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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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[생명공학 레포트] gDNA isolation 및 T7E1 assay를 통한 genome editing 확인2025.05.031. gDNA isolation gDNA는 plasmids와 같은 extra-chromosomal DNAs와는 다르게 chromosomal DNA를 의미한다. gDNA를 분리하는 단계에서는 cell과 CLS(Cell Lysis Solution), proteinase K를 섞어 DNA 추출을 위해 cell을 파괴하는 역할을 한다. CLS에는 SDS, Tris-HCl, EDTA 등이 들어가 있으며, SDS는 cell membrane의 lipid를 제거하고, Tris-HCl은 pH 변화를 방지하며, EDTA는 세포 내의 DNases의 역...2025.05.03
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전기영동 예비보고서2025.01.121. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나입니다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 합니다. 전기영동의 종류에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동이 있습니다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 Gel의 농도, DNA 분자의 크기, 전압, DNA의 형태 등이 있습니다. TAE buffer는 Tris, Acetate, EDTA로 구성되어 있으며 DNA를 끌어주는 역할을 ...2025.01.12
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[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.061. DNA 및 단백질 분리 이 실험은 전기영동법을 통해 DNA나 단백질과 같은 고분자 물질을 분리하는 방법을 이해하고자 합니다. 아가로스 젤을 만들어 보면서 그 특징을 알아보고, 전기영동에 필요한 시료의 역할과 DNA 분자의 크기에 따른 이동 속도를 관찰합니다. 2. 아가로스 젤 전기영동 원리 DNA는 음전하를 띄고 있어 전기장 아래에서 양극 쪽으로 이동합니다. 이때 DNA 분자량이 클수록, 아가로스 농도가 높을수록, 구조가 복잡할수록 이동 속도가 느려집니다. 전압이 높을수록, 완충액 성분과 이온강도에 따라 이동 속도가 달라집니다...2025.01.06
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분자생물학 실험 (A+) Agarose gel eelectrophoresis 예비보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 데 사용되는 기술입니다. 이 기술을 사용하면 DNA 조각의 크기와 순수도를 확인할 수 있습니다. 전기영동 과정에서 DNA 분자는 음전하를 띠고 있어 양극으로 이동하게 됩니다. 이때 작은 DNA 조각은 빨리 이동하고 큰 DNA 조각은 느리게 이동하게 됩니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기를 확인할 수 있습니다. 2. DNA 분리 및 분석 DNA 분리 및 분석은 분자생물학 실험에서 매우 중요한 과정...2025.01.04
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분자생물학실험-DNA전기영동 실험보고서2025.05.011. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 DNA 분자를 전기장 내에서 이동시켜 크기에 따라 분리하는 기술입니다. 이 실험에서는 plasmid extraction kit를 사용하여 DNA를 추출하고, 아가로스 겔 전기영동을 통해 DNA 단편을 분리하였습니다. PA1 버퍼는 RNase A를 첨가하여 사용하며, 4도에서 보관해야 합니다. W2 버퍼는 염과 용해성 잔해를 제거하고, EA 버퍼는 DNA 용출에 사용됩니다. 1. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 생명과학 분야에서 매우 중요한 기술입니다. 이 기술을 통해 DNA 분자의 크기와 전...2025.05.01
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27