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생화학실험 단백질정제 정량2024.09.281. 단백질 정량법 1.1. 단백질 정량의 목적과 중요성 단백질 정량의 목적과 중요성은 다음과 같다. 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정으로, 단백질 정제, 전기영동, 효소 활성 측정을 포함하는 모든 단백질 연구의 기본이 되는 실험이다. 특히 효소의 활성 반응 역학(kinetics)을 연구하거나, 다양한 조건에서 대상 시료의 단백질 발현량을 비교할 때 필수적이다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 실험의 오류를 찾아내기가 어렵기 때문에 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘못 이루...2024.09.28
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특정 유전자를 선택하여 T-Vector에 삽입시키고 이를 E-Coli 내에 transformation 시켜 형질전환 박테리아를 선택적으로 배양2024.11.171. 형질전환(Transformation) 1.1. 개념 및 원리 1.1.1. 형질전환의 정의 형질전환(transformation)이란 세포가 외부 DNA를 받아들여 자신이 갖고 있던 DNA와 결합함으로써 세포의 유전형질에 변화가 나타나는 현상을 말한다. 이러한 형질전환은 세균에서 흔히 관찰되며, 인공적인 유전자 조작을 통해 이루어질 수도 있다. 어떤 세포가 외부의 DNA를 받아들일 수 있는 생리적 상태에 있는 것을 '유능(Competent)'하다고 하며 그러한 상태를 '유능성(Competence)'이라고 한다. 원래 자연스...2024.11.17
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단백질 정제 및 발현에서 cell lysis와 sonication 보고서를 써줘2024.10.131. 단백질 정제 1.1. 실험배경 1.1.1. 재조합 단백질 발현 재조합 단백질 발현이란 외부 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입한 후, 이를 숙주세포에 도입하여 단백질을 발현하는 기법이다. 이를 통해 내생적 단백질에 비해 훨씬 높은 양의 단백질을 생산할 수 있으며, 정제 및 검출을 위한 태그(tag)를 부착할 수 있다는 장점이 있다. 재조합 단백질 발현 실험에서 사용되는 pET28a 벡터는 kanamycin 항생제에 대한 저항성 유전자인 KanR을 갖고 있다. 따라서 배양액에 kanamycin을 첨가하면 KanR을 갖고 있는 ...2024.10.13