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[기기분석실험 A+] 분광광도계를 이용한 평형상수의 측정2025.01.171. 화학평형 화학평형이란 시간의 경과에 따라 반응물과 생성물의 농도가 일정하게 유지되는 상태이다. 평형상수는 균형 반응식의 계수와 관련한 평형 혼합물들의 농도 비율이 항상 일정한 값을 갖는 상수이다. 평형상수를 이용하여 반응의 진행 정도와 반응의 방향을 예측할 수 있다. 2. Beer-Lambert 법칙 Beer-Lambert 법칙은 적외선 및 원자흡광분광법에서 분광광도법에 의한 정량분석에서 사용되는 중요한 법칙이다. 흡광도 A는 시료 중에 함유되어 있는 흡광하는 화학종의 농도에 비례한다. 3. FeSCN2+ 착이온 Fe3+와 S...2025.01.17
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[기기분석실험 A+] 분광광도계를 이용한 정량 분석2025.01.171. 분광분석 분광분석은 빛을 분리하여 분석하는 방법이며, 분자의 전자구조적 성질을 알아내는 가장 강력한 수단이다. 화합물이 흡수 또는 방출하는 전자기 복사선(빛)의 파장과 흡수 또는 방출의 정도를 측정하여 화합물의 농도를 알아낸다. 분자가 일정한 파장의 빛을 흡수하는 정도를 측정하여 용액 속에 포함되어 있는 화합물의 농도를 알아내는 목적으로 활용한다. 2. 분광광도계 분광광도계는 보통 광원, cell, monochromator, detector, 신호 처리기로 구성되어 있다. 광원은 빛을 발생하는 장치, cell은 시료를 담는 그...2025.01.17
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생명과학실험1 ELISA2025.01.171. ELISA 실험의 원리 ELISA 실험은 항원-항체 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 특정 항원의 존재 여부 및 농도를 분석하는 기법이다. 항체와 항원의 특이적 결합과 효소-기질 반응을 이용하여 목표 항원을 검출할 수 있다. 2. ELISA의 종류 ELISA에는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA 등 다양한 방식이 있다. 각 방식은 항원과 항체의 배치와 사용되는 항체의 수에 따라 차이가 있다. Indirect ELISA는 2차 항체를 사용하여 다양한 1차 항체에 대한 검출...2025.01.17
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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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분광광도계를 이용한 농도 측정2025.01.211. 분광광도계 분광광도계는 시료 용액에 빛을 투과시켜 시료의 흡광도를 측정하는 장치입니다. 흡광도를 측정하면 화학종의 농도를 알 수 있습니다. 분광광도계는 유기물이나 무기물 모두에 대한 응용 범위가 넓고, 감도가 좋으며 측정이 쉽고 편리합니다. 2. Lambert-Beer's law Lambert-Beer's law는 투광도(Transmittance)와 흡광도(Absorbance)의 관계를 나타내는 법칙입니다. 투광도는 시료의 농도와 무관하지만, 흡광도는 시료의 농도, 몰 흡광계수, 빛 경로 길이에 비례합니다. 이 법칙을 이용하면...2025.01.21
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catalase enzyme activity2025.01.231. 효소 효소란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매로 각각의 효소는 한 가지 물질에만 작용한다. 다른 촉매와 마찬가지로 반응 후에도 효소는 변하지 않고 그대로 남아 있기 때문에 재활용을 하여 다시 활용한다. 특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진하는데, 효소와 결합하는 반응물을 기질이라고 하고 효소에서 기질과 결합하는 특정 부분을 활성부위 또는 기질 결합 부위라고 한다. 2. catalase catalase는 과산화수소분해효소로 H2O2→2H2O+O2의 화학반응을 촉매하는 산화환원효소 중 하나이다. cata...2025.01.23
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산성 탈인산가수분해효소의 활동도측정 및 정량2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며, 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 한다. 이 효소는 특정 기질(예: p-니트로페닐 인산염, PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매한다. 이 실험의 기질인 PNPP는 가수분해되면 노란색 화합물인 p-니트로페놀을 생성하며, 이 변화를 통해 효소의 활성을 측정할 수 있다. 산성 탈인산가수분해효소는 pH 5.0 이하의 산성 조건에서 가장 잘 작용한다. 2. 효소 활성 측정 및 정량 분석 PNPP를 이용한 효소 활성 측정: 산성 탈인산가수분해...2025.01.23
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UV-VIS 보고서2025.01.271. UV-Vis 분광기 UV-Vis 분광기는 시료 중에 포함된 특정 성분의 농도에 따라 빛이 흡수되는 양이 변하고 이에 따른 투광도가 변하는 것을 측정하여 농도를 계산해내는 기기입니다. UV-Vis 분광기는 광원, 단색화 장치, 시료 장착부, 검출기로 구성되어 있으며, 물질의 특정 파장 흡수 특성을 측정하여 물질의 농도를 분석할 수 있습니다. 2. Beer-Lambert 법칙 Beer-Lambert 법칙에 따르면 용액의 농도와 흡광도는 비례관계에 있습니다. 즉, 용액의 농도가 증가할수록 흡광도가 증가하게 됩니다. 이를 통해 미지 ...2025.01.27
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[생화학실험]단백질 정량(Lowry 법)2025.05.041. 단백질 정량(Lowry법) Lowry법은 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu^{2+} 이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. Cu^{2+} 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시켜 강한 푸른색을 생성한다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01~1.0㎎/㎖의 경우에 측정 가능하다. 2. Biuret 반응 두 개 이상의 펩티드 결합을 갖는 화합물들은 알칼리성 용액에서 황산구리로 처리하면...2025.05.04
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새로운 박테리아 종 동정을 위한 DNA 추출2025.05.081. DNA 추출 과정 본 실험에서는 미지 균주의 DNA를 추출하는 과정을 수행하였다. 균주를 PBS에 현탁하고 원심분리하여 세척한 뒤, lysozyme과 SDS를 처리하여 세포를 용균시켰다. 이후 PCI, chloroform을 이용하여 단백질과 불순물을 제거하고 에탄올 침전을 통해 DNA를 회수하였다. 최종적으로 0.1x SSC 완충액에 녹여 DNA 농도를 측정하였다. 그러나 260/280, 260/230 비율이 이상적인 수준에 미치지 못하여 순수한 DNA 추출에는 어려움이 있었던 것으로 나타났다. 2. DNA 추출 시약의 역할 ...2025.05.08