총 30개
-
Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량 (생화학 실험)2025.01.161. 단백질 정량 실험 목적은 Lowry 방법으로 수용액에 녹아 있는 단백질의 양을 정량하는 것입니다. 이를 위해 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득합니다. Lowry 단백질 분석법은 강알칼리 조건에서 구리 이온과 펩타이드 결합의 반응, 그리고 Folin-Ciocalteu 시약과의 반응을 통해 단백질을 정량합니다. 이 방법은 트립토판, 시스테인, 티로신 등의 아미노산과 반응하여 발색되는 원리를 이용합니다. 2. 분광광도법 분광광도법은 물질에 의한 빛의 흡수 현상을 이용하여 화학물질의 양을 정량하는 방법입니다. ...2025.01.16
-
전기영동을 이용한 단백질의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 전기영동 전기영동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 겔 전기영동법은 전기영동 현상을 단백질 분석에 응용한 초기 형태로, 단백질 크기에 따라 분리가 가능하다. 전기영동 실험에서는 SDS 처리를 통해 단백질의 전하를 균일하게 만들어 오직 크기에 따른 분리가 이루어지도록 한다. 또한 isoelectric focusing과 2D 전기영동법 등 다양한 전기영동 기법이 있다. 2. 겔 제조 겔은 acrylamide와 bisacrylamide를 혼합하여 중합 반응을 통해 만든다...2025.01.16
-
형광 염색과 형광 현미경을 통한 세포의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 형광 염색 형광 염색 시약은 생물학적 샘플에 특정 형광 신호를 부여하여, 현미경 등의 장비를 통해 연구자들이 생물학적 샘플 내에서 특정 대상을 더 쉽게 식별하고 분석할 수 있게 돕는다. 형광 염색을 하는 이유는 형광 염색이 세포 내 특정 구조나 분자를 명확하게 식별하고, 그 위치와 양을 정량화하는 데 유용하기 때문이다. 예를 들어 핵산을 염색시키면 세포의 핵을 명확하게 식별할 수 있고 세포질의 단백질을 염색시키면 세포질을 명확히 식별할 수 있게된다. 또한 형광 염색을 통해 세포 분열, 단백질 발현, 세포 사멸 등과 같은 생물학...2025.01.16
-
단백질의 분리(생화학실험)2025.01.161. 단백질 단백질이란 생화학에서 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기 물질이다. 수많은 아미노산의 연결체로 이루어져 있으며, 생물체 내의 구성 성분, 세포 안의 각종 화학반응의 촉매 역할(효소), 항체를 형성하여 면역을 담당하는 등 여러 가지 형태로 중요한 역할을 수행한다. 2. 단백질 추출 단백질을 추출하기 위해서는 버퍼를 넣고 세포나 조직을 깨뜨려줄 필요가 있다. 세포 및 조직을 깨트리는 방법에는 homogenization, sonication, french pressure cell, grinding, glass bead vort...2025.01.16
-
동물세포의 배양(생화학실험)2025.01.161. 세포 배양 세포 배양이란 일반적으로 자연환경 외부의 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 말한다. 세포는 살아있는 조직에서 분리된 후에는 신중하게 제어된 조건에서 후속적으로 유지되어야 한다. 이러한 조건은 각 세포 유형에 따라 다르지만 일반적으로 필수 영양소, 성장인자, 호르몬, 가스를 공급하는 기질 또는 배지가 있는 적합한 용기로 구성된다. 세포 배양에는 1차 배양, 2차 배양, 계대 배양 등의 방법이 사용된다. 2. 동물세포의 특성 대부분의 동물세포들은 영양분이 아무리 잘 공급된다 하더라도 증식하지 않으며, 필요에 따라서...2025.01.16
-
완충용액과 산성도 (생화학실험)2025.01.161. 완충용액 완충용액은 일반적으로 산이나 염기를 가해도 수소 이온 농도(pH)가 크게 변하지 않는 용액을 말한다. 이번 실험에서는 아세트산과 아세트산 나트륨을 섞어 만든 완충용액의 특성을 확인하였다. 완충용액은 약산과 그 짝염기를 동일한 농도로 섞어서 제조할 수 있으며, 산을 넣으면 정반응에 의해 염기가 생기고 염기를 넣으면 역반응에 의해 산이 생기면서 수소 이온 농도의 변화가 완충되는 메커니즘을 가지고 있다. 2. pH pH는 수소 이온 농도 지수를 의미하며, 화학에서 물질의 산과 염기의 강도를 나타내는 척도로 사용된다. 중성 ...2025.01.16
-
산성탈인산가수분해효소의 분리 및 정제 결과보고서2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 이 실험의 목적은 세포 또는 조직(맥아)으로부터 산성 탈인산가수분해효소를 추출하고 정제하여 효소 활성도를 측정하는 것입니다. 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 합니다. 이 효소는 특정 기질(PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매합니다. 실험에서는 원심분리와 여과를 통해 효소를 포함한 상층액을 분리하고, MgCl2와 (NH4)2SO4를 이용한 염석 효과로 효소를 정제하였습니다. 2. 원심분리기 사용 원심분리기 사용 시 주의할 점은 로터의...2025.01.23
-
생화학 실험/실습 보고서 (아미노산의 적정)2025.01.231. 아미노산 적정 이 실험의 목적은 미지의 아미노산 용액을 염기성 용액으로 적정하여 적정 곡선을 통해 어떤 아미노산인지 확인하는 것입니다. 실험 방법은 0.2M NaOH 용액을 제조하고 pH 미터를 보정한 후, 0.1M 미지 아미노산 용액 A 10mL에 NaOH 용액을 0.5mL씩 떨어뜨리면서 pH를 측정하여 적정 그래프를 그리고 대략적인 pKa값과 당량점, 사용한 아미노산이 Lysine, Phenylalanine, Aspartic acid 중 하나인지 확인하는 것입니다. 1. 아미노산 적정 아미노산 적정은 아미노산의 농도를 정확...2025.01.23
-
단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
-
Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량2025.01.231. 단백질 정량 이 실험의 목적은 Lowry-Folin법을 이용하여 수용액에 녹아있는 단백질을 정량하고 흡광도 그래프를 그리는 방법을 익히는 것입니다. 실험 방법에는 BSA 표준곡선 작성, 미지의 단백질 시료 측정, 흡광도 측정 및 분석 등의 단계가 포함되어 있습니다. 2. Lowry-Folin법 Lowry-Folin법은 단백질 정량에 널리 사용되는 방법으로, 구리 이온과 단백질의 반응을 통해 청색 발색 반응이 일어나는 원리를 이용합니다. 이 실험에서는 BSA 표준용액을 이용하여 표준곡선을 작성하고, 미지의 단백질 시료의 농도를 ...2025.01.23
2 / 3
