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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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Agarose gel Electrophoresis 결과레포트2025.05.161. Agarose gel Electrophoresis 이번 실험의 목적은 실험2에서 진행된 PCR product를 전기영동해 분리하고 분석하는 것이었습니다. 1000bp가 가장 이상적인 값이었지만, 8개 샘플 중 6개만 1000bp와 비슷한 곳에 나타났고 나머지 2개는 전혀 나타나지 않았습니다. 이는 2개 샘플의 DNA 농도가 상대적으로 낮아서 그런 것으로 보입니다. 또한 약간의 끌림 현상이 관찰되었는데, 이는 DNA가 깨졌거나 농도가 너무 높아서 생긴 것으로 보입니다. 이를 방지하기 위해서는 annealing 온도 조절, DNA...2025.05.16
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전기영동2025.01.161. 전기영동의 원리 전기영동은 전하를 띤 분자가 전기장 안에서 (+)극이나 (-)극으로 이동하는 현상을 이용한 기술이다. 전하를 띤 분자는 자신의 전하와 반대 극으로 이동하게 되므로, 혼합된 분자를 전류가 흐르는 매질에 두면, 각 분자는 자신의 전하에 따라 양극 또는 음극으로 이동하게 된다. 이를 이용하여 혼합된 분자를 분리할 수 있다. 2. 전기영동액과 전기분해작용 전기영동을 수행하려면 전류가 흐를 수 있는 전도성 물질로 양극이 연결되어야 한다. 전도성 물질은 주로 이온결합화합물인 염이 들어있는 수용액이 사용된다. 전기영동 시 ...2025.01.16
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[일반생물학실험]혈액에서 DNA 추출2025.01.161. DNA 추출 이 실험의 목적은 혈액에서 DNA를 추출하고, 중합효소 연쇄반응(PCR)을 통해 DNA 증폭 산물을 만들어 전기영동으로 확인하는 것입니다. PCR은 DNA 사슬 중 특정 부분을 대량으로 증폭시키는 방법으로, 처음에는 대장균에서 분리한 DNA 중합효소 I을 사용했지만 사이클이 지날 때마다 효소를 첨가해야 하는 불편함이 있었습니다. 그러나 사이키가 높은 온도에서도 활성이 유지되는 Taq DNA 중합효소가 발견되면서 PCR 실험 방법이 보편화되었습니다. 2. 중합효소 연쇄반응(PCR) PCR은 증폭시키려는 주형 DNA,...2025.01.16
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 결과레포트2025.01.191. PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 실험 결과 분석을 통해 Wild type과 Mutant type의 DNA 밴드 진하기 차이를 확인하였고, 이를 바탕으로 ALDH2 유전자의 돌연변이 여부를 확인할 수 있었다. 또한 실험 과정에서 발생할 수 있는 오차 요인을 분석하고, PCR 기술의 다양한 활용 분야에 대해 설명하였다. 1. PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 분자를 증폭하는 기술로, 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 널리 활용되고 있습니다. ...2025.01.19
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PCR을 통한 유전자 증폭 - 예비레포트2025.01.241. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 템플릿, 프라이머, DNA 중합효소, 핵산 구성 물질 등을 이용하여 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 2. DNA 증폭 과정 PCR 과정은 크게 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. DNA 변성 단계에서는 이중 가닥 DNA가 단일 가닥으로 분리되고, 프라이머 결합 단계에서는 프라이머가 상보적인 DNA 서열에...2025.01.24
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[생명공학 레포트] gDNA isolation 및 T7E1 assay를 통한 genome editing 확인2025.05.031. gDNA isolation gDNA는 plasmids와 같은 extra-chromosomal DNAs와는 다르게 chromosomal DNA를 의미한다. gDNA를 분리하는 단계에서는 cell과 CLS(Cell Lysis Solution), proteinase K를 섞어 DNA 추출을 위해 cell을 파괴하는 역할을 한다. CLS에는 SDS, Tris-HCl, EDTA 등이 들어가 있으며, SDS는 cell membrane의 lipid를 제거하고, Tris-HCl은 pH 변화를 방지하며, EDTA는 세포 내의 DNases의 역...2025.05.03
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[유전학] DNA sequencing, vector의 제작, NGS2025.05.031. DNA sequencing DNA는 단백질을 암호화 하고있는 물질로 A,T,G,C라는 기본 단위로 이루어진다. 어떤 서열을 갖고 있는 지에 따라 결과적으로 생산되는 단백질이 달라지게 되는데 이 서열을 확인하는 것은 분자생물학에 있어서 큰 의미가 있다. DNA sequencing은 그 DNA 서열을 확인하는 방법이다. 과거에는 그 방법으로 sanger method를 사용했지만 현재는 더욱 빠르고 신속하게 원하는 DNA서열을 확인할 수 있는 방법인 NGS를 통해 염기서열을 확인한다. 2. Vector 제작 우리는 DNA 재조합 기...2025.05.03
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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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