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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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CHO 세포 현탁 배양 실험 결과 보고서2025.01.041. CHO 세포 특성 이 실험의 목적은 CHO 세포의 특성을 알아보고, 직접 현탁 배양된 세포의 생존율을 Hemocytometer와 Countess II를 이용하여 측정하는 것입니다. CHO 세포는 포유류 세포주로, 생물공정 실험에 널리 사용되는 세포주입니다. 이 실험을 통해 CHO 세포의 특성과 현탁 배양 시 세포 생존율을 확인할 수 있습니다. 2. 현탁 세포 배양 실험 방법에 따르면, 먼저 CHO 세포가 배양되어 있던 플레이트의 오래된 배지를 버리고 FBS로 세척하였습니다. 그 후 세포 계수를 위해 EP tube에 옮겨 담았습...2025.01.04
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MTT assay A+ report2025.01.171. MTT assay MTT assay는 세포 대사 활성을 색 변화로 측정하는 실험으로 세포 독성 실험이라고도 한다. Tetrazolium salt인 MTT를 살아 있는 세포에 처리하면, 미토콘드리아 안의 oxidoreductase enzyme(NADPH)에 의해 환원되어 보라색을 띠는 formazan 결정체를 형성한다. 죽은 세포의 경우, 미토콘드리아가 터져 없으므로 formazan이 형성되지 않고, 색을 띠지 않는다. 이렇게 생성된 formazan은 비수용성으로, 유기용매 또는 계면활성제 등에 녹여 570nm에서 흡광도(세포의...2025.01.17
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MTT assay (WST-8 assay)2025.01.181. Tetrazolium Tetrazolium은 dehydrogenase 등의 효소에 의해 쉽게 환원되어 유색의 formazan을 형성한다. 이러한 원리로 가장 널리 사용되는 MTT tetrazolium은 노란색 수용성 기질로, 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan 이라고 불리는 crystal을 형성한다. 따라서 세포사멸에 의해 미토콘드리아가 제 기능을 하지 못하게 되면 MTT를 처리해도 formazan을 형성하지 못하게 된다. 2. MTT assay MTT assa...2025.01.18