1. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...

1. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...

1. 플라스미드 DNA와 Mini-prep 플라스미드 DNA는 박테리아의 세포외에 존재하는 작은 원형 이중 가닥 DNA로, 염색체와 별도로 독자적으로 복제 및 증식할 수 있습니다. 유전자 재조합 기술에 사용되며 크기가 작아 정제가 용이합니다. Mini-prep은 형질전환된 세균을 배양한 후 플라스미드 DNA를 정제하는 과정으로, 알칼리 변성(alkaline lysis) 방법을 주로 사용합니다. 이 방법은 SDS와 수산화나트륨으로 세포를 파괴하고, 아세트산칼륨으로 중성화한 후 원심분리와 에탄올 침전법으로 DNA를 정제합니다. 2. D...