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PlasmidDNA Purification & Sanger Sequencing 보고서2025.01.211. Bacterial transformation 박테리아 transformation은 특정 DNA 조각을 박테리아의 유전체 내로 삽입하여 새로운 유전형질이 발현되도록 하는 방법입니다. 박테리아 plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 항생제 내성 유전자를 가지고 있어 외부 유전 물질을 자유롭게 삽입할 수 있습니다. 이를 통해 약 8kb의 긴 DNA 조각을 박테리아 plasmid에 삽입하여 복제할 수 있습니다. 2. Liquid LB culture 및 Colony inoculat...2025.01.21
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 2주차 pH와 완충용액2025.05.021. pH 측정 pH 측정을 위해 pH 미터를 사용하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. pH 미터의 보정, 완충 용액 사용 등 pH 측정을 위한 기본적인 절차와 방법을 다루고 있습니다. 2. 완충 용액 인산염 완충 용액과 암모늄 완충 용액의 제조 방법과 특성에 대해 설명하고 있습니다. 완충 용액의 pH 조절 및 활용 방법 등을 다루고 있습니다. 3. 산-염기 평형 Henderson-Hasselbalch 방정식을 이용하여 pH와 pKa의 관계를 설명하고 있습니다. 이를 통해 산-염기 평형 상태에서의 pH 조절 방법을 다루고 있습니다....2025.05.02
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멸균 시 미생물이 죽으면서 오랜 시간이 지나면 성장 배지가 자랄 수 없는 것을 보여주는 영문레포트2025.05.121. 멸균 멸균은 실험에 사용되는 배지와 기구를 미생물로부터 완전히 제거하는 과정이다. 미생물이 죽으면 배지에서 더 이상 자랄 수 없게 된다. 2. 배지 배지는 미생물을 배양하기 위해 필요한 영양분과 성분들로 구성된다. 고체 배지와 액체 배지로 나뉘며, 다양한 종류의 배지가 사용된다. 3. 멸균 방법 멸균 방법에는 열 멸균, 화학 멸균, 방사선 멸균 등이 있다. 각 방법마다 장단점이 있으며, 실험 목적과 대상에 따라 적절한 방법을 선택해야 한다. 4. 무균 기술 무균 기술은 실험 과정에서 미생물 오염을 방지하기 위한 기술이다. 실험...2025.05.12
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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분자생물학 실험 (A+) Mammalian cell cultrure and transfection 결과보고서2025.01.041. Mammalian cell culture 보고서에는 포유동물 세포 배양 실험에 대한 내용이 포함되어 있습니다. 실험에서는 포유동물 세포를 배양하고 형질 도입(transfection)하는 과정이 설명되어 있습니다. 실험 결과와 관찰 내용이 자세히 기술되어 있습니다. 2. Transfection 보고서에는 포유동물 세포에 유전자를 도입하는 형질 도입(transfection) 실험에 대한 내용이 포함되어 있습니다. 실험에서는 다양한 방법을 사용하여 세포에 유전자를 도입하고 그 결과를 관찰하였습니다. 실험 과정과 결과가 자세히 기술되...2025.01.04
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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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Polymerase chain reaction2025.01.231. Polymerase chain reaction PCR(Polymerase chain reaction)은 단시간에 DNA의 원하는 부분을 수백만개 이상으로 증폭시키는 기술이다. PCR은 생물학의 거의 모든 분야에서 쓰이지 않는 곳이 없을 정도로 널리 퍼지고 중요한 실험적 기법이며, 그에 따라 상황과 목적, 기술발전에 따라 Multiplex PCR, Long-range PCR, Single-cell PCR등 수많은 파생 기술들이 존재한다. PCR은 크게 Denaturation, Annealing, Extension의 세 과정으로 ...2025.01.23
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크로마토그래피 결과 레포트2025.01.021. 크로마토그래피의 원리 크로마토그래피는 분배 이론을 기반으로 합니다. 물질들은 이동상(mobile phase)과 정지상(stationary phase)으로 구성된 계에 놓이게 되며, 각 물질의 상대적 움직임은 이동상의 움직임과 이동상의 움직임 지연효과들 사이의 균형의 결과입니다. 지연효과에는 대표적으로 분배가 있으며, 크로마토그래피에서 분배계수는 정지상에 있는 용질의 농도와 이동상에 있는 용질의 농도의 비율로 계산됩니다. 분배계수가 크면 클수록 더 많은 분자들이 정지상에 있게 되어 용질이 컬럼을 통해 느리게 이동하게 됩니다. 2...2025.01.02
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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