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전기영동 예비2025.01.221. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 한다. 전기영동에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동 등 다양한 종류가 있다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 gel 농도, DNA 분자의 크기, 전압 등이 있다. TAE buffer와 EtBr은 전기영동 실험에 중요한 시약이다. 1. 전기영동 전기영동은 생물학, 화학, 의학 등 다양...2025.01.22
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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DNA 결합효소 실험 결과 보고서2025.01.221. DNA 제한효소 실험에서 HindⅢ와 EcoRⅠ 제한효소를 사용하여 Lambda DNA를 절단하였다. 이론적인 digestion 결과와 실제 실험 결과를 비교하였으며, DNA Ladder marker를 이용하여 DNA 크기를 추정하였다. 또한 DNA 밴드의 끌림 현상과 DNA 밴드의 굵기에 대해 고찰하였다. 2. 전기영동 실험 결과를 확인하기 위해 아가로스 겔 전기영동을 수행하였다. 제한효소를 사용하지 않은 경우와 HindⅢ, EcoRⅠ 각각 사용한 경우, 그리고 두 효소를 혼합하여 사용한 경우의 결과를 비교하였다. 전기영동 ...2025.01.22
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Agarose gel Electrophoresis 결과레포트2025.05.161. Agarose gel Electrophoresis 이번 실험의 목적은 실험2에서 진행된 PCR product를 전기영동해 분리하고 분석하는 것이었습니다. 1000bp가 가장 이상적인 값이었지만, 8개 샘플 중 6개만 1000bp와 비슷한 곳에 나타났고 나머지 2개는 전혀 나타나지 않았습니다. 이는 2개 샘플의 DNA 농도가 상대적으로 낮아서 그런 것으로 보입니다. 또한 약간의 끌림 현상이 관찰되었는데, 이는 DNA가 깨졌거나 농도가 너무 높아서 생긴 것으로 보입니다. 이를 방지하기 위해서는 annealing 온도 조절, DNA...2025.05.16
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2022년 1학기 서울대 생물학실험 모듈 3 실험보고서2025.01.231. 형질전환 본 실험에서는 재조합된 플라스미드로 대장균을 형질전환하고, PCR과 전기 영동을 통해 형질전환의 결과를 DNA 수준에서 확인하고자 하였다. 여러 종의 플라스미드를 대장균에 도입해 형질전환을 유도했으며, colony PCR을 통해 도입된 플라스미드를 대량으로 복제한 후 확인했다. 2. PCR PCR은 DNA 중합 효소와 프라이머를 이용해 DNA의 특정 부분을 대량으로, 인공 환경에서 복제하는 기술이다. PCR을 통해 실험에서 활용되는 DNA를 대량으로 복제해 사용할 수 있으므로 PCR 기술은 유전 공학에서 매우 중요하다...2025.01.23
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생명과학실험1 SDS-PAGE & Coomassie blue Staining2025.01.131. SDS의 역할 및 원리 SDS(sodium dodecyl sulfate)는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산의 소수성 부분과 hydrophobic interaction을 하며 결합하는데, 아미노산 2개당 1개 정도 binding하여 단백질을 변성한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 ① Tris-HCl: Stacking gel과 Resolving gel의 pH를 다르게 하여 각 gel에서 Glycine의 charge 다르게 조정해준다. 또한 Cl-를 첨가해주어서...2025.01.13
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생화학 실험/실습 보고서 (PCR)2025.01.231. DNA DNA는 살아있는 모든 유기체 및 많은 바이러스의 유전적 정보를 담고 있는 실 모양의 핵산 사슬이다. DNA는 2개의 뉴클레오타이드 가닥이 결합하여 이중나선 구조를 이루고 있으며, 각각의 가닥은 뉴클레오타이드 단량체들의 복합체로 염기, 디옥시리보오스, 인산염 3가지로 구성되어 있다. DNA의 상보성은 DNA 정보 저장, 복제, 전사 등에 기여한다. 2. RNA RNA는 DNA와 더불어 핵산이라고 하는데, 지방, 단백질, 탄수화물과 더불어 생명체를 이루는 주된 물질이다. RNA는 DNA와 마찬가지로 뉴클레오타이드가 연결된...2025.01.23
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Western Blotting 레포트2025.01.211. Western Blotting Western Blotting은 단백질을 감지하고 양을 확인하여 분자량을 측정할 수 있는 방법입니다. 단백질을 polyacrylamide gel에서 전기영동으로 분리하고, nitrocellulose membrane에 옮긴 후, 찾고자 하는 단백질의 primary antibody와 secondary antibody를 이용하여 band를 형상화하는 과정입니다. 이 방법에는 Sample preparation, Electrophoresis를 위한 Gel preparation, Transfer, Antib...2025.01.21
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PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 결과 보고서2025.01.151. PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 이 보고서는 PCR 기술을 사용하여 특정 인간 DNA를 증폭하고 검출하는 실험 결과를 설명합니다. 실험에서는 구강 상피 세포에서 DNA를 추출하고, 특정 프라이머를 사용하여 DNA를 증폭한 후 전기영동을 통해 분석했습니다. 실험 결과, 두 개의 샘플에서 250bp 부근에서 강한 발현이 관찰되었으며, 이 중 하나는 wild type, 다른 하나는 mutant type의 DNA인 것으로 확인되었습니다. 이 실험을 통해 PCR의 기본 원리와 UV-transilluminat...2025.01.15
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임상화학 총론, 탄수화물, 단백질 한눈에 보기 (정리)2025.01.021. 임상화학 총론 임상화학 검사에 사용되는 기본적인 기구와 방법, 검체 관리, 정도관리 등에 대해 설명하고 있습니다. 피펫, 원심분리기, 진공채혈관, 완충용액, 생리적 변동 오류, 검체 관련 오류 등에 대해 정리하고 있습니다. 2. 탄수화물 탄수화물의 종류와 특성, 대사 과정인 해당, 글리코젠 합성 및 분해, 당신생 등에 대해 설명하고 있습니다. 단당류, 이당류, 다당류의 구조와 특성, 그리고 이와 관련된 검사 방법 등을 정리하고 있습니다. 3. 단백질 단백질의 기준범위, 측정 방법(뷰렛법, 자외부법, 켈달법 등), 알부민 측정법...2025.01.02
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