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PCR,전기영동,T-vector ligation2024.10.221. Gel extraction & TA cloning 1.1. 실험 개요 Agarose gel 전기영동을 통해 확인한 PCR product를 gel 상에서 분리 및 정제하는 Gel extraction을 수행하고, 분리된 PCR product의 3' 말단에 Taq polymerase로 인해 A overhang이 존재한다는 특성을 이용하여 T vector에 DNA ligase로 연결시키는 TA cloning을 진행하는 것이 이번 실험의 개요이다." 1.2. Gel extraction 1.2.1. 원리 gel 추출의 원리는 다음과 ...2024.10.22
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현대생물학실험22024.10.311. 플라스미드 클로닝과 발현 1.1. TA 클로닝 및 형질전환 TA 클로닝은 PCR을 거친 product의 3'에 존재하는 A overhang과 T vector의 3'의 T overhang의 상보성으로 인해 클로닝을 진행하는 방법이다. 이 과정에서 DNA strand의 3'-OH 그리고 5'-P 사이의 phosphodiester bond를 형성하게 되어 ligation을 진행한다. ligation이 완료된 플라스미드 DNA를 DH5α에 주입하여 Transformation을 통해 DH5α의 유전형질을 새롭게 변환시킨다. Lac o...2024.10.31