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대장균에서 재조합 단백질 생산 및 정제2025.01.131. 재조합 단백질 생산 대장균 BL21(DE3) 균주는 재조합 단백질 고발현에 널리 사용되며, lac 프로모터와 T7 프로모터를 이용하여 IPTG 유도 하에 단백질을 발현할 수 있다. 본 실험에서는 pET28a 벡터를 사용하여 His-tag 융합 단백질을 생산하고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피와 FPLC를 통해 단백질을 정제하는 방법을 익혔다. 2. 단백질 분석 SDS-PAGE를 통해 단백질 크기별 분리와 정제 과정을 확인하였고, Bradford assay로 단백질 농도를 정량하였다. 또한 DES와 OASS 효소 활성 측정을...2025.01.13
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Plasmid DNA mini-preparation and gel electrophoresis2025.01.141. 대장균 대장균은 인간을 비롯한 동물의 대장과 소장에서 발견되는 박테리아의 일종이다. 대장균은 인간에게 해를 끼치지 않으며 오히려 영양분을 소화하고 흡수하는 과정에서 인간에게 도움을 준다. 하지만 경우에 따라 식중독이나 콜레라를 유발하는 병원균으로 작용할 수 있다. 대장균은 산소의 농도나 온도의 변화에 영향을 상대적으로 받지 않으며 다양한 물질로부터 에너지를 얻을 수 있는 능력이 있어 빠르게 번식하고 쉽게 죽지 않는다. 이러한 특징 때문에 대장균은 생명공학이나 유전체 연구에서 자주 사용되는 생물이다. 2. 플라스미드 DNA 추출...2025.01.14
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노인 신우신염2025.05.061. 급성 신우신염 급성 신우신염은 요로감염의 일종으로 신장 및 신우에 세균 감염이 발생하는 질병입니다. 여성에게 많이 나타나는 이유는 해부학적 구조상 여성이 남성에 비해 요도가 짧아 세균에 의한 감염이 생길 가능성이 높기 때문입니다. 또한 여름철에는 땀이 많이 나면서 하부요로감염으로 인한 신우신염 발병률이 증가하여 많은 사람들의 세균에 의한 감염이 원인이며, 원인균의 85%는 대장균(E. coli)입니다. 급성신우신염의 원인과 진단, 치료방법 등을 상세히 분석하여 대상자들에게 신뢰감 있고 정확한 지식을 전달하고 전문적인 간호를 제...2025.05.06
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건조필름법을 이용한 대장균(군) 정성 정량시험법2025.01.241. 대장균(군) 정성·정량시험법 이 실험은 대장균군의 정성·정량시험법 중 건조필름법을 사용하여 대장균군과 대장균의 정성 및 정량 분석을 하고자 한다. 건조필름법에 의거하여 시료를 희석배수에 따라 분주 및 배양하고, 배양된 페트리필름에서 대장균군·대장균의 정성 및 정량 분석하는 법을 익히고자 한다. 2. 지표미생물 지표미생물은 식품의 제조, 가공 또는 저장과정에 대하여 전반적으로 위생적인 취급·관리가 되었는지 또는 병원성 미생물에 오염되었는지 여부를 간접적으로 알아보기 위해 사용되는 미생물이다. 대장균군, 대장균, 장구균 등이 이에...2025.01.24
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박테리아의 형질 전환 예비보고서2025.01.121. 박테리아의 형질전환 박테리아는 접합을 통해 다른 개체와 유전자를 주고받으며, 주변 환경에 존재하는 DNA 조각을 자신의 DNA에 끼워넣기도 한다. 이렇게 외부로부터 새로운 DNA를 얻어 유전적 성질이 변하게 되는 것을 형질전환이라고 한다. 박테리아의 형질전환은 박테리아 세포 내로 Plasmid DNA를 투입하는 것을 의미한다. 세포가 세포막을 통해서 외부의 DNA를 받아들이고, 박테리아의 형질 전환이 진행된다. 1. 박테리아의 형질전환 박테리아의 형질전환은 매우 중요한 생물학적 과정입니다. 박테리아는 자신의 유전자를 다른 박테...2025.01.12
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대장균 배양, 형질전환, Plasmid DNA 분리, DNA 전기영동 실험 보고서2025.01.121. 대장균(E.coli) 대장균(E.coli)은 그람음성 간균으로, 포자를 생성하지 않으며 1-2 microns x 30-30 micron 크기의 박테리아입니다. 섭씨 37도에서 잘 자라며, 정상적인 인간의 장에 존재하여 건강에 유익합니다. 하지만 배설물과 함께 나와 질병을 일으킬 수 있습니다. 2. 배지 배지는 미생물이나 세포를 성장시키는데 사용됩니다. 가장 일반적인 배지는 액체 영양배지나 LB배지이며, 이를 Agar와 섞어 고체배지로 사용할 수 있습니다. 이번 실험에서 사용한 LB배지는 tryptone, yeast extrac...2025.01.12
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Plasmid DNA 정제2025.01.131. 대장균(E. coli) 대장균(E.coli)은 Theodor Esherich의 이름을 따서 발견되어 명명된 박테리아이다. 특징으로는 그람음성의 간균이며, 포자 생성을 하지 않으며, 1-2 microns x 30-30 micron (1 micron = 0.001 mm)크기이고, 섭씨 37도에서 쉽게 자랄 수 있다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA란 세균 속에 주 DNA와 별도로 존재하면서 증식할 수 있는 고리 형태의 DNA로, 원핵생물과 효모 등에서 발견된다. 대장균 세포에서 분리된 Plasmid DNA는 sup...2025.01.13
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대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
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아동간호학 감염성위장관염(Gastroenteritis) 사례보고서_설사, 피부통합성장애의 위험+이론적근거포함2025.05.081. 살모넬라균과 대장균에 의한 위장관의 염증과 관련된 설사(Diarrhea) 대상자는 살모넬라균과 대장균에 의한 위장관의 염증으로 인해 설사 증상을 보였다. 설사의 원인, 증상, 진단 방법, 치료 관리에 대해 문헌 고찰을 하였다. 간호사는 대상자의 배변 양상을 사정하고, 수분과 전해질 균형을 유지하며, 심리적 지지를 제공하였다. 또한 약물 치료를 시행하여 설사 증상을 완화시켰다. 2. 대변의 잦은 피부 접촉과 관련된 피부 통합성 장애의 위험(Risk for impaired skin integrity) 대상자는 잦은 설사로 인해 항...2025.05.08
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개체군의 성장(Population Growth)2025.01.221. 개체군 성장 곡선 미생물의 시간에 따른 개체수 변화를 그래프로 나타낸 성장 곡선은 Lag phase, Exponential(Log) phase, Stationary phase, Death phase의 4단계로 구분할 수 있다. 이를 통해 미생물의 doubling time을 계산할 수 있다. 2. 대장균 증식 실험 밤새 키운 대장균을 LB 배지에 넣고 37°C에서 배양하면서 30분 간격으로 흡광도를 측정하여 성장 곡선을 그렸다. 실험 결과 대장균의 doubling time은 36.6분으로 나타났다. 3. 실험 결과 분석 실험 결...2025.01.22