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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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유전물질이 단백질이 아닌 DNA임을 증명한 Hershey,Chase Experiment에 대한 고찰2025.05.121. 유전물질의 본질 유전물질의 존재를 밝힌 그리프스의 실험을 뒤이어서 진행된 에이버리 실험은 DNA가 유전물질의 본질이라는 파격적인 결론을 내었다. 하지만 당시 대다수의 과학자들은 단백질이 유전물질의 본질이라고 믿고 있었기 때문에 실험 결과는 잘 받아들여지지 않았다. 허쉬와 체이스의 실험은 당시 과학자들에게 잘 받아들여지지 않았던 에이버리의 실험 결과를 뒷받침하기 위해 진행되었다. 2. 허쉬와 체이스의 실험 실험을 했을 당시에 박테리오파지를 균에서 증식시켰을 때 나타나는 과정은 이미 알려진 사실이었다. 실험을 통해 새로이 시도한 ...2025.05.12
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PCR 관련 퀴즈 및 정답(생화학) A+ 과제레포트2025.01.201. PCR의 3단계 procedures PCR 반응요소에는 Target DNA, Primers (oligonucleotides complementary to target), Nucleotides(dATP, dCTP, dGTP, dTTP), Thermostable DNA polymerase가 있다. PCR의 세 가지 반응 단계는 DNA 변성 (Denaturation), primer 의 Annealing, 신장 반응 (Extension)이다. DNA 변성 단계에서는 95℃의 열을 가해 DNA 이중 가닥을 분리시킨다. Annealing...2025.01.20
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유전자와 유전자 활성 연구를 위한 분자도구2025.01.181. 서던블롯 서던블롯은 특정 DNA 절편을 동정하는 데 사용되는 기술입니다. 이 방법은 genomic DNA를 제한효소로 자른 후 아가로스 겔 전기영동을 통해 크기별로 분리합니다. 그리고 DNA를 변성시켜 nitrocellulose 또는 nylon 멤브레인으로 이동시킵니다. 이렇게 이동된 DNA는 방사선 동위원소나 비방사선 물질로 표지된 DNA 또는 RNA 탐침과 하이브리다이제이션되어 자기방사법 등을 통해 검출됩니다. 이 기술은 genomic DNA뿐만 아니라 plasmid, cosmid, bacteriophage 등의 분석에도 ...2025.01.18
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[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR2025.05.031. RNA extraction RNA를 분리하는 과정에서 가장먼저 첨가해주는 물질이 Trizol이다. Trizol은 phenol과 guanidinium thiocyanate라는 두가지 중요한 성분으로 이루어져있고 이들이 cell을 lysis하고 RNA를 안정화시키는 역할을 한다. 추가적으로 chloroform을 첨가하여 RNA와 다른 물질들을 분리한다. 2. cDNA synthesis cDNA 합성 과정에서는 reverse transcriptase 효소가 핵심적인 역할을 한다. 이 효소는 RNA를 DNA로 역전사하는 기능을 가지고...2025.05.03
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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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Lewin's Essential GENES 분자생물학 4판 정리노트 03. 분단된 유전자2025.05.101. Exon과 Intron Exon은 단백질 암호화 부위(coding region)이며, Intron은 noncoding region으로 RNA splicing 과정에서 제거됩니다. Exon의 순서는 DNA와 RNA 모두 동일합니다. 2. 분단된 유전자의 구조 분단된 유전자는 Exon과 Intron으로 구성되어 있습니다. Intron은 mRNA와 hybridization되지 않고 loop가 형성됩니다. 단백질 서열의 변화에 직접적으로 영향을 미치는 돌연변이는 Exon에서 일어납니다. 3. Exon과 Intron의 진화 Exon 서...2025.05.10
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Polymerase chain reaction2025.01.231. Polymerase chain reaction PCR(Polymerase chain reaction)은 단시간에 DNA의 원하는 부분을 수백만개 이상으로 증폭시키는 기술이다. PCR은 생물학의 거의 모든 분야에서 쓰이지 않는 곳이 없을 정도로 널리 퍼지고 중요한 실험적 기법이며, 그에 따라 상황과 목적, 기술발전에 따라 Multiplex PCR, Long-range PCR, Single-cell PCR등 수많은 파생 기술들이 존재한다. PCR은 크게 Denaturation, Annealing, Extension의 세 과정으로 ...2025.01.23
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PCR에 관한 보고서2025.01.151. PCR의 발견과 역사 1983년 Kary Mullis에 의해 개발된 PCR은 특정 DNA 서열을 짧은 시간 안에 대량으로 증폭할 수 있는 혁신적인 기술이다. PCR은 생명과학, 의학, 법의학, 환경과학 등 다양한 분야에서 중요한 역할을 하고 있으며, DNA 분석의 표준 방법으로 자리 잡았다. PCR의 도입은 유전자 연구와 응용에 있어서 획기적인 변화를 가져왔고, 현대 생물학의 발전에 크게 기여하였다. 2. PCR의 원리 PCR의 기본 원리는 DNA 복제 과정을 모방하는 것이다. 이 과정은 DNA 이중 나선의 변성, 프라이머 결...2025.01.15
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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