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단백질정제 및 정량2024.09.281. 서론 1.1. eGFP의 정의 및 특성 eGFP(enhanced Green Fluorescent Protein)는 Aequorea victoria에서 발견된 GFP(Green Fluorescent Protein)를 변형시킨 단백질이다. eGFP는 GFP의 아미노산 중 64번째 phenylalanine이 leucine으로, 65번째 serine이 threonine으로 변이된 돌연변이체이다. eGFP는 GFP보다 더 많은 빛을 흡수할 수 있어 단백질 정량 실험에서 더 높은 효율을 보인다. eGFP는 293개의 아미노산으로 구...2024.09.28
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브래드포드법2024.12.261. 단백질 정량 실험 1.1. Bradford 단백질 정량법 1.1.1. Bradford Assay의 원리 Bradford Assay의 원리는 산성용액에서 Coomassie Brilliant Blue 염료(470nm)가 단백질의 특정 아미노산과 결합하여 단백질 복합체를 형성하면 빛의 파장이 변화하여 595nm에서 파란색으로 변하는 것을 이용한 것이다. 이때 분광광도계(UV-Visible spectrophotometer)를 이용하여 흡광도 변화를 측정함으로써 단백질을 정량할 수 있다. 이 방법은 매우 빠르고 비용이 낮은 장점...2024.12.26
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단백질 정성분석 유황반응2025.05.221. 단백질의 정성분석 1.1. 실험 목적 및 원리 단백질의 정성분석은 단백질과 그 구성 아미노산의 특징적인 반응을 이용하여 단백질의 존재 여부와 성질을 파악하는 것이다. Biuret 반응, 침전반응, 유황반응, Xanthoprotein 반응 등의 정성분석 방법을 통해 단백질의 구조적 특징과 화학적 반응을 확인할 수 있다. Biuret 반응은 단백질과 알칼리성 구리 이온이 결합하여 청자색의 착화합물을 형성하는 반응이다. 단백질 분자 내 두 개 이상의 펩티드 결합이 있어야 이 반응이 일어나므로, 단백질 존재 여부를 확인할 수 있...2025.05.22