총 4개
-
단백질 검출 실험: BCA assay, 뷰렛반응, 닌히드린 반응2025.01.131. 단백질 단백질은 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 복잡한 사슬구조의 고분자 물질이다. 단백질의 존재를 증명하기 위해서는 발색반응을 사용할 수 있는데, 단백질 분자에 포함된 반응기가 특수한 시약과 어울려서 나타내는 반응이다. 2. BCA assay BCA assay는 알칼리의 조건에서 단백질의 펩타이드 결합과 반응하여 Cu2+가 Cu+로 환원되고, 이후 2분자의 Bicinchoninic acid(BCA)가 환원된 Cu+와 배위 결합해 562nm에서 최대 흡광도를 가지는 강한 보라색을 띠는 반응을 이용한다. Cu+의 생성은 곧 단...2025.01.13
-
Protein Electro-transfer and Western blot2025.01.231. Western blotting Western blotting은 단백질에 대한 blotting 기술을 뜻하며, 항원-항체 반응을 이용한다. 단백질 혼합물을 polyacrylamide gel에서 SDS-PAGE를 이용하여 크기에 따라 분리하고 membrane으로 electro-transfer하여 흡착시킨 후 membrane 표면에서 항체를 이용하여 원하는 단백질의 존재를 확인하는 전반적인 과정을 의미한다. 2. SDS의 역할 및 원리 SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 ...2025.01.23
-
단백질 검출2025.04.281. 단백질 검출 단백질은 탄수화물, 지질과 함께 생물체에 다량으로 포함되어 있으며, 세포의 지지, 운동, 물질 운송 기수를 구성하고 항체나 호르몬, 세포 생장 조절에 대한 분자로 활동하기 때문에 생명현상에 매우 중요하다. 이번 실험에서는 단백질을 검출하는 대표적인 방법 중 Biuret method를 이용하여 peptide 결합의 유무에 따라 검출이 가능한지 확인하였다. 2. 뷰렛 반응 (Biuret method) 뷰렛 반응 (Biuret method)은 2개 이상의 peptide 결합을 갖는 화합물, 즉 단백질이나 짧은 폴리 펩타...2025.04.28
-
생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06