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제한효소 지도 작성 및 DNA 분석2025.11.121. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 그 부위에서 DNA를 절단하는 단백질입니다. 각 제한효소는 고유한 인식 부위를 가지고 있으며, 이를 이용하여 DNA를 특정 위치에서 절단할 수 있습니다. 제한효소 지도 작성에서는 여러 제한효소를 사용하여 DNA를 절단하고, 생성된 단편의 크기를 분석하여 DNA 상의 제한효소 인식 부위의 위치를 결정합니다. 2. 제한효소 지도 작성(Restriction Mapping) 제한효소 지도 작성은 DNA 분자 상에서 제한효소의 인식 부위 위치를 파악...2025.11.12
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생물학 실험 보고서: 당질의 검정2025.11.121. 당질 검정 당질은 탄수화물의 일종으로 생물체의 주요 에너지원입니다. 당질 검정은 시료에 포함된 환원당이나 비환원당의 존재 여부를 확인하는 생화학 실험입니다. 주로 벤딕트 시약이나 펠링 시약을 사용하여 환원당을 검정하며, 색상 변화를 통해 당질의 종류와 농도를 판별합니다. 2. 환원당과 비환원당 환원당은 자유로운 알데하이드기나 케톤기를 가지고 있어 산화 환원 반응을 일으킬 수 있는 당입니다. 포도당, 과당, 갈락토스 등이 해당합니다. 비환원당은 자유 알데하이드기가 없어 환원 반응을 보이지 않으며, 수크로스가 대표적입니다. 검정 ...2025.11.12
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생화학 실험/실습 보고서 (아미노산의 적정)2025.01.231. 아미노산 적정 이 실험의 목적은 미지의 아미노산 용액을 염기성 용액으로 적정하여 적정 곡선을 통해 어떤 아미노산인지 확인하는 것입니다. 실험 방법은 0.2M NaOH 용액을 제조하고 pH 미터를 보정한 후, 0.1M 미지 아미노산 용액 A 10mL에 NaOH 용액을 0.5mL씩 떨어뜨리면서 pH를 측정하여 적정 그래프를 그리고 대략적인 pKa값과 당량점, 사용한 아미노산이 Lysine, Phenylalanine, Aspartic acid 중 하나인지 확인하는 것입니다. 1. 아미노산 적정 아미노산 적정은 아미노산의 농도를 정확...2025.01.23
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식물 조직으로부터 단백질 추출 및 정량 실험2025.12.131. 단백질 정량 분석법 Lowry assay, Bradford assay, Bio-Rad DC Protein Assay 등 다양한 단백질 정량 방법을 비교 분석했다. Lowry assay는 Folin-Ciocalteau 시약을 이용하며 포스포몰리브덴산-포스포텅스텐산 염이 생성된다. Bradford assay는 Coomassie blue 염료 기반으로 가장 빠르고 수행이 용이하며 1~20μg의 적은 양도 측정 가능하다. Bio-Rad DC Protein Assay는 Bradford assay의 변형으로 alkaline copper ...2025.12.13
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젤 크로마토그래피와 SDS-PAGE를 이용한 단백질 분리 분석2025.12.131. 젤 크로마토그래피(Gel Filtration) 젤 크로마토그래피는 컬럼 크로마토그래피의 한 형태로 단백질이나 핵산 등 생체 고분자 화합물의 분리에 이용된다. 젤 입자는 dextran, agarose, polyacrylamide 중합체로 구성되며 미세한 구멍을 가지고 있다. 작은 분자는 구멍 속으로 들어가 느리게 빠져나오고, 큰 분자는 구멍에 들어갈 수 없어 빠르게 빠져나온다. 이 방법으로 분자를 크기에 따라 분리할 수 있으며, 표준 샘플과 비교하여 분자량을 측정할 수 있다. 2. SDS-PAGE 전기영동 SDS-PAGE는 단백...2025.12.13
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Western Blot (Immunoblotting) 생화학 실험 레포트2025.12.131. Western Blot (Immunoblotting) Western blot은 항원-항체 반응의 특이성을 이용하여 단백질을 검출하는 방법이다. SDS-PAGE를 통해 전기적으로 분리된 단백질을 membrane에 옮긴 후, primary antibody와 secondary antibody를 이용하여 target protein을 검출한다. 이 방법은 높은 특이성과 감도를 가지며, 혼합 단백질 시료의 정량 분석에 유용하게 사용된다. 실험에서는 α-TUB antibody를 사용하여 tubulin 단백질을 검출했다. 2. SDS-PAG...2025.12.13
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RT-qPCR을 통한 mRNA 발현 확인 실험2025.12.131. RT-qPCR (Real-time quantitative PCR) RT-qPCR은 핵산을 증폭시키면서 동시에 그 농도를 실시간으로 측정하는 PCR 기술입니다. 형광 리포터를 이용하여 매 사이클마다 PCR 산물의 양을 측정하며, exponential phase에서 정확한 DNA 정량이 가능합니다. Ct(Cycle threshold)는 형광신호가 threshold를 넘기 위해 필요한 사이클 수로, 초기 핵산의 양이 적으면 높은 Ct값이 나옵니다. 상대 정량(Relative quantification) 방법으로 실험군과 대조군의 유...2025.12.13
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식물 조직에서 RNA와 genomic DNA 분리 및 전기영동 분석2025.12.131. 핵산 추출 및 정제 식물 조직에서 total RNA와 genomic DNA를 분리하기 위해 액체질소로 세포벽을 파쇄한 후 TRIzol 시약(phenol과 guanidine isothiocyanate 포함)을 사용하여 RNA를 추출한다. Guanidine isothiocyanate는 RNase를 불활성화시키고, phenol은 DNA를 파괴한다. Chloroform을 추가하여 층을 분리하고, isopropanol로 DNA와 RNA를 침전시킨다. Genomic DNA 추출 시 CTAB buffer를 사용하여 polysaccharid...2025.12.13
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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단백질의 정량실험 Lowry method2025.01.201. 단백질 정량 단백질 정량은 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정이다. 단백질을 가수분해하면 peptide bond가 끊어지면서 아미노산이 유리된다. 단백질의 본질, 시료에 있는 다른 성분들의 특성, 정량분석의 신속도 및 정밀도 등에 따라 적당한 방법을 선택해야 한다. Lowry 법은 Biuret 반응과 Folin-Ciocalteu 반응을 이용하여 단백질을 정량하는 방법으로, 감도가 비교적 넓고 오랫동안 광범위하게 이용되고 있다. 2. Lowry 법 Lowry 법은 알칼리성 용액에서 단백질의 펩티드 결합과 구리...2025.01.20
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