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재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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식품생화학 RNA 및 단백질의 합성2025.05.071. RNA 합성 RNA 합성은 DNA에 저장된 유전정보를 이용하여 이루어지며, RNA 중합효소, DNA 주형, 전구체(NTP), 금속이온 보조인자가 필요합니다. RNA에는 리보솜 RNA(rRNA), 전령 RNA(mRNA), 전달 RNA(tRNA)가 있으며, RNA 합성은 개시, 연장, 종결의 과정을 거칩니다. 2. 전사의 조절 원핵생물의 유전자 발현은 오페론이라는 유전자 집단으로 조절되며, lac 오페론은 락토스 대사와 관련된 유전자들로 구성되어 있습니다. 락토스 유무에 따라 lac 오페론의 활성이 조절됩니다. 3. 진핵생물의 유...2025.05.07
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유전학2_경북대2025.05.031. DNA microarray DNA microarray는 고체 표면에 부착된 미세한 DNA 조각의 집합체입니다. DNA 칩과의 차이점은 DNA 칩은 합성된 올리고뉴클레오타이드로 배열되어 있고, DNA 마이크로어레이는 변성된 DNA가 배열되어 있습니다. DNA 마이크로어레이의 장점은 매우 희귀한 전사체도 검출할 수 있고 전사체 수준의 작은 차이도 감지할 수 있습니다. 단점은 프로브의 하이브리드화 효율이 다를 수 있고 사전 서열 지식이 필요하다는 것입니다. 2. RNA-seq RNA-seq은 각 전사체를 서열에 따라 식별할 수 있고...2025.05.03
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 예비보고서2025.01.041. DNA ligation DNA ligation은 DNA 단편을 연결하는 과정으로, 제한효소로 절단된 DNA 단편을 연결하여 재조합 DNA를 만드는 데 사용됩니다. 이 과정에서 DNA ligase 효소가 사용되며, 이를 통해 DNA 단편의 인접한 3' 수산기와 5' 인산기 사이의 공유 결합이 형성됩니다. DNA ligation은 유전자 클로닝, 유전자 조작, 유전체 연구 등 다양한 분자생물학 실험에서 중요한 기술입니다. 2. DNA transformation DNA transformation은 외부 DNA를 세포 내로 도입하는 ...2025.01.04
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진핵생물의 유전자 발현 및 조절2025.01.251. 유전자 발현 과정 진핵생물의 유전자 발현 과정은 전사, 번역, 단백질 수정 단계로 구성됩니다. 전사는 DNA에서 RNA로의 변환 과정이며, 번역은 mRNA가 리보솜에 의해 단백질로 변환되는 과정입니다. 단백질은 다양한 화학적 수정을 거쳐 최종적인 기능을 발휘하게 됩니다. 각 단계에서 다양한 조절 메커니즘이 작용하여 유전자 발현의 정확성과 효율성을 높입니다. 2. 전사 단계의 조절 유전자 발현 조절은 주로 전사 단계에서 이루어집니다. 전사 인자는 특정 DNA 서열에 결합하여 RNA 중합효소의 활성을 조절하며, 염색질 구조의 변화...2025.01.25
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[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR2025.05.031. RNA extraction RNA를 분리하는 과정에서 가장먼저 첨가해주는 물질이 Trizol이다. Trizol은 phenol과 guanidinium thiocyanate라는 두가지 중요한 성분으로 이루어져있고 이들이 cell을 lysis하고 RNA를 안정화시키는 역할을 한다. 추가적으로 chloroform을 첨가하여 RNA와 다른 물질들을 분리한다. 2. cDNA synthesis cDNA 합성 과정에서는 reverse transcriptase 효소가 핵심적인 역할을 한다. 이 효소는 RNA를 DNA로 역전사하는 기능을 가지고...2025.05.03
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멘델의 법칙과 진핵생물의 유전자 발현 및 조절2025.01.181. 멘델의 법칙 멘델의 법칙은 유전의 기본 원리를 설명하는 중요한 이론이다. 분리의 법칙은 개체가 두 개의 대립유전자를 가지고 있으며, 이들이 감수분열 동안 분리되어 각 배우자에게 하나씩 전달된다는 것을 의미한다. 독립의 법칙은 서로 다른 형질을 결정하는 유전자가 독립적으로 유전된다는 것을 설명한다. 멘델의 연구는 유전학의 기초를 마련하였으며, 현대 생물학과 의학 분야에서 중요한 역할을 하고 있다. 2. 진핵생물의 유전자 발현 진핵생물의 유전자 발현은 유전자가 전사와 번역을 통해 단백질로 변환되는 과정이다. 전사 단계에서는 DNA...2025.01.18
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[예방약학실험8] Luciferase assay2025.05.101. Luciferase assay Luciferase assay는 NF-κB promoter와 luciferase reporter gene을 포함하는 plasmid를 HEK293 세포에 transfection하여 luciferase 발현을 통해 염증반응 조절에 중요한 유전자 발현을 확인하는 실험입니다. NF-κB는 염증반응 관련 유전자의 신호전달에 관여하는 전사인자로서 염증반응의 지표로 활용됩니다. 실험 결과, PMA는 염증을 유발하고 추출물 A는 항염증 효과가 있음을 확인할 수 있었습니다. GFP로 normalization을 하...2025.05.10
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레닌저 생화학 정리노트 Ch09. DNA 기반 정보기술2025.05.101. 유전체(genome) 생물의 완전한 하나의 반수체 유전자를 의미하며, 유전체학(genomics)은 DNA에 대한 학문으로 세포와 개체 수준에서 생화학을 연구하는 학문인 system biology에 기여한다. 2. 클로닝 유전자와 그 산물에 대한 연구를 위해 동일한 복제물을 만드는 것으로, 특정 개체의 복제물(organism cloning), 특정한 유전자나 DNA 단편의 복사물(DNA cloning)을 만들 수 있다. 재조합 DNA(recombinant DNA)는 2개 이상의 소스에서 공유 결합된 조각으로 구성된 복합 DNA ...2025.05.10
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