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닭 배아 단백질 전기영동 결과보고서2025.04.261. 전기영동 전기 영동은 시료 속 단백질 아미노산의 R group이 특유의 전하를 모두 음극 처리하여 단백질의 질량에 따라 ladder가 나타나도록 하는 방법입니다. 이때 단백질과 결합력이 좋은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate buffer를 이용하면 단백질의 구조를 풀어 선형으로 만들고, 구조가 풀린 단백질에 달라 붙어 음극을 띠도록 만들 수 있습니다. 이러한 방법으로 단백질이 분자량에 따라 이동하도록 만들 수 있습니다. 2. RIPA buffer RIPA buffer는 pH를 유지하는 완충용액 역할을 하며,...2025.04.26
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아주대학교 생물학실험1 A+ DNA구조와 추출 보고서2025.04.261. DNA 구조 DNA (Deoxyribonucleic Acid)는 모든 원핵, 진핵 세포 및 많은 바이러스에서 발견되는 복잡한 분자 구조의 유기 화학 물질이다. DNA는 유전되는 특성의 전달을 위해 유전 정보를 암호화한다. DNA의 구성요소인 뉴클레오타이드는 당과 인산 염 그룹에 연결된 질소 함유 단위(염기)를 포함하는 유기 화합물이다. 뉴클레오타이드는 핵산의 구성요소이기 때문에 살아있는 유기체에 매우 중요하다. 2. 플라스미드 플라스미드는 박테리아 염색체와 독립적으로 복제되는 원형 디옥시리보핵산 (DNA) 분자이다. 이것은 박...2025.04.26
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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 예비레포트2025.01.191. Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR은 Denaturation, Annealing, Extension 등의 과정을 거쳐 특정 DNA 영역을 증폭시키는 분자 생물학적 기술이다. PCR 기법에는 다양한 종류가 존재하며, 민감도 상승을 위한 Nested PCR, 미지 영역의 서열 확인을 위한 Inverse PCR, RNA를 분석하는 RT-PCR 등이 있다. PCR에 필요한 구성 요소는 내열성 DNA polymerase, 2가 양이온, dNTP, 주형 DNA, Buffer, forward/reverse pr...2025.01.19
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DNA 제한효소2025.01.151. 제한효소 제한효소는 세균이 박테리오파지의 공격을 받으면 생산하는 효소로 이중 나선의 DNA의 특정한 염기서열을 인식해 그 부분의 절단에 있어 촉매작용을 하는 효소이다. 대부분의 제한효소는 인식자리(recognition site) 또는 제한 자리(restriction site)라는 특정한 염기서열이 있는 자리에서 DNA를 절단한다. 제한효소는 회문이라는 양 사슬의 5'부터 3' 방향으로 똑같은 서열을 가진 DNA의 부위를 인식해 작용한다. 제한효소가 DNA를 절단하면 이중 가닥 중 한 가닥이 돌출된 형태를 띠는데 이를 점착 말단...2025.01.15
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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단백질 분리 및 전기영동2025.01.121. Lysis buffer Lysis buffer는 세포 화합물을 분석을 위해 개방형 세포를 파괴할 때 사용되는 완충액이다. 대부분의 용해 완충액은 용해물의 산도 및 삼투압을 조절하기 위해 염(NaCl)을 함유한다. 때로는 세제(Triton X-100 또는 SDS)를 첨가하여 막 구조를 해체할 수도 있다. 또한 용해 완충액은 동물과 식물의 조직 세포 모두에서 사용할 수 있다. 2. Bradford assay Bradford assay 단백질 정량(시료 내에 포함된 단백질 양, 농도를 구하는 과정)법 중 하나로 UV-Visible ...2025.01.12
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[유전학] DNA sequencing, vector의 제작, NGS2025.05.031. DNA sequencing DNA는 단백질을 암호화 하고있는 물질로 A,T,G,C라는 기본 단위로 이루어진다. 어떤 서열을 갖고 있는 지에 따라 결과적으로 생산되는 단백질이 달라지게 되는데 이 서열을 확인하는 것은 분자생물학에 있어서 큰 의미가 있다. DNA sequencing은 그 DNA 서열을 확인하는 방법이다. 과거에는 그 방법으로 sanger method를 사용했지만 현재는 더욱 빠르고 신속하게 원하는 DNA서열을 확인할 수 있는 방법인 NGS를 통해 염기서열을 확인한다. 2. Vector 제작 우리는 DNA 재조합 기...2025.05.03
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[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
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제한효소에 의한 DNA 절단 예비 레포트2025.01.031. 제한효소 제한효소는 세포 내로 침입하는 바이러스나 외래 DNA를 절단하고 제거하는 박테리아의 자기방어 기구입니다. 제한효소는 자신의 DNA를 메틸화시켜 외부 DNA와 구분하여 보호하며, 핵산내부가수분해효소(endonuclease)의 역할을 합니다. 제한효소의 종류는 다양하지만 크게 I, II, III형으로 분류할 수 있으며, 각각 알맞은 반응 조건을 가지고 있습니다. 제한효소는 DNA 재조합 기술에서 널리 사용되는데, 특히 II형 제한효소가 가장 일반적으로 사용됩니다. 2. 제한효소의 절단 제한효소가 DNA를 절단하면 잘린 부...2025.01.03
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