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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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박테리아에서 DNA 분리 (생화학 실험)2025.01.161. Alkaline lysis mini prep Alkaline lysis mini prep은 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법이다. 이 방법은 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해낸 후, 크로모좀 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 순수한 플라스미드 DNA만을 회수하는 것이 핵심이다. 알칼리 조건에서 크로모좀 DNA는 변성되어 침전되지만, 플라스미드 DNA는 supercoiled 상태를 유지하여 회수할 수 있다. 2. 플라스미드 DNA 분리 과정 플라스미드 DNA 분리 과정은 크게 3단계로 이...2025.01.16
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.061. DNA 및 단백질 분리 이 실험은 전기영동법을 통해 DNA나 단백질과 같은 고분자 물질을 분리하는 방법을 이해하고자 합니다. 아가로스 젤을 만들어 보면서 그 특징을 알아보고, 전기영동에 필요한 시료의 역할과 DNA 분자의 크기에 따른 이동 속도를 관찰합니다. 2. 아가로스 젤 전기영동 원리 DNA는 음전하를 띄고 있어 전기장 아래에서 양극 쪽으로 이동합니다. 이때 DNA 분자량이 클수록, 아가로스 농도가 높을수록, 구조가 복잡할수록 이동 속도가 느려집니다. 전압이 높을수록, 완충액 성분과 이온강도에 따라 이동 속도가 달라집니다...2025.01.06
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분자생물학 실험 (A+) Agarose gel eelectrophoresis 예비보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 데 사용되는 기술입니다. 이 기술을 사용하면 DNA 조각의 크기와 순수도를 확인할 수 있습니다. 전기영동 과정에서 DNA 분자는 음전하를 띠고 있어 양극으로 이동하게 됩니다. 이때 작은 DNA 조각은 빨리 이동하고 큰 DNA 조각은 느리게 이동하게 됩니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기를 확인할 수 있습니다. 2. DNA 분리 및 분석 DNA 분리 및 분석은 분자생물학 실험에서 매우 중요한 과정...2025.01.04
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분자생물학실험-DNA전기영동 실험보고서2025.05.011. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 DNA 분자를 전기장 내에서 이동시켜 크기에 따라 분리하는 기술입니다. 이 실험에서는 plasmid extraction kit를 사용하여 DNA를 추출하고, 아가로스 겔 전기영동을 통해 DNA 단편을 분리하였습니다. PA1 버퍼는 RNase A를 첨가하여 사용하며, 4도에서 보관해야 합니다. W2 버퍼는 염과 용해성 잔해를 제거하고, EA 버퍼는 DNA 용출에 사용됩니다. 1. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 생명과학 분야에서 매우 중요한 기술입니다. 이 기술을 통해 DNA 분자의 크기와 전...2025.05.01
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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Plasmid DNA 분리 결과 레포트2025.04.261. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 수행했습니다. 박테리아 배양액에서 박테리아를 추출하고, mini prep 방법을 통해 세포벽과 세포막을 부수어 Plasmid DNA만 분리했습니다. 그 후 1% Agarose Gel에 Sample Loading하고 전기영동을 통해 DNA 밴드를 확인했습니다. 하지만 실험 결과 DNA가 추출되지 않아 DNA Ladder와 비교할 수 없었습니다. 이는 실험 과정에서 약간의 차이로 인해 오차가 발생했거나 실험 진행이 미숙했기 때문으로 분석됩...2025.04.26
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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제한효소 처리 DNA 전기영동 보고서2025.05.051. 제한효소 제한효소는 세균이 가지고 있는 DNA를 자르는 효소이다. 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기를 보호하기 위한 수단으로 사용된다. 제한효소는 그 종류마다 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하며, 이러한 특징 때문에 DNA 클로닝 등에 사용되고 있다. 2. 전기영동 전기영동은 전기장의 영향으로 전하를 띄는 물질이 유동성 매체에서 이동하는 원리를 이용한 기술이다. DNA는 음의 전하를 띄고 있기 때문에 전기를 걸어주면 양전하 쪽으로 이동하게 된다. DNA 가닥의 길이에 따라 이동 속도가 달라지므로, 이를...2025.05.05
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분자생물학 및 유전공학의 실험방법2025.05.101. Restriction endonuclease DNA의 specific short sequences를 인식하고 쪼갤 수 있는 enzyme입니다. Cloning vectors는 host cell에 외래 DNA를 삽입하기 위해 사용할 수 있는 DNA로, selectable markers와 replication origins을 가지고 있습니다. 2. Nucleases Nucleases(핵산가수분해효소)는 phospho diester bond의 ester bond를 Hydrolyze하는 enzyme이며, Phosphatases(인산분해...2025.05.10
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