응용을 위하여 단백질을 혼합물로부터 분리하고 정제하는 과정이다. 이 과정은 일반적으로 여러 단계를 거치며, 각 단계에서는 단백질의 용해도, 크기, 전하, 결합 친화도 등의 단백질 간 서로 다른 특성을 활용하여 단백질을 분리한다. 첫 번째 단계는 세포 용해(Cell Lysis)로, 세포벽을 파괴하여 세포 내의 단백질을 방출하는 것이다. 다음 단계는 affinity chromatography이다. 이 방법은 특정 단백질에 결합하는 리간드를 ...2025.01.20
-
A+ 생화학실험 <5주차. Transformation> 레포트2025.01.201. Competent cell (DH5α) DH5α는 recA1 유전자의 160번 아미노산이 glycine에서 aspartic acid로 변이되는 돌연변이로 인하여 endonuclease의 기능을 상실하고 재조합 효소의 활성을 억제되었다. 이에 삽입된 plasmid DNA가 세포 내에서 안정적으로 유지되고 분해되지 않도록 하여, 높은 transformation efficiency(1×10^8 cfu/μg)를 가진다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아의 chromosomal DNA와 물리적으로 분리되어 있으...2025.01.20
-
A+ 생화학실험 <6주차. Plasmid DNA Miniprep> 레포트2025.01.201. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아 내에 존재하는 extrachromosomal DNA로, 자체적 복제가 가능한 복제 기점을 가지고 있습니다. 생존에 필수적이지 않은 정보를 담고 있으며, 항생제 내성 유전자 같은 선택적 마커가 포함되기도 합니다. 이를 통해 항생제가 포함된 배지에서 cell-selection을 진행할 수 있으며, 이로부터 유전자 발현 여부를 조사할 수 있습니다. 또한 plasmid DNA는 super coiled 형태의 DNA로, 유전자 조작, 분리, cloning 등 유전공학 분야에 용이하게...2025.01.20
-
A+ 생화학실험 <4주차. 세포배양법> 레포트2025.01.201. 세포 배양법 세포 배양이란 생물학과 의과학에서 많이 활용되는 기술로, 생물체에서 분리한 세포를 체내 환경이 아닌 액체 및 고체 배지를 비롯한 외부 환경에서 키우는 것을 말한다. 세포 배양은 특정 세포를 증식하거나 관찰하므로 세포에 따른 온도, pH를 비롯하여 적절한 생장 환경을 설정하는 것이 중요하다. 일반적으로, 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위해 필요한 아세트산, 포도당 등의 영양분이 첨가된다. 필요에 따라, 목적한 세포를 제외한 나머지 세포들을 제거하기 위하여 항생물질을 넣기도 한다. 세포 배양 시, 변수를 제거하기...2025.01.20
-
A+ 생화학실험 <3주차. Agarose Gel Electrophoresis> 레포트2025.01.201. 겔 전기영동 겔 전기영동은 분자의 크기나 전하에 따라 DNA, RNA, 단백질을 비롯한 생물학적 분자들을 분리하는 실험방법 중 하나입니다. 전기영동의 원리는 gel matrix (주로 agarose 혹은 polyacrylamide) 내에 시료를 넣고, 양극과 음극으로 전기장을 가하면 분자들이 전하의 성질에 따라 이동하게 되는 것입니다. 분자의 크기 및 전하밀도에 따라 이동 속도에 차이가 발생하기 때문에, 서로 다른 크기 혹은 전하를 가진 분자들을 분리할 수 있습니다. 겔 전기영동에서 분자의 이동속도에 영향을 미치는 요인에는 입...2025.01.20
-
A+ 생화학실험 <2주차. Pipetting & 50X TAE buffer preparation> 레포트2025.01.201. Pipetting Pipet은 액체의 부피를 정확하게 측정하고, 이동하기 위해 사용하는 실험 기구이다. 일반적으로 pipet은 대기압과 실험자가 조작하는 압력의 차이를 활용한다. 실험자가 pipet의 상단을 조작하여 내부 압력을 조절함으로써, 액체가 pipet 내부로 들어오거나 나가게 된다. Pipet에는 다양한 유형과 용량이 있으며, 사용 목적에 맞게 선택할 수 있다. Pasteur pipet, Graduated pipet, Volumetric pipet, Micropipette 등이 있으며, 각각의 특징과 용도가 다르다. ...2025.01.20
1 / 3
