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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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생화학 실험 보고서 - 전기영동을 통한 단백질 관찰 (SDS-PAGE)2025.01.271. 단백질 분리 및 분석 이번 실험에서는 SDS-PAGE를 사용하여 단백질을 분리하고 관찰하였습니다. SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리되는 원리를 이용하는 전기영동 방법입니다. 실험 결과 MCF-7 세포에서 추출한 단백질 샘플에서 약 45kDa와 60kDa 크기의 단백질이 관찰되었습니다. 이를 통해 MCF-7 세포에 다양한 크기의 단백질이 존재함을 확인할 수 있었습니다. 2. 전기영동 기술 전기영동은 단백질, 핵산 등 생체 고분자를 분리하고 분석하는 데 널리 사용되는 기술입니다. 이번 실험에서는 SDS-PAGE 기법을 ...2025.01.27
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전기영동2025.01.161. 전기영동의 원리 전기영동은 전하를 띤 분자가 전기장 안에서 (+)극이나 (-)극으로 이동하는 현상을 이용한 기술이다. 전하를 띤 분자는 자신의 전하와 반대 극으로 이동하게 되므로, 혼합된 분자를 전류가 흐르는 매질에 두면, 각 분자는 자신의 전하에 따라 양극 또는 음극으로 이동하게 된다. 이를 이용하여 혼합된 분자를 분리할 수 있다. 2. 전기영동액과 전기분해작용 전기영동을 수행하려면 전류가 흐를 수 있는 전도성 물질로 양극이 연결되어야 한다. 전도성 물질은 주로 이온결합화합물인 염이 들어있는 수용액이 사용된다. 전기영동 시 ...2025.01.16
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전기 영동 실험보고서 및 심화탐구활동2025.01.201. 전기영동 실험 전기영동 실험을 통해 이온 샘플 3종이 이동하는 것을 관찰하였다. 크기가 작은 이온일수록 겔을 통과하는 속도가 빠른데, 이는 분자의 크기, 전하, 용액의 점성도 등과 관련이 있다. 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생체 고분자를 분리, 분석하는 데 중요한 방법이다. 2. 전기영동 이론 전기영동에서 분자의 이동속도 v는 전기 장력과 전체전하에 비례하지만, 분자의 크기와 용액의 점성도에는 반비례한다. 이를 수식으로 표현하면 v=Eq/d6πrη 이다. 이 실험을 통해 전기영동의 기본 원리와 이론을 이해할 수 있...2025.01.20
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[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
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SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 실험2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질을 SDS로 변성시켜 모든 단백질이 유사한 전하/분자량 비를 가지도록 만든 후 전기영동을 통해 분리한다. 이 실험에서는 SDS-PAGE의 원리와 사용되는 시약들의 특성을 이해하고, 실제로 단백질 분리 실험을 진행하여 결과를 분석하였다. 2. 단백질 변성 SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어 선형 구조로 만들어 주며, 단백질에 음전하를 부여한다. 이를 통해 단백질의 고유 전하와 상관없이 분자량에 따라 분리할 수 있게 된다. 실험에서는 단백질 시료를...2025.01.03
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브로콜리 DNA 추출2025.01.031. 브로콜리 DNA 추출 이 실험은 실생활에서 가까이 접할 수 있는 식물인 브로콜리의 잎에서 DNA를 추출하여 식물 세포의 구조와 DNA의 특성을 이해하고 추출한 DNA를 다른 실험에 적용하는 것을 목적으로 합니다. 실험 과정에서는 소금과 계면활성제를 사용하여 DNA를 잘 뭉치게 하고 세포막과 핵막을 파괴하여 DNA 추출을 돕습니다. 또한 차가운 에탄올을 천천히 부어 DNA 침전을 촉진시킵니다. 실험 결과에서는 흰색의 가는 선 모양의 물질이 DNA라고 확인하였지만, 실험에서 DNA가 잘 엉키지 않아 아쉬웠다고 언급하였습니다. 추가...2025.01.03
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A+ 생화학실험 <14주차. 단백질 분석 (SDS-PAGE)> 레포트2025.01.201. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)를 이용해 단백질에 음전하를 부여함으로써 Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)를 수행하여 단백질을 크기에 따라 분리하는 전기영동 방법입니다. SDS-PAGE는 일반적으로 5~250 kDa 범위의 단백질을 분리하는 데 사용되며, 이 방법을 통해 단백질의 구조와 전하가 이동 속도에 미치는 영향을 제거할 수 있습니다. SDS에 의해 음전하를 띤 선형화 된 단백질은 전기장을 가했을 때 양극(+)을 향해 이동하며, ...2025.01.20
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Western Blotting 레포트2025.01.211. Western Blotting Western Blotting은 단백질을 감지하고 양을 확인하여 분자량을 측정할 수 있는 방법입니다. 단백질을 polyacrylamide gel에서 전기영동으로 분리하고, nitrocellulose membrane에 옮긴 후, 찾고자 하는 단백질의 primary antibody와 secondary antibody를 이용하여 band를 형상화하는 과정입니다. 이 방법에는 Sample preparation, Electrophoresis를 위한 Gel preparation, Transfer, Antib...2025.01.21
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SDS-PAGE and Protein Analysis2025.01.211. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 계면활성제로서 친수성과 소수성 부분을 모두 지니고 있으며, 단백질을 변성할 수 있는 물질이다. SDS-PAGE는 이러한 SDS의 특성을 토대로 하여 단백질을 분자량에 따라 band 형태로 분리하는 실험이다. 단백질은 그 구조와 전하, 분자량이 모두 다르기 때문에 SDS를 통해 단백질의 구조와 전하를 모두 일정하게 한 뒤 분자량에 의해서만 분석을 진행한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 Acrylamide와 N,N'-Methylene...2025.01.21