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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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전기영동2025.01.161. 전기영동의 원리 전기영동은 전하를 띤 분자가 전기장 안에서 (+)극이나 (-)극으로 이동하는 현상을 이용한 기술이다. 전하를 띤 분자는 자신의 전하와 반대 극으로 이동하게 되므로, 혼합된 분자를 전류가 흐르는 매질에 두면, 각 분자는 자신의 전하에 따라 양극 또는 음극으로 이동하게 된다. 이를 이용하여 혼합된 분자를 분리할 수 있다. 2. 전기영동액과 전기분해작용 전기영동을 수행하려면 전류가 흐를 수 있는 전도성 물질로 양극이 연결되어야 한다. 전도성 물질은 주로 이온결합화합물인 염이 들어있는 수용액이 사용된다. 전기영동 시 ...2025.01.16
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[일반생물학실험]혈액에서 DNA 추출2025.01.161. DNA 추출 이 실험의 목적은 혈액에서 DNA를 추출하고, 중합효소 연쇄반응(PCR)을 통해 DNA 증폭 산물을 만들어 전기영동으로 확인하는 것입니다. PCR은 DNA 사슬 중 특정 부분을 대량으로 증폭시키는 방법으로, 처음에는 대장균에서 분리한 DNA 중합효소 I을 사용했지만 사이클이 지날 때마다 효소를 첨가해야 하는 불편함이 있었습니다. 그러나 사이키가 높은 온도에서도 활성이 유지되는 Taq DNA 중합효소가 발견되면서 PCR 실험 방법이 보편화되었습니다. 2. 중합효소 연쇄반응(PCR) PCR은 증폭시키려는 주형 DNA,...2025.01.16
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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[생명공학 레포트] gDNA isolation 및 T7E1 assay를 통한 genome editing 확인2025.05.031. gDNA isolation gDNA는 plasmids와 같은 extra-chromosomal DNAs와는 다르게 chromosomal DNA를 의미한다. gDNA를 분리하는 단계에서는 cell과 CLS(Cell Lysis Solution), proteinase K를 섞어 DNA 추출을 위해 cell을 파괴하는 역할을 한다. CLS에는 SDS, Tris-HCl, EDTA 등이 들어가 있으며, SDS는 cell membrane의 lipid를 제거하고, Tris-HCl은 pH 변화를 방지하며, EDTA는 세포 내의 DNases의 역...2025.05.03
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레닌저 생화학 정리노트 Ch09. DNA 기반 정보기술2025.05.101. 유전체(genome) 생물의 완전한 하나의 반수체 유전자를 의미하며, 유전체학(genomics)은 DNA에 대한 학문으로 세포와 개체 수준에서 생화학을 연구하는 학문인 system biology에 기여한다. 2. 클로닝 유전자와 그 산물에 대한 연구를 위해 동일한 복제물을 만드는 것으로, 특정 개체의 복제물(organism cloning), 특정한 유전자나 DNA 단편의 복사물(DNA cloning)을 만들 수 있다. 재조합 DNA(recombinant DNA)는 2개 이상의 소스에서 공유 결합된 조각으로 구성된 복합 DNA ...2025.05.10
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바이러스의 분류2025.05.111. 바이러스 감염병의 진단 바이러스 감염병의 검사실 진단은 세균성 감염병의 검사실 진단과 상당히 다르게 진행되며, 그 원칙은 6가지입니다. 조직, 병리학적 검사, 특이 면역반응의 혈청학적 증명, 원인 바이러스의 분리, 배양 및 동정, 전자현미경 관찰에 의한 바이러스 입자의 발견, 바이러스 항원의 증명, 바이러스 배양 등입니다. 이 중 바이러스 분리, 배양 및 동정이 가장 정확한 방법이지만 수행 비용, 인원, 시설, 시간 등의 제한으로 실제 동정에 어려움이 있습니다. 따라서 혈청학적 방법, 조직/병리학적 검사, 바이러스 항원 증명,...2025.05.11
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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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구강상피로부터 DNA 추출 실험 보고서2025.05.141. DNA 추출 과정 DNA 추출 과정에서 사용되는 다양한 용액들의 역할에 대해 자세히 설명하고 있습니다. PBS 용액은 세포의 삼투압 변화를 방지하고, GL-buffer는 계면활성제를 포함하여 세포막을 파괴하는 역할을 합니다. Proteinase K와 RNase A는 각각 단백질과 RNA를 분해하여 DNA를 정제하는데 사용됩니다. 이후 Spin column을 이용한 정제 과정에서는 Chaotropic agent와 고농도 염이 DNA를 실리카 막에 흡착시키는 역할을 합니다. 2. PCR 실험 설계 PCR 실험에서 실험군과 대조군을...2025.05.14
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PCR 기법을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 실험 보고서2025.05.141. PCR (중합효소 연쇄 반응) PCR은 1983년 K.B.Mullis에 의해 고안된 방법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전자를 증폭하는 기술이다. PCR을 통해 미량의 DNA 시료에서 목적 DNA 영역을 수시간에 20만~50만배로 증폭할 수 있으며, 이는 현재 유전물질을 조작하는 거의 모든 과정에서 사용되고 있다. PCR은 인간의 DNA를 증폭하여 유전질환을 진단하거나, 세균이나 바이러스의 DNA를 증폭하여 감염성 질환을 진단하는 데 사용될 수 있다. 2. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 크기, 전하 또는 구조가 다른 DN...2025.05.14
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