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Induction sds2024.10.171. 단백질 발현 분석 1.1. 실험 개요 실험 개요는 단백질 발현 분석을 위한 전반적인 실험 과정을 설명한다. 이 실험은 대장균(E. coli)에서 특정 유전자를 발현시켜 단백질을 생산하고, SDS-PAGE를 통해 발현된 단백질을 확인하는 것이 주요 목적이다. 우선, 대장균 세포에 목적 유전자가 도입된 발현 벡터를 형질전환하여 균주를 만든다. 이 균주를 배양하면서 IPTG를 처리하여 Lac operon 시스템을 활성화시켜 단백질 발현을 유도한다. 발현된 단백질은 세포 용해 과정을 거쳐 추출하고, SDS-PAGE를 통해 단백질...2024.10.17
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단백질 발현, 정제 보고서를 써줘2024.10.121. 생명과학실험Ⅰ 실험보고서 1.1. 실험배경 1.1.1. 세포 내 단백질 발현 세포 내 단백질 발현은 생명체의 기본적인 생명 활동을 이해하는 데에 매우 중요한 과정이다. 세포는 살아가기 위해 필요한 다양한 단백질을 끊임없이 합성하고 있으며, 이러한 단백질들은 세포 내에서 복잡한 네트워크를 이루며 상호작용하며 세포의 구조와 기능을 유지한다. 세포 내에서 원래부터 만들어지는 단백질을 내생적(endogenous) 단백질이라고 하며, 세포는 수만 개 이상의 다양한 내생적 단백질들을 끊임없이 생산해내고 있다. 이러한 내생적 단백질...2024.10.12
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닭 배아 발생2025.03.161. 서론 1.1. 배아 발생 실험의 필요성 배아 발생 실험의 필요성은 다음과 같다. 배아는 하나의 수정란에서 출발하여 점차 분화와 성장을 거쳐 완전한 개체로 발달하게 되는데, 이러한 배아 발생 과정에 대한 관찰과 연구가 필요하다. 배아 발생 실험을 통해 세포의 분화, 장기의 형성, 유전자 발현 등 발생학적 기본 원리를 이해할 수 있고, 이는 의학적으로 중요한 기초 지식이 된다. 또한 배아 발생 과정의 이상을 통해 선천성 기형의 원인을 파악할 수 있어 발생학적 연구는 의학 분야에 기여할 수 있다. 한편 닭 배아는 실험 관찰이 용이...2025.03.16
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SDS page2025.03.271. SDS PAGE의 원리 1.1. SDS PAGE 정의 및 특징 SDS PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 약어로, 단백질을 분리해내는 기술이다. 주로 내분비학, 유전학, 생화학, 분자생물학 등 단백질을 연구하는 학문에 많이 사용되며, 전기영동 이동성을 이용하여 단백질을 분리한다. 단백질의 전기영동 이동성은 polypeptide sequence의 길이, 분자량, 3차원 접힘 구조 등의 요인에 의해 나타나는 특성이다. 핵산 전기영동에서는 agaros...2025.03.27
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SDS page2025.03.271. SDS PAGE 1.1. SDS PAGE의 정의와 특징 SDS PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)는 단백질을 분리해내는 기술로, 전기영동 이동성을 이용하는 방법이다. 단백질을 구성하는 아미노산 서열의 길이, 분자량, 3차원 접힘 구조 등의 요인에 따라 나타나는 전기적 이동 특성을 이용하여 단백질을 분리할 수 있다. 핵산 전기영동에는 주로 아가로스 겔을 사용하지만, 단백질 전기영동에는 폴리아크릴아마이드 겔을 사용한다. 아크릴아마이드 단량체와 교차결합...2025.03.27
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SDS page2025.03.151. SDS PAGE 1.1. SDS PAGE 개요 SDS PAGE는 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산을 전기영동할 때는 아가로스 겔을 주로 이용하지만, 단백질 전기영동에는 폴리아크릴아마이드 겔을 사용한다. 아크릴아마이드 단량체가 ammonium persulfate와 TEMED 효소의 촉매 반응을 통해 폴리아크릴아마이드로 중합되어 겔 구조를 형성한다. 이 반응은 효소 촉매 반응이므로 비가역적이다. SDS는 음이온성 계면활성제로, 단백질과 비가역적으로 결합하여 균일한 음전하를 띠게 한다. 이로써 단백질의 고유한 전하와 입체 구조...2025.03.15
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연세대학교 레포트 표지2025.03.221. 연세대학교 레포트 표지 본 레포트는 Lab1에서 실험기본장치, Lab2에서 세포배양, Lab3-5에서 gene 관련 실험을 진행했다. Lab4에서는 특정 gene을 E.coli에 translation시켜 target gene을 복제하였다. 이 gene을 2가지 방법으로 활용할 수 있는데, 첫째는 gene 자체로만 활용하는 것이고, 둘째는 gene에 의해 발현된 protein을 활용하는 것이다. 본 레포트에서는 protein isolation을 다루며, 추가적으로 standard curve를 이용한 protein 농도 측정 방법...2025.03.22
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단백질정제 및 정량2024.09.281. 서론 1.1. eGFP의 정의 및 특성 eGFP(enhanced Green Fluorescent Protein)는 Aequorea victoria에서 발견된 GFP(Green Fluorescent Protein)를 변형시킨 단백질이다. eGFP는 GFP의 아미노산 중 64번째 phenylalanine이 leucine으로, 65번째 serine이 threonine으로 변이된 돌연변이체이다. eGFP는 GFP보다 더 많은 빛을 흡수할 수 있어 단백질 정량 실험에서 더 높은 효율을 보인다. eGFP는 293개의 아미노산으로 구...2024.09.28
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5X His tagged2024.09.281. 실험 개요 1.1. 단백질 정제 기술 단백질 정제 기술은 목적 단백질을 다른 불순물들로부터 분리하여 순수하게 얻어내는 방법이다. 이를 위해 다양한 크로마토그래피 기술이 사용되며, 그중에서도 친화성 크로마토그래피(Affinity chromatography)가 널리 사용된다. 친화성 크로마토그래피는 특정 리간드와 단백질 사이의 결합 특이성을 이용하여 목적 단백질을 분리하는 방법이다. 그 중 하나가 금속이온 친화성 크로마토그래피(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC)이다. ...2024.09.28
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단백질 발현 실험 목적2024.09.261. 단백질 발현과 정제 1.1. 실험 목적 단백질 발현의 목적은 특정 유전자를 통해 얻고자 하는 단백질을 대량 생산할 수 있기 때문이다. 또한 단백질 정제의 목적은 단백질을 순도 높게 분리 및 정제함으로써 수많은 단백질 중 원하는 단백질만을 얻기 위함이다. 1.2. 실험 이론 및 원리 단백질 발현의 재조합 DNA 기법은 외부 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입하여 숙주 세포에 도입하면 마치 숙주 세포의 유전자처럼 발현되는 기법이다. 알로락토오스와 유사한 IPTG를 이용해 Lac repressor와 결합하게 함으로써 lac opera...2024.09.26
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