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Western blot 보고서2025.05.071. Western blot Western blot은 특정 단백질을 검출하는 기법으로, 단백질 혼합물을 전기영동으로 분리하고 membrane에 옮긴 후 항원-항체 반응을 이용하여 목표 단백질을 찾아내는 방법이다. 이 과정에는 샘플 준비, 전기영동, blotting, 검출 등의 단계가 포함된다. 2. 단백질 분리 단백질 혼합물은 SDS-PAGE를 통해 크기에 따라 분리된다. SDS는 단백질의 이차, 삼차 구조를 풀어 단백질이 분자량에 따라 이동할 수 있게 한다. 전기영동 후 단백질은 membrane으로 옮겨진다. 3. 항원-항체 반응...2025.05.07
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단백질의 정량분석2025.05.051. 단백질 정량 분석 이 실험에서는 Lowry method와 Bradford method를 사용하여 단백질의 농도를 측정하였습니다. Lowry method는 단백질의 아마이드결합에 의한 구리이온의 환원을 토대로 측정하는 방식이며, Bradford method는 Coomassie Brilliant Blue 염색약이 단백질과 결합하여 색이 변하는 것을 이용하는 방식입니다. 실험 결과, 각 미지시료의 단백질 농도가 다르게 나온 것으로 보아 시료 간 단백질 함량의 차이가 있음을 알 수 있었습니다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석...2025.05.05
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A+ 생화학실험 <6주차. Plasmid DNA Miniprep> 레포트2025.01.201. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아 내에 존재하는 extrachromosomal DNA로, 자체적 복제가 가능한 복제 기점을 가지고 있습니다. 생존에 필수적이지 않은 정보를 담고 있으며, 항생제 내성 유전자 같은 선택적 마커가 포함되기도 합니다. 이를 통해 항생제가 포함된 배지에서 cell-selection을 진행할 수 있으며, 이로부터 유전자 발현 여부를 조사할 수 있습니다. 또한 plasmid DNA는 super coiled 형태의 DNA로, 유전자 조작, 분리, cloning 등 유전공학 분야에 용이하게...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <2주차. Pipetting & 50X TAE buffer preparation> 레포트2025.01.201. Pipetting Pipet은 액체의 부피를 정확하게 측정하고, 이동하기 위해 사용하는 실험 기구이다. 일반적으로 pipet은 대기압과 실험자가 조작하는 압력의 차이를 활용한다. 실험자가 pipet의 상단을 조작하여 내부 압력을 조절함으로써, 액체가 pipet 내부로 들어오거나 나가게 된다. Pipet에는 다양한 유형과 용량이 있으며, 사용 목적에 맞게 선택할 수 있다. Pasteur pipet, Graduated pipet, Volumetric pipet, Micropipette 등이 있으며, 각각의 특징과 용도가 다르다. ...2025.01.20
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연세대학교 생화학실험(1) 6주차 Peptide Mass Fingerprinting In-gel Digestion2025.05.041. Peptide Mass Fingerprinting (PMF) Peptide Mass Fingerprinting (PMF)은 단백질 동정을 위한 기술로, 단백질을 효소로 절단하여 생성된 펩타이드의 질량을 측정하고 데이터베이스와 비교하여 단백질을 식별하는 방법입니다. 이 기술은 SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질 밴드에서 시작되며, 밴드를 절단하고 효소로 소화하여 생성된 펩타이드의 질량을 질량분석기로 측정합니다. 이렇게 얻은 펩타이드 질량 데이터를 데이터베이스와 비교하여 단백질을 동정하게 됩니다. 2. In-gel Digesti...2025.05.04
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 9주차 흡광광도법2025.05.041. absorption spectrophotometry 흡광광도법은 빛의 흡수 정도를 측정하여 물질의 농도를 분석하는 기술입니다. 이 방법은 320~800nm 범위의 파장에서 빛의 흡수를 측정하며, 흡광도(A)는 투과도(T)의 로그 값으로 계산됩니다. 베르-람버트 법칙에 따르면 흡광도는 물질의 농도, 경로 길이, 몰 흡광 계수의 곱에 비례합니다. 이를 이용하여 표준 검량선을 작성하고 미지 시료의 농도를 측정할 수 있습니다. 2. spectrophotometer 분광광도계는 특정 파장의 빛을 선택적으로 투과시켜 시료의 흡광도를 측정...2025.05.04
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단백질 정량 분석 예비 레포트(A+)2025.05.061. 단백질 정량 분석 이 보고서는 단백질 정량 분석에 대한 내용을 다루고 있습니다. 다양한 단백질 정량 분석법(UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등)에 대해 설명하고, Lowry법을 이용하여 단백질 시료를 정량하는 실험을 수행하였습니다. 또한 UV-Vis 분광광도계의 사용법을 숙지하고, 이를 통해 미지의 단백질 시료의 흡광도를 측정하였습니다. 실험 결과를 바탕으로 각 분석법의 장단점을 비교하고, 단백질 정량 분석의 원리와 응용에 대해 설명하고 있습니다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 생물학, 의학, ...2025.05.06
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완충용액 제조 및 pH 측정2025.01.031. 산 · 염기의 기본 개념과 pH 실험에서는 산 · 염기의 기본 개념과 pH의 의미를 이해하고자 한다. pH는 수용액 내 수소이온 농도를 나타내는 척도로, 산성과 염기성을 구분하는데 사용된다. 강산과 강염기는 100% 이온화되어 pH 변화가 크지만, 약산과 약염기는 일부만 이온화되어 완충작용을 통해 pH 변화를 완화시킬 수 있다. 2. 완충용액의 사용 이유 생화학 및 생명과학 실험에서는 pH 변화에 민감한 반응이 많이 일어나므로, 완충용액을 사용하여 pH를 일정하게 유지시켜 주는 것이 중요하다. 완충용액은 약산과 그 짝염기, 또...2025.01.03
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헤모글로빈 측정 시험2025.01.131. 헤모글로빈 측정 헤모글로빈(Hb)의 농도를 측정하는 실험이다. 헤모글로빈 농도 측정은 빈혈을 진단하는 필수적인 생화학적 조사 방법이며, 적혈구 증가증의 중요한 지표가 되므로 헤모글로빈 농도 측정 실험을 숙지할 수 있어야 한다. 또한 많은 실험에서 사용되는 micro 피펫의 사용법을 숙지한다. 2. 분광광도계 사용 분광광도계는 빛을 이용하여 투과/반사율 등을 측정하여 샘플과 미지 시료의 구성, 농도 등을 측정할 수 있는 기계로서 광원, 검출기, 단색 화장치로 구성되어 있다. 분광광도계를 사용하여 시료의 흡광도를 측정할 때는 반드...2025.01.13
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전기영동을 이용한 단백질의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 전기영동 전기영동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 겔 전기영동법은 전기영동 현상을 단백질 분석에 응용한 초기 형태로, 단백질 크기에 따라 분리가 가능하다. 전기영동 실험에서는 SDS 처리를 통해 단백질의 전하를 균일하게 만들어 오직 크기에 따른 분리가 이루어지도록 한다. 또한 isoelectric focusing과 2D 전기영동법 등 다양한 전기영동 기법이 있다. 2. 겔 제조 겔은 acrylamide와 bisacrylamide를 혼합하여 중합 반응을 통해 만든다...2025.01.16
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