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[화학과 수석의 A+ 레포트][조교피드백 포함] 박테리아의 형질전환 (생화학실험)2025.01.161. 형질전환 이번 실험에서는 플라스미드와 박테리아를 이용해 형질 전환한다. 클로닝이란 관심있는 DNA를 많이 만들어내기 위해 박테리아를 이용하는 것을 말한다. 박테리아에 관심있는 DNA 조각을 집어넣고 키우면 관심있는 DNA도 여러개 만들 수 있게 된다. 플라스미드는 박테리아에 DNA를 넣어주기 위한 운반체 역할을 한다. 형질전환 시키는 방법으로는 화학적처리법과 전기천공법이 있으며, 이번 실험에서는 화학적 처리방법으로 CaCl2를 넣어주는 방법을 사용했다. 2. 플라스미드 플라스미드란 세균의 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 ...2025.01.16
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생물공정실험 결과보고서_P1 Transduction2025.01.101. 박테리아의 형질전환 이번 실험은 kanamycin저항성이 있는 DNA를 가지고 있는 Phage를 통해 bacteria에 저항성 DNA를 Transduction해보고 이를 EBU plate라는 kanamycin이 있는 배지에 배양함으로 transduction이 제대로 실행되었는지 확인하는 실험이었다. 실험 과정 중 여러 시약이 사용 되었는데, 먼저 E. coli 샘플에 Phage를 넣고 P1 salt를 넣어 주었다. 이 시약은 Phage가 bacteria cell 표면에 잘 붙도록 하여 transduction의 효율을 높여주기 ...2025.01.10
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생화학 실험 보고서 - 박테리아 형질전환2025.01.271. 박테리아 형질전환 이번 실험에서는 화학적 방법을 사용하여 박테리아 세포에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행하였다. 실험에 사용된 competent cell은 CaCl2와 glycerol 처리를 통해 세포막의 투과성을 높여 DNA 도입을 용이하게 하였다. 또한 heat shock 과정을 거쳐 세포막의 유동성을 증가시켰다. 형질전환 효율은 colony 수를 통해 계산하였으며, 실험 결과와 고찰을 통해 competent cell 농도와 희석 과정이 형질전환 효율에 영향을 미치는 것을 확인하였다. 1. 박테리아 형질전환 ...2025.01.27
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미생물학 transformation 형질전환 실험 레포트2025.01.031. Transformation 실험을 통해 plasmid DNA를 competent cell에 도입하여 colony를 관찰함으로써 transformation 과정을 이해할 수 있었다. competent cell은 온도와 충격에 민감하므로 실험 시 주의해서 다뤄야 하며, 배지에 spreading 시 배지가 파이지 않도록 조심해서 다뤄야 한다. 또한 암피실린에 저항성을 가지는 유전자가 competent cell에는 없어서 암피실린이 포함된 배지에서 살아남을 수 없지만, 제대로 transformation이 일어난 세포는 암피실린이 포함...2025.01.03
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유전공학(생명과학2)2025.01.141. DNA 복제 DNA 복제 시 선도가닥과 지연가닥의 합성 및 특징, DNA 복제에 관여하는 효소(헬리케이스, 프라이메이스, 라이게이스, 자이레이즈, DNA 중합효소 1, DNA 중합효소 2)와 DNA 복제가 5' → 3'으로 이루어지는 이유에 대해 설명하고 있습니다. 2. CRISPR/Cas9 유전자 가위 CRISPR/Cas9 유전자 가위 기술의 장단점에 대해 설명하고 있습니다. 이 기술은 교정하려는 DNA와 상보적인 서열을 갖는 단일 가이드 RNA와 Cas9 단백질로 구성되어 있으며, 다중 절단이 가능하고 절단 위치를 예측할 ...2025.01.14
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식물분자생물학실험 Agrobacterium Transformation 결과보고서2025.01.181. Agrobacterium competent cell (GV3101) GV3101은 Agrobacterium tumefaciens Chemically Competent Cell의 일종으로, 애기장대, 담배, 옥수수, 감자 등의 식물을 형질 전환하는데 사용될 수 있다. 여기에는 screening을 위한 rifampicin resistant gene (rif)이 미리 포함되어 있으며, gentamicin resistance gene 과 vir gene을 포함한 Ti plasmid를 운반할 수 있다. 2. Freeze-Thaw met...2025.01.18
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박테리아 형질전환 실험 예비 보고서2025.01.031. 플라스미드 플라스미드는 세균의 염색체 이외에 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자입니다. 플라스미드는 형질전환 실험이나 유전자 공학에서 널리 사용되며, 다양한 종류의 플라스미드가 존재합니다. 2. 유전자 전달 유전자 전달에는 수직적 전달과 수평적 전달이 있습니다. 수직적 전달은 부모 세대로부터 유전형질을 물려받는 것이고, 수평적 전달은 이웃 세균에게 유전자를 전달하거나 받는 것입니다. 3. 박테리아 형질전환 박테리아 형질전환에는 세 가지 과정이 있습니다. 형질전환은 세포가 DNA를 직접 받아들이는 과정, 형질도입은 바이러스에...2025.01.03
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[A+ 리포트] Gel Extraction / Digestion & Purification (분자생물학실험)2025.04.251. Gel Extraction 겔 전기영동 과정으로부터 얻은 DNA 조각을 순수한 형태로 정제할 수 있다. 겔 추출로 얻은 순수한 DNA 조각을 제한효소를 이용하여 특정 부위를 잘라낼 수 있다. 2. Digestion 제한효소를 이용하여 Gel Extraction 산물로 얻은 DNA 조각을 특정 부위에서 절단할 수 있다. 제한효소 처리 시 주의사항으로는 제한효소 용액의 표면에서 취하고 강한 충격을 피하는 것이다. 3. Purification Digestion이 완료된 DNA 조각을 PB buffer, PE buffer 등을 이용하...2025.04.25
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[A]서강대학교 현대생물학실험2_1차 풀레포트_PCR과 Agarose gel electrophoresis and gel purification2025.01.181. Basic Laboratory Techniques 배지는 세포 배양을 위한 필요물질이 들어있는 것으로 LB broth와 LB agar plate를 이용한다. 수용성 세포를 형질전환 하고 선택배지로 제조된 LB agar plate를 이용해 생성된 colony로 형질전환 효율을 계산한다. 2. Competent Cell 수용성 세포(Competent cell)란, 외부의 DNA를 수용할 수 있는 상태의 박테리아로, 자연적으로 유도될 수 있지만 본 실험에서는 Ca2+ 용액 처리와 냉각과 열 충격을 주어 인위적으로 유도한다. 3. P...2025.01.18
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유전학-박테리아의 증식접합, 형질전환, 형질도입2025.01.171. 자가영양성(Prototrophic) Prototrophic 생물은 일반적으로 최소한의 영양소만으로도 생존하고 번식할 수 있는 박테리아이다. 기본적인 탄소원, 질소원, 염류 등의 기본 영양소만으로 모든 필수적인 유기 분자를 합성할 수 있다. 이러한 생물은 대사 경로가 완전하게 작동하여 추가적인 영양소나 보조 인자를 필요로 하지 않는다. 자연 환경에서 잘 생존하며, 실험실 조건에서도 기본적인 배지에서 잘 자란다. 2. 영양요구성 돌연변이(Auxotrophic) Auxotrophic 생물은 특정 필수 영양소를 합성하지 못하는 돌연변...2025.01.17
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