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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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서울대 생물학실험 A+ 실험 보고서 32025.05.101. DNA 클로닝과 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA 조각을 복제하여 여러 개의 DNA 복사본을 얻는 과정을 의미합니다. 이를 위해 DNA 조각은 벡터라고 불리는 DNA 분자와 재조합되는 과정을 거치며, DNA 조각은 클로닝하고자 하는 유전자나 특정한 염기 서열을 포함하고 있습니다. 일련의 과정 후 복제된 클론은 세포에 삽입되며, 복제 및 유전자 발현에 이용됩니다. 이렇듯 외부 DNA가 도입되며 세포의 유전 형질에 변화가 생기는 경우를 형질 전환이라 일컫는데, 일반적으로 형질 전환에는 plasmid 벡터가 사용됩니다. 2. ...2025.05.10
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SDS-PAGE and Protein Analysis2025.01.211. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 계면활성제로서 친수성과 소수성 부분을 모두 지니고 있으며, 단백질을 변성할 수 있는 물질이다. SDS-PAGE는 이러한 SDS의 특성을 토대로 하여 단백질을 분자량에 따라 band 형태로 분리하는 실험이다. 단백질은 그 구조와 전하, 분자량이 모두 다르기 때문에 SDS를 통해 단백질의 구조와 전하를 모두 일정하게 한 뒤 분자량에 의해서만 분석을 진행한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 Acrylamide와 N,N'-Methylene...2025.01.21
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PCR 기술을 이용한 PCR product 전기영동 확인2025.01.031. PCR 기술 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 복제를 위한 기술로, DNA 주형, 프라이머, DNA 뉴클레오타이드, Taq DNA 중합효소, DNA 중합효소 완충용액 등을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 이 실험에서는 PCR을 통해 유전자를 확보하고, 전기영동을 통해 증폭된 DNA를 확인하며, PCR 뉴클레오타이드를 정제하는 과정을 수행한다. 2. 전기영동 전기영동은 아가로스 겔과 같은 고분자 물질로 된 겔을 이용하여 핵산이나 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산은 음전하를 띠므로 양극 쪽으로 이동하며...2025.01.03
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[아주대] 생물학 실험1 - Plasmid DNA 추출2025.05.011. 원핵 세포와 진핵 세포의 차이 원핵 세포는 핵막이 없어 DNA가 세포질에 있으며, 내막계가 발달하지 않아 세포내 소기관이 없다. 진핵 세포는 막으로 둘러싸인 핵을 가지고 있으며 세포내 소기관이 발달되어 있다. 원핵 세포는 주로 원형의 DNA로 이루어진 염색체를 가지고 있으며, 플라스미드라는 작은 원형 DNA를 가지기도 한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 1 kilo base에서 1 Mega base 크기의 다양한 크기의 환형 DNA로, 자신의 복제기점을 가지고 있어 염색체와 독립적으로 복제된다. 플라스미드는 숙주...2025.05.01
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Plasmid DNA 분리 결과 레포트2025.04.261. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 수행했습니다. 박테리아 배양액에서 박테리아를 추출하고, mini prep 방법을 통해 세포벽과 세포막을 부수어 Plasmid DNA만 분리했습니다. 그 후 1% Agarose Gel에 Sample Loading하고 전기영동을 통해 DNA 밴드를 확인했습니다. 하지만 실험 결과 DNA가 추출되지 않아 DNA Ladder와 비교할 수 없었습니다. 이는 실험 과정에서 약간의 차이로 인해 오차가 발생했거나 실험 진행이 미숙했기 때문으로 분석됩...2025.04.26
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[A+레포트] DNA 제한효소 예비레포트2025.01.221. 제한효소 제한효소는 생물이 자기 세포에 다른 종류의 DNA가 들어오면 이를 파괴하는 기능을 가진 효소이다. 유전공학에서는 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소로 알려져 있다. 제한효소에는 크게 3종류가 있으며, 모두 특정한 DNA 염기 배열을 인식한다. 유전공학에서 잘 사용되는 것은 II형 제한효소이며, 절단부위가 인식부위의 가운데 위치하는 것이 특징이다. 2. 아가로스 겔 전기영동 전기영동은 DNA와 같은 전하를 띠는 물질들을 전기적으로 일정한 방향으로 이동시켜 분리하는 기술이다. DNA는 인산기에서 H+를 방출...2025.01.22
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단백질의 다양한 종류와 기능2025.01.181. 단백질의 다양한 종류와 기능 이번 활동을 통해 단백질의 다양한 종류와 기능, 1~4차 단백질 구조에 대한 기본적인 내용을 알게 되었습니다. 또한 전하를 띤 물질을 분리하는 전기영동 실험 방법과 원리를 배웠습니다. 실험을 직접 수행하면서 간과 근육 시료의 단백질 분리 결과를 관찰하고, 기관별 세포 유전자 발현의 차이를 이해할 수 있었습니다. 추가로 전기영동에 영향을 미치는 요인들에 대해서도 배웠습니다. 1. 단백질의 다양한 종류와 기능 단백질은 생명체에 필수적인 거대 분자로, 다양한 종류와 기능을 가지고 있습니다. 단백질은 아미...2025.01.18
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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Gel extraction 예비레포트 결과레포트2025.05.161. Gel Extraction 이번 실험의 목적은 전기영동한 Gel로부터 원하는 DNA를 추출하기 위해 Gel Purification Kit을 이용하여 DNA를 정제하는 것이었다. 실험 결과 DNA 농도가 예상보다 낮게 나왔는데, 이는 버퍼로 계속 씻어주어 DNA 양이 줄어들었거나, 원심분리가 제대로 되지 않아 원하는 DNA가 하층액에 섞여 버려졌을 가능성, 또는 DNA가 단백질이나 페놀로 오염되었을 가능성 때문인 것으로 보인다. 이를 해결하기 위해서는 원심분리 시간을 늘리거나, 이소프로판올을 추가로 넣어 DNA를 더 잘 침전시키...2025.05.16