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Cell Culture and Cell Counting using a hemocytometer 보고서2025.01.211. 세포 배양 세포 배양은 동물이나 식물에서 채취한 세포를 인공적으로 조성된 환경에서 성장시키는 과정입니다. 세포 배양에는 세포 배양 플라스틱, 세포 배양 배지, 트립신 등이 사용됩니다. 세포 배양 시 무균 상태를 유지하고 각 세포 유형에 맞는 환경을 제공해야 합니다. 2. 세포 계수 세포 계수는 세포의 수를 측정하는 과정입니다. 트립판 블루 염색법을 이용하여 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 혈구 계산기, 유세포 분석기, 쿨터 계수기 등 다양한 방법으로 세포를 계수할 수 있습니다. 3. NIH-3T3 세포 배양 ...2025.01.21
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[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서2025.04.261. EGFP 유전자 발현 조절 이번 실험에서는 CRISPR-CAS9을 이용해 EGFP 유전자 발현을 조절하는 방법을 사용했다. EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야 하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해야 한다. 2. CHO-S 세포 배양 이번 실험에서는 CHO-S 세포를 사용했다. CHO-S 세포는 부유하면서 자랄 수 있어 배양 속도와 공간 활용도가 adherent 세포에 비해 좋아 생산성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간과 진화적으로 가까워 human-like PTM, ...2025.04.26
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[A+ 리포트] 100pi dish를 이용한 Cell counting and seeding (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험에 필요한 재료와 기구를 준비하고, 세포 배양 온도와 동일한 37°C로 배양액을 유지하는 것이 중요합니다. 또한 세포 배양 접시의 상태를 확인하고, 세포를 분리하기 위해 트립신-EDTA를 처리하며, 분리된 세포를 수집하고 원심분리하여 세포 펠릿을 얻는 과정을 거칩니다. 2. 세포 계수 세포 계수를 위해 세포 현탁액을 만들고 trypan blue로 염색한 후 혈구 계산기를 이용하여 세포 수를 세는 과정을 거칩니다. 이를 통해 세포 밀도와 총 세포 수를 계산할 수 있습니다. 3. 세포 분주 세포 계수 결과...2025.04.25
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Cell Proliferation Analysis by MTT Assay2025.01.211. MTT Assay MTT assay는 세포의 증식능을 분석하는 실험 기법으로, 세포의 대사에 관여하는 미토콘드리아 내 NADH-dependent cellular oxidoreductase enzyme을 통해 MTT가 formazan으로 환원되는 원리를 이용한다. 이 실험은 배양한 세포 수를 변수로 하여 MTT assay를 통해 각 condition 별 세포의 대사 활성이 어느 정도로 측정되는지 도출하고, 이의 원리에 대해 이해하는 것을 목표로 한다. 2. 세포 증식 분석 MTT assay는 세포의 생존율 및 증식률을 측정하는 ...2025.01.21
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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세포 계수 및 배양접시 seeding2025.01.021. Hemocytometer를 이용한 세포 계수 Hemocytometer는 혈액 중의 적혈구, 백혈구, 호산구 등의 세포를 세기 위해 고안된 현미경 슬라이드입니다. Hemocytometer의 격자 구조와 틈새 높이를 이용하여 세포 현탁액의 농도를 계산할 수 있습니다. 또한 trypan blue 염색을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 이를 통해 실험에 필요한 적절한 농도의 세포를 준비할 수 있습니다. 2. 세포 계수 방법 Hemocytometer 외에도 flow cytometry, CFU counting, s...2025.01.02
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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혈구 세포 관찰 및 세포 계수 실험2025.01.021. 혈구 세포 관찰 현미경을 이용하여 혈액 내 다양한 혈구 세포를 관찰하고 그 구조적 차이를 통해 세포를 구분하였습니다. 적혈구, 혈소판, 호중구, 림프구, 단핵구 등의 세포를 확인할 수 있었지만 호산구와 호염기구는 관찰하지 못했습니다. 세포 관찰 시 염색 방법과 현미경 배율 등의 한계로 인해 세포의 세부 구조를 자세히 관찰하기 어려웠습니다. 2. 세포 계수 Hemocytometer를 이용하여 살아있는 세포를 계수하는 방법을 실습하였습니다. 조원들 간 세포 계수 결과에 차이가 있었는데, 이는 샘플링, 세포 분포, 관찰자의 주관적 ...2025.01.02
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세포 계대배양 Cell subculture 및 cell thawing 프로토콜2025.01.241. 세포 계대배양 세포 계대배양은 세포를 새로운 배양 용기로 옮겨 배양하는 과정입니다. 이 프로토콜에서는 세포 해동, 세포 계수, 세포 계대배양 등의 단계를 자세히 설명하고 있습니다. 세포 배양 시 배지, 혈청, 항생제의 비율과 사용량, 배양 온도 및 CO2 농도 등의 조건을 잘 관리해야 합니다. 2. 세포 해동 세포를 액체 질소 탱크에서 꺼내어 37°C 수조에서 1-2분 내에 해동시킵니다. 해동된 세포를 배지가 든 falcon 튜브에 옮기고 원심분리하여 상층액을 제거한 뒤 새로운 배지를 넣어 세포를 현탁합니다. 이후 세포 수를 ...2025.01.24
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23