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특정 항생제 저항성 유전자를 가진 미생물의 DNA를 PCR을 통해 분석2024.09.131. PCR(중합효소 연쇄 반응) 1.1. PCR의 정의와 특징 PCR(중합효소 연쇄 반응)은 관심 있는 DNA 서열을 수백만 벌이나 신속히 생성할 수 있는 기술이다. 생물학에서 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에서 사용되고 있는 검사법으로, 소량의 유전물질로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 많은 양으로 증폭할 수 있다. 이를 통해 인간의 DNA 증폭을 통해 여러 유전질환을 진단하거나, 세균이나 바이러스, 진균의 DNA에 적용하여 감염성 질환의 진단 등에 활용될 수 있다. PCR은 DNA, RNA 그리고 단백질 수준에...2024.09.13
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임상미생물 S.aureus, S.epidermidis, M. luteus2024.09.231. 미생물 분리 및 동정 1.1. 실험 목적 이 실험의 목적은 균을 장기간 보관할 수 있는 stock solution와 균을 배양학 위한 LB agar 배지를 직접 제작해보고, 이 과정에서 마이크로피펫을 포함한 다양한 실험 기구들의 사용방법을 익히는 것이다. 또한 PCR과 겔 전기영동의 원리를 이해하고 이를 활용해 배양한 균의 염기서열을 직접 산출해낸다. 산출된 염기서열을 sequencing과정을 통해 미생물의 종을 확인해보며 Hydrolysis test, 그람염색법 그리고 Oxidase, catalase test을 이용해 실험...2024.09.23
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전기영동 보고서2024.09.101. 서론 1.1. 실험 배경 및 목적 현재 유행하는 코로나 바이러스의 진단법에 DNA의 성질을 이용한다는 사실을 바탕으로 전기영동 실험을 진행하였다. 이 실험을 통해 얻은 결과가 어떤 방식으로 실생활에 적용되고 융합되어 활용되는지 알아보고자 하였다." 1.2. DNA와 전기영동의 기본 원리 DNA는 유전정보를 저장하고 있는 물질로, 당(sugar)과 인산(Phosphate)으로 이루어진 골격에 염기(base)가 결합되어 있는 형태이다. 이러한 Nucleotide가 중합된 Polynucleotide가 DNA이며, 이때 인산기(PO...2024.09.10
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Gene cloning2024.09.301. 유전자 클로닝 1.1. 유전자 클로닝의 개요 유전자 클로닝이란 생물체의 특정 유전자를 세포에서 추출한 후, 그 유전자를 벡터 DNA에 삽입하고 Competent Cell에서 증식시킴으로써 균일한 유전자 집단을 생성하는 기술이다. 다른 말로 유전자 클론화라고도 하며 특정 유전자의 대량 복제를 위해 쓰이는 중요한 DNA 재조합 기술이다. 이 기술은 기본적으로 수많은 종의 유전체와 종간 유전적 다양성을 연구하기 위해서 유전체의 DNA 조각, 혹은 서로 겹쳐져 있는 염기서열의 분석을 위해 활용된다. 또한 개별 유전자 수준에서 핵산의...2024.09.30
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pcr2024.10.021. 개요 1.1. PCR(Polymerase Chain Reaction)의 정의 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 특정 DNA 서열을 대량으로 증폭시키는 기술이다. PCR은 소량의 DNA 샘플로부터 원하는 DNA 부분을 수백만 배 증폭시킬 수 있어 다양한 생물학 및 의학 분야에서 널리 사용되고 있다. 이 기술은 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었으며, 짧은 시간 안에 다량의 DNA를 생산할 수 있어 유전자 분석, 유전체 연구, 병원균 진단 등에 활용되고 있다." 1.2. PCR의 필수 구성 요...2024.10.02
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생화학 포커스2024.10.101. PCR을 이용한 DNA 증폭 실험 1.1. PCR 기술의 원리 1.1.1. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받아 이루어진다. DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 진행되며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만든다. DNA 복제의 과정은 크게 시작, 신장, 종결의 3단계로 진행된다. 첫째, 시작 단계에서는 복제 기점에서 DNA 복제가 시작된다. 진핵생물은 여러 복제 기점이 존재하고 원핵생물은 단일 복...2024.10.10
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virus2024.09.281. 바이러스의 특성과 유형 1.1. 아데노-관련 바이러스(AAV) 아데노-관련 바이러스(AAV)는 온화한 면역 원성 때문에 생체 내 유전자 전달에 일반적으로 사용된다. 이들 바이러스는 장기 트랜스 진 발현을 지시할 수 있지만, 일반적으로 숙주 게놈에 영구적으로 통합되지는 않는다. AAV는 작은 포장 용량으로 인해 제한되는데, 최대 4.9kb의 패키징 용량만 가지고 있다. 또한 AAV는 헬퍼 바이러스와의 동시 감염이 필요하기 때문에 고품질 바이러스 스톡을 얻는 데 어려움이 있다. 하지만 AAV는 대부분의 세포 유형에서 면역 원성이...2024.09.28
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pcr 고찰2024.10.101. PCR(Polymerase Chain Reaction)의 이해 1.1. PCR의 정의 및 원리 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 또는 RNA 영역 중 원하는 특정 영역만을 대량으로 증폭시킬 수 있는 분자생물학적 기술이다." PCR의 원리는 극히 단순하다. PCR은 세 단계로 이루어지는데, 1) DNA 변성(Denaturation), 2) Primer 결합(Annealing), 3) DNA 합성(Polymerization)이 그것이다. 먼저 열처리를 통해 DNA 이중 가닥을 한 가닥 DNA로 ...2024.10.10
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제한효소를 이용한 DNA의 절단 및 전기영동2024.09.191. 제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 1.1. 제한효소의 개요 1.1.1. 제한효소의 정의 및 기능 제한효소는 이중 가닥 DNA 분자의 특정한 염기서열을 인식하여 그 부분이나 주변을 절단하는 효소이다. 제한효소는 세균이 박테리오파지라는 바이러스의 공격을 받으면 생산하는 효소로, 바이러스의 침입으로부터 자신을 방어하는 역할을 한다. 따라서 제한효소는 DNA의 특정 염기서열을 구분하고 이중 나선 DNA를 절단하는 능력을 가지고 있으며, 이를 통해 자신의 DNA는 보호하고 외부 유입 DNA는 제거하는 기능을 수행한다. 또한...2024.09.19
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현대생물학실험22024.10.311. 플라스미드 클로닝과 발현 1.1. TA 클로닝 및 형질전환 TA 클로닝은 PCR을 거친 product의 3'에 존재하는 A overhang과 T vector의 3'의 T overhang의 상보성으로 인해 클로닝을 진행하는 방법이다. 이 과정에서 DNA strand의 3'-OH 그리고 5'-P 사이의 phosphodiester bond를 형성하게 되어 ligation을 진행한다. ligation이 완료된 플라스미드 DNA를 DH5α에 주입하여 Transformation을 통해 DH5α의 유전형질을 새롭게 변환시킨다. Lac o...2024.10.31
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