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식물 세포의 DNA 추출 및 전기 영동2025.01.171. DNA 추출 식물 세포의 DNA를 추출하는 과정을 설명하였습니다. 세포벽, 세포막, 핵막을 파괴하고 DNA와 결합한 단백질을 제거하는 과정을 거쳤습니다. 세제와 소금을 이용하여 세포막과 핵막을 융해하고, 에탄올을 사용하여 DNA를 분리하는 방법을 사용하였습니다. 2. 전기 영동 추출한 DNA를 이용하여 전기 영동 실험을 진행하였습니다. 전기장 내에서 DNA가 크기와 전하에 따라 이동하는 원리를 설명하였습니다. 1X TAE 버퍼, 6X 로딩 버퍼, DNA 래더 등을 사용하여 DNA 밴드를 관찰할 수 있었습니다. 전압 조절에 따른...2025.01.17
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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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Protein Electro-transfer and Western blot2025.01.231. Western blotting Western blotting은 단백질에 대한 blotting 기술을 뜻하며, 항원-항체 반응을 이용한다. 단백질 혼합물을 polyacrylamide gel에서 SDS-PAGE를 이용하여 크기에 따라 분리하고 membrane으로 electro-transfer하여 흡착시킨 후 membrane 표면에서 항체를 이용하여 원하는 단백질의 존재를 확인하는 전반적인 과정을 의미한다. 2. SDS의 역할 및 원리 SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 ...2025.01.23
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세포 계수 및 배양접시 seeding2025.01.021. Hemocytometer를 이용한 세포 계수 Hemocytometer는 혈액 중의 적혈구, 백혈구, 호산구 등의 세포를 세기 위해 고안된 현미경 슬라이드입니다. Hemocytometer의 격자 구조와 틈새 높이를 이용하여 세포 현탁액의 농도를 계산할 수 있습니다. 또한 trypan blue 염색을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 이를 통해 실험에 필요한 적절한 농도의 세포를 준비할 수 있습니다. 2. 세포 계수 방법 Hemocytometer 외에도 flow cytometry, CFU counting, s...2025.01.02
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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미생물 배양 배지 만들기, 배양 및 관찰2025.01.031. 미생물 미생물은 매우 작아서 눈에 보이지 않는 아주 작은 생물로, 원생생물, 세균, 곰팡이, 바이러스 등을 포함하며 유전적, 생리적, 생화학적, 생태학적으로 다양성을 보인다. 미생물은 원핵미생물과 진핵미생물로 나뉘며, 원핵미생물은 핵막이 없고 핵산이 세포질 내에 존재하는 단세포 생물이고, 진핵미생물은 막으로 둘러싸인 핵을 가진 곰팡이나 효모 등이 포함된다. 2. 배양 미생물의 특징을 알아내거나 증식을 위해 미생물을 배양하는데, 배양이란 미생물을 온도, 산소 등 적당한 조건에서 증식시키는 과정이며 액체배양과 고체배양이 있다. 배...2025.01.03
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양파 뿌리의 체세포 분열 관찰2025.01.031. 세포 분열 세포 분열은 하나의 세포가 두 개로 나뉘어 세포의 개수가 늘어나는 생명 현상입니다. 세포 분열에는 체세포 분열과 감수 분열이 있으며, 이 실험에서는 체세포 분열을 관찰하였습니다. 체세포 분열은 핵을 가진 진핵세포에서 일어나며, 세포 내 유전자 양이 변하지 않습니다. 체세포 분열의 과정은 간기(G1기, S기, G2기)와 분열기(전기, 중기, 후기, 말기)로 나뉩니다. 2. 양파 뿌리의 활용 양파 뿌리는 생장점이 있어 체세포 분열이 활발하게 일어나므로, 체세포 분열 과정을 관찰하기 위해 실험에 사용되었습니다. 양파 뿌리...2025.01.03
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.061. DNA 및 단백질 분리 이 실험은 전기영동법을 통해 DNA나 단백질과 같은 고분자 물질을 분리하는 방법을 이해하고자 합니다. 아가로스 젤을 만들어 보면서 그 특징을 알아보고, 전기영동에 필요한 시료의 역할과 DNA 분자의 크기에 따른 이동 속도를 관찰합니다. 2. 아가로스 젤 전기영동 원리 DNA는 음전하를 띄고 있어 전기장 아래에서 양극 쪽으로 이동합니다. 이때 DNA 분자량이 클수록, 아가로스 농도가 높을수록, 구조가 복잡할수록 이동 속도가 느려집니다. 전압이 높을수록, 완충액 성분과 이온강도에 따라 이동 속도가 달라집니다...2025.01.06
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생명과학실험1 ELISA2025.01.171. ELISA 실험의 원리 ELISA 실험은 항원-항체 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 특정 항원의 존재 여부 및 농도를 분석하는 기법이다. 항체와 항원의 특이적 결합과 효소-기질 반응을 이용하여 목표 항원을 검출할 수 있다. 2. ELISA의 종류 ELISA에는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA 등 다양한 방식이 있다. 각 방식은 항원과 항체의 배치와 사용되는 항체의 수에 따라 차이가 있다. Indirect ELISA는 2차 항체를 사용하여 다양한 1차 항체에 대한 검출...2025.01.17
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PCR을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 보고서2025.01.181. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 1983년 K. B. Mullis가 고안한 방법으로, DNA를 대량으로 증폭할 수 있는 기술이다. PCR에 필요한 재료로는 복제하고자 하는 DNA, Taq DNA 중합효소, dNTPs, 프라이머, DNA 중합효소용 완충용액, MgCl2 등이 있다. PCR 과정은 변성, 결합, 중합 단계로 이루어지며, 이를 30회 이상 반복하면 DNA 총량이 기하급수적으로 증가한다. PCR은 친자 확인, 병원균 검출, 유전자변형식품 검사, 유전자 지도 작성, 범인 식별 등 다양한 분야에 활용된다. 2. DNA...2025.01.18
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