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[A+ 리포트] 세포생물학실험 - 세포배양배지의 종류와 특성, DMSO의 세포 독성, 70 EtOH 사용 이유2025.04.251. 세포배양배지의 종류와 특성 세포의 배양을 위해선 세포가 생장할 수 있는 특정한 환경의 조성이 필요하다. Growth media라고도 불리는 세포배양배지는 액체 혹은 고체 상태로써 세포가 생장하는데 필요한 여러 종류의 아미노산, 무기염류, 비타민, 생장인자, 완충제 등이 포함되며 특히 미생물 배지와는 가장 큰 차이점이라고 할 수 있는 5~20%의 혈청(serum)이 추가되는 등의 각종 성분들이 포함되어 있다. 일반적으로 사용되는 세포배양배지의 종류로는 BME, MEM, DMEM, RPMI 1640 등이 있으며 각각의 특성이 다르...2025.04.25
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[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서2025.04.261. EGFP 유전자 발현 조절 이번 실험에서는 CRISPR-CAS9을 이용해 EGFP 유전자 발현을 조절하는 방법을 사용했다. EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야 하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해야 한다. 2. CHO-S 세포 배양 이번 실험에서는 CHO-S 세포를 사용했다. CHO-S 세포는 부유하면서 자랄 수 있어 배양 속도와 공간 활용도가 adherent 세포에 비해 좋아 생산성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간과 진화적으로 가까워 human-like PTM, ...2025.04.26
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생명과학보고서_Immunostaining (아주대전공실험2)2025.05.161. Cell Culture Cell culture란 다세포 생물체로부터 분리한 세포를 protease 등의 처리로 단세포로 분리하여 배양하는 과정이다. 우선 생체조직을 무균적으로 선발하여 trypsin 등의 소화효소로 처리한 후 단세포로 분리하여 초대배양을 한다. 또 계대 중인 세포계나 세포주를 같은 효소처리로 분산시켜 얻어낸 단세포를 증식배지에 이식, 접종하여 다음의 계대배양을 한다. Culture condition은 세포 type에 따라 매우 다양하지만 기본 환경은 필수 영양소(탄수화물, 아미노산, 비타민), serum(호르몬...2025.05.16
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[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험을 위해 clean bench 내부를 소독하고 실험 재료를 준비합니다. 배양액을 37°C로 유지하고, 세포 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신을 처리하여 세포를 분리합니다. 분리된 세포를 원심분리하여 세포 펠릿을 수집하고, 새로운 배양액에 재현탁하여 새로운 배양접시에 분주합니다. 2. 현미경 관찰 세포 배양 접시를 현미경 위에 올려놓고 세포의 상태를 관찰합니다. 세포 밀도가 70-80% 정도인지 확인합니다. 3. 트립신 처리 트립신-EDTA 용액을 세포 배양 접시...2025.04.25
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LDH assay2025.01.231. 단백질 정제 실험 주제에서 다루고 있는 LDH assay는 단백질 정제 과정에 대한 내용을 포함하고 있습니다. 단백질 정제는 다양한 종류의 단백질이 섞여 있는 샘플에서 원하는 단백질을 분리하는 작업입니다. 크로마토그래피, SDS-PAGE, Western blot 등의 방법을 통해 단백질의 순도를 점차 높여나가는 과정이 설명되어 있습니다. 2. 효소 활성 측정 이 실험에서는 LDH(Lactate Dehydrogenase)라는 효소의 활성을 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 효소 활성은 반응 속도, 특정 활성, 수율 등으로...2025.01.23
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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RNA 추출 및 정량 실험 결과 보고서2025.01.041. RNA 추출 실험의 목적은 Trizol을 이용하여 RNA를 추출하고 정제하는 방법을 익히고, 추출된 RNA의 품질과 양을 확인하는 것입니다. 실험 방법으로는 6-well plate에 세포를 준비하고, PBS로 세척한 후 Trizol을 처리하여 RNA를 추출하는 과정이 포함됩니다. 이를 통해 RNA 추출 및 정량 기술을 습득할 수 있습니다. 1. RNA 추출 RNA 추출은 생물학 및 의학 연구에서 매우 중요한 과정입니다. RNA는 유전 정보를 전달하고 단백질 합성에 관여하는 핵산으로, 세포의 다양한 기능을 이해하는 데 필수적입니...2025.01.04
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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분자생물학 실험 (A+) Bacterial Cell culture 예비보고서2025.01.041. 분자생물학 분자생물학은 생물체의 기본 단위인 세포 내에서 일어나는 생명 현상을 분자 수준에서 연구하는 학문입니다. 이 실험 보고서에서는 박테리아 세포 배양 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 박테리아 세포 배양은 실험실에서 박테리아를 증식시키는 기술로, 분자생물학 연구에 필수적인 기법입니다. 2. 세포 배양 세포 배양은 실험실에서 세포를 인위적으로 증식시키는 기술입니다. 이 보고서에서는 박테리아 세포 배양에 대해 다루고 있습니다. 박테리아 세포 배양은 분자생물학 실험에서 중요한 기술로, 다양한 실험을 위해 필요한 세포를 확보...2025.01.04
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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08