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PCR, DNA 전기영동 실험 레포트2025.05.131. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 실험실에서 DNA 분자의 특정 부분을 표적으로 하여 빠르게 증폭하는 기술이다. 몇 시간 안에 1개의 DNA 분자로 1000억개에 이르는 DNA 분자를 만들어 낼 수 있어서 DNA 감식에 사용할 수 있는 충분한 양의 DNA를 얻을 수 있다. PCR은 세 단계의 과정을 반복하는데 그 결과 동일한 DNA의 분자 수가 기하급수적으로 증가한다. 첫 단계인 변성단계에서는 반응 혼합물의 DNA 가닥을 분리하기 위해서 95도인 높은 온도에 방치한다. 두번째 단계인 결합단계는 목적 DNA의 양쪽 말단에 상보...2025.05.13
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DNA 전기영동 실험 예비 보고서2025.04.281. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 전하를 띠고 있는 DNA 분자가 전기장 내에서 이동하는 성질을 이용하여 DNA 분자를 분리하고 분석하는 실험 기법입니다. 이 실험에서는 아가로스 젤을 매질로 사용하며, DNA 분자의 크기와 구조에 따라 이동 속도가 달라져 분리가 가능합니다. 또한 EtBr(Ethidium Bromide)를 사용하여 DNA 밴드를 형광 발광으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동의 원리 전기영동은 전하를 띤 물질이 전기장 내에서 이동하는 성질을 이용하여 물질을 분리하는 기법입니다. DNA는 인산기 때문에 음전하를...2025.04.28
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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제한효소에 의한 DNA 절단 예비 레포트2025.01.031. 제한효소 제한효소는 세포 내로 침입하는 바이러스나 외래 DNA를 절단하고 제거하는 박테리아의 자기방어 기구입니다. 제한효소는 자신의 DNA를 메틸화시켜 외부 DNA와 구분하여 보호하며, 핵산내부가수분해효소(endonuclease)의 역할을 합니다. 제한효소의 종류는 다양하지만 크게 I, II, III형으로 분류할 수 있으며, 각각 알맞은 반응 조건을 가지고 있습니다. 제한효소는 DNA 재조합 기술에서 널리 사용되는데, 특히 II형 제한효소가 가장 일반적으로 사용됩니다. 2. 제한효소의 절단 제한효소가 DNA를 절단하면 잘린 부...2025.01.03
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쥐의 근육세포에서 DNA 추출 및 PCR 결과 확인2025.01.031. DNA 구조와 기능 DNA는 유전물질로, 자신과 똑같은 새 DNA를 복제하고 생물 특유의 유전형질을 발현시킨다. DNA는 두 가닥의 뉴클레오티드로 이루어진 이중나선 구조로, 염기 사이의 수소결합에 의해 안정적인 구조를 이루고 있다. DNA 복제 과정에서 부모 가닥은 그대로 보존되고 새로운 가닥이 합성되는 반보존적 복제가 일어난다. 유전자 발현은 전사와 번역 과정을 거쳐 단백질로 전환된다. 2. PCR 기술 PCR은 특정 염기서열을 증폭하는 기술로, DNA의 변성, 프라이머 결합, DNA 신장의 3단계로 이루어진다. PCR에 필...2025.01.03
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PCR 기술을 이용한 PCR product 전기영동 확인2025.01.031. PCR 기술 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 복제를 위한 기술로, DNA 주형, 프라이머, DNA 뉴클레오타이드, Taq DNA 중합효소, DNA 중합효소 완충용액 등을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 이 실험에서는 PCR을 통해 유전자를 확보하고, 전기영동을 통해 증폭된 DNA를 확인하며, PCR 뉴클레오타이드를 정제하는 과정을 수행한다. 2. 전기영동 전기영동은 아가로스 겔과 같은 고분자 물질로 된 겔을 이용하여 핵산이나 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산은 음전하를 띠므로 양극 쪽으로 이동하며...2025.01.03
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분자생물학 실험 (A+) PCR and restriction enzyme digestion 예비보고서2025.01.041. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, 소량의 DNA 샘플에서 수백만 개의 복사본을 만들어낼 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 제한효소 절단은 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 자르는 기술로, PCR 산물의 확인이나 유전자 지문 분석 등에 사용됩니다. 2. 제한효소 절단 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 자르는 효소입니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기와 패턴을 확인할 수 있으며, 유전자 지문 분석, 유전자 ...2025.01.04
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