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Annexin V/PI/DAPI(Hoechst 33258) staining을 통한 세포 생존 여부 및 세포 죽음 종류 구분2025.01.181. 세포 괴사(Necrosis) 세포 괴사는 외부의 강한 물리적인 힘, 화학 물질 등에 의한 심한 자극으로 인해 세포가 죽어가는 과정이며, 현미경을 통해 관찰하면 세포가 부풀어올라, 세포막과 세포 소기관들이 부풀어 올라 터지게 되고, 핵은 크기가 커지며 핵막의 구분이 불명확해지고 염색질이 부분적으로 응축되는 현상이 발생한다. 2. 세포자연사(Apoptosis) 세포자연사는 일련의 세포 변화에 의해 일반적으로 진행되는 능동적인 과정으로, 생리학적으로 세포 증식과 세포 발달이 일어나는 중에 조직에서 일정한 세포를 유지하기 위한 반응이...2025.01.18
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23
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진핵생물의 유전자 발현 및 조절2025.01.251. 유전자 발현 과정 진핵생물의 유전자 발현 과정은 전사, 번역, 단백질 수정 단계로 구성됩니다. 전사는 DNA에서 RNA로의 변환 과정이며, 번역은 mRNA가 리보솜에 의해 단백질로 변환되는 과정입니다. 단백질은 다양한 화학적 수정을 거쳐 최종적인 기능을 발휘하게 됩니다. 각 단계에서 다양한 조절 메커니즘이 작용하여 유전자 발현의 정확성과 효율성을 높입니다. 2. 전사 단계의 조절 유전자 발현 조절은 주로 전사 단계에서 이루어집니다. 전사 인자는 특정 DNA 서열에 결합하여 RNA 중합효소의 활성을 조절하며, 염색질 구조의 변화...2025.01.25
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진핵세포와 원핵세포의 차이점2025.01.281. 진핵세포 진핵세포는 모든 생물의 가장 기본적인 단위인 세포는 독립적으로 기능을 하고 생식과 같은 생명체의 필수 기능을 모두 수행할 수 있는 가장 작은 생명의 단위이다. 진핵세포는 막으로 둘러싸인 핵을 가지고 있으며 원핵세포에 비하여 일반적으로 형태가 더 복잡하고 크기도 더 크다. 진핵세포에서는 세포 내 소화, 식세포작용, 원형질 유동, 음세포작용 등이 일어난다. 2. 원핵세포 원핵세포는 핵막이 없어서 세포의 유전물질인 DNA가 세포질에 있는 세포를 말한다. 원핵세포는 원핵생물을 이루며, 이들 기관을 갖춘 진핵세포에 상대되는 개...2025.01.28
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식물에서의 DNA 추출2025.01.291. DNA 구조 DNA는 디옥시리보핵산, deoxyribonucleic acid의 약자이다. 모든 세포, 생물과 DNA 바이러스에서 유전물질을 가진 핵산이다. 한 가닥의 DNA는 디옥시라이보뉴클레오타이드로 된 직선형의 중합체이다. β-D-deoxyribofuranose가 5′,3′ 인산결합에 의해 DNA분자의 뼈대를 형성한다. 여기에 푸린 염기인 아데닌과 구아닌, 피리미딘염기인 사이토신과 타이민이 각 디옥시라이보스 잔기에 측쇄로서 하나씩 연결된다. 아데닌과 타이민은 두 개의 수소결합, 사이토신과 구아닌은 세 개의 수소결합을 형성한...2025.01.29
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세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 02. apoptosis, Autophagy와 인간의 질병2025.01.181. Apoptosis Apoptosis는 괴사와 다르게 일련의 세포 변화에 의해 진행되는 능동적인 과정으로, 과정이 시작되면 DNA의 분절화, 염색질의 응축, 핵의 분절화 그리고 세포의 분절화가 일어나 세포사멸체를 형성하고, 형성된 세포사멸체는 식세포의 식균작용을 통해 소멸된다. 인체에서는 24시간 당 약 3000억~4000억 개의 오래된 혈액 세포나 간세포, 표피세포가 세포자연사에 의해 제거되고, 새로운 세포가 생성되고 있다. 세포에서 세포자연사의 메커니즘에 이상이 생기면, 암, 자가면역질환, 바이러스 감염, 신경퇴행성 질병, ...2025.01.18
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MTT assay (WST-8 assay)2025.01.181. Tetrazolium Tetrazolium은 dehydrogenase 등의 효소에 의해 쉽게 환원되어 유색의 formazan을 형성한다. 이러한 원리로 가장 널리 사용되는 MTT tetrazolium은 노란색 수용성 기질로, 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan 이라고 불리는 crystal을 형성한다. 따라서 세포사멸에 의해 미토콘드리아가 제 기능을 하지 못하게 되면 MTT를 처리해도 formazan을 형성하지 못하게 된다. 2. MTT assay MTT assa...2025.01.18
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파라핀 블록 및 절편 만들기2025.01.181. 파라핀 블록 제작 파라핀 블록은 조직을 탈수시킨 후 조직에 파라핀을 채운 것으로, 보관을 한 후 파라핀을 제거하면 원래의 조직과 비슷한 상태로 되돌릴 수 있는 장점이 있는 방법이다. 파라핀 블록의 생성은 크게 '고정 → 탈수 → 투명화 → 침투 → 포매' 과정으로 구성된다. 고정은 살아있는 세포와 화학성분을 자가 융해와 부패로부터 방지하기 위해 화학적, 물리적인 방법에 의하여 생체물질을 응고시키고, 불용성으로 변화시키는 과정이다. 탈수는 침투제로 사용되는 소수성의 파라핀이 잘 침투되도록 조직내에 수분을 제거하는 과정이다. 투명...2025.01.18
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Hematoxylin and Eosin(H&E) 염색법2025.01.181. Hematoxylin and Eosin(H&E) 염색법 파라핀 블록을 통해 제작한 조직 절편을 Hematoxylin과 Eosin(H&E) 염색을 진행하고, 이를 통해 조직 내의 세포핵과 세포질을 관찰할 수 있다. H&E 염색 과정은 '탈파라핀 - 수화 - 수세 - 헤마톡실린 염색 - 청색화 - 에오신 염색 - 탈수 - 투명화 - 봉입'의 순서로 진행된다. 이를 통해 세포핵은 푸른색, 세포질과 결합조직은 분홍색으로 관찰할 수 있다. 1. Hematoxylin and Eosin(H&E) 염색법 Hematoxylin and Eosi...2025.01.18
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세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 09. TUNEL staining2025.01.181. 면역 염색법 면역 염색법(Immunostaining)은 세포 또는 조직에서 특정 분자, 단백질 등을 항체를 이용해 가시화하는 방법으로, 특정 단백질에 선택적으로 결합하는 항체를 세포나 조직에 반응시킨 후, 항체의 결합 반응 후 그 항체의 위치를 관찰하는 생화학적인 방법이다. 면역 조직 화학 염색법(IHC), 면역 세포 화학 염색법(ICC), 면역 형광법(IF) 등이 존재한다. 2. TUNEL 염색법 TUNEL (TdT-mediated dUTP-bio-tin nick end-labeling method) 염색법은 세포자연사 과정...2025.01.18
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