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제한 효소와 소화 실험 보고서2024.09.191. 유전자 클로닝을 위한 제한효소 실험 1.1. 제한효소 EcoRI의 특성 EcoRI는 대장균의 플라스미드 RY13에서 코드되며 DNA의 특수한 6염기배열 5′-GAATTC-3′을 인식하여 다음과 같이 절단한다. 즉, 5′-인산과 3′-OH말단이 생성된다. EcoRI는 50mM NaCl, 100mM tris-HCl 완충액(pH 7.5), 5mM MgCl2액에서 최적반응조건을 나타낸다. 그러나 고농도의 글리세롤이나 저농도의 염분 조건에서는 스타 활성(AATT만 인식)이 나타나기 쉽다. EcoRI는 가격이 저렴하여 유전자지도만들기(...2024.09.19
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제한효소 및 소화 실험: 효소작용 영향2024.09.191. 제한효소와 DNA 절단 1.1. 제한효소의 종류와 특성 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 핵산분해효소(endonuclease)의 하나로서, 유전공학에서 재조합 DNA를 만들기 위해 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소는 주로 세 가지 유형으로 분류된다. 첫째, Ⅰ형 제한효소는 인식하는 염기서열과 절단 위치가 다른 곳에 있어 연구에 부적합하다. 둘째, Ⅱ형 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 이를 정확히 절단하는 특성을 가지고 있어 유전자 조작에 주로 사용된다. 이 제한효소는 인식하는 염기서열이...2024.09.19
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Gene cloning2024.09.301. 유전자 클로닝 1.1. 유전자 클로닝의 개요 유전자 클로닝이란 생물체의 특정 유전자를 세포에서 추출한 후, 그 유전자를 벡터 DNA에 삽입하고 Competent Cell에서 증식시킴으로써 균일한 유전자 집단을 생성하는 기술이다. 다른 말로 유전자 클론화라고도 하며 특정 유전자의 대량 복제를 위해 쓰이는 중요한 DNA 재조합 기술이다. 이 기술은 기본적으로 수많은 종의 유전체와 종간 유전적 다양성을 연구하기 위해서 유전체의 DNA 조각, 혹은 서로 겹쳐져 있는 염기서열의 분석을 위해 활용된다. 또한 개별 유전자 수준에서 핵산의...2024.09.30
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단국대 세포생물학22024.10.191. 일반생물학 실험 결과리포트 1.1. 플라스미드 준비 및 효소 절단 E.coli 균에 존재하는 플라스미드 DNA를 알칼리 용해 방법(alkaline lysis method) 혹은 편의성을 위해 나온 분리 키트 제품으로 분리하는 것이다. 플라스미드는 대장균에 형질전환시켜 도입한 후, 이 대장균을 순수배양하여 증폭하고, 이를 손쉽게 플라스미드를 분리하여 정제할 수 있다. 염색체 DNA와 분리하는 핵심원리는 변성된 DNA가 renaturation(annealing)되는 속도의 차이를 이용한 것이다. 염색체 DNA처럼 크거나 분리과정...2024.10.19
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전남대 분자생물학2024.10.161. 제한효소의 발견과 유전자 재조합 기술 1.1. 제한효소의 발견 1.1.1. 베르너 아르버, 대니얼 네이선스, 해밀턴 오서널 스미스의 발견 스위스의 세균학자 베르너 아르버(Werner Arber)는 1950년대 후반과 1960년대 초반 박테리오파지가 세균 숙주에 유전적인 돌연변이를 유발할 뿐만 아니라 그들 자신에도 유전적인 돌연변이를 일으킨다는 것을 밝혔다. 이 연구를 통해 아르버는 세균에 존재하는 방어효소의 작용에 대해 깊이 연구하게 되었는데, 이 효소는 바이러스의 DNA 분자를 작은 조각으로 잘라 박테리오파지의 성장을 제...2024.10.16
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백터2024.10.211. 유전공학의 개관 1.1. 유전공학의 정의 유전공학이란 DNA 및 다른 핵산의 인위적인 조작, 변형, 재조합을 통하여 생명체의 유전자를 변화시키는 기술이다. 이는 과학기술의 발전에 따라 등장한 새로운 학문 분야로, 생명체의 유전 메커니즘을 이해하고 이를 응용하여 다양한 분야에서 활용되고 있다. 유전공학은 분자생물학과 생명공학을 아우르며, 현대 생명과학 연구의 핵심 기술로 자리잡고 있다." 1.2. 유전공학 발전의 역사 유전공학의 발전의 역사는 다음과 같다. 유전공학의 역사는 1866년 멘델의 유전 법칙 발견으로부터 시작된다고...2024.10.21
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DNA 제한효소 결과2024.10.071. 제한효소 실험 1.1. 제한효소의 종류와 특징 제한효소에는 크게 Ⅰ형, Ⅱ형, Ⅲ형의 3종류가 있다"" Ⅰ형 제한효소는 분자량이 30만으로 Mg^{2+}, Adanosine triphosphate(ATP), S-adenosylmethionine(SAM)을 필요로 하며, endonuclease 활성, 수식 methylase 활성, ATPase활성을 가진 다기능 효소로 DNA 절단 시 다량의 ATP를 분해한다. 또한 endonuclease 활성, 수식 methylase 활성이 인식하는 염기배열은 동일하지만 DNA를 절단하는 ...2024.10.07
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λDNA와 제한효소를 사용한 DNA ladder 만들기2024.10.101. 제한효소와 DNA 분석 1.1. 제한효소의 기능 1.1.1. 제한효소의 특성 제한효소의 특성은 다음과 같다. 제한효소는 DNA 사슬 상의 특정한 염기배열을 인식한 후, DNA의 두 사슬을 모두 절단하는 endonuclease이다. 제한효소는 인식하고 절단하는 염기배열에 따라 세 종류(I, II, III)로 나뉜다. 그 중 type II 제한효소는 특정 염기배열(일반적으로 4~6개의 염기쌍으로 구성됨)을 인식하고 인식한 염기서열 내의 특정 부위를 절단한다. 이러한 특성 때문에 제한효소는 DNA 분석, 지도 작성과 gene...2024.10.10
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화학결합 주제탐구 보고서2024.09.251. DNA 염기의 수소결합과 제한효소, DNA 변형 1.1. 서론 1.1.1. 주제 선정 이유 화학 시간에 생명현상과 밀접한 관련이 있는 수소결합에 대해 배운 후에, 'DNA 염기들은 왜 수소 결합으로 이루어져있는지'에 대해 궁금증을 가지고 'DNA 염기의 수소결합'을 주제로 탐구를 진행해보았다. DNA의 결합구조와 수소결합에 대한 연구는 생물정보학 분야에서 중요한 역할을 하기에, DNA가 단백질을 생산하는 데에 쓰이거나 복제될 때의 결합이 어떨지 모색해보고, 이러한 결합의 특징을 제한효소가 어떻게 이용하는지 고민해보는 시간을...2024.09.25
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제한효소를 이용한 DNA의 절단 및 전기영동2024.09.191. 제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 1.1. 제한효소의 개요 1.1.1. 제한효소의 정의 및 기능 제한효소는 이중 가닥 DNA 분자의 특정한 염기서열을 인식하여 그 부분이나 주변을 절단하는 효소이다. 제한효소는 세균이 박테리오파지라는 바이러스의 공격을 받으면 생산하는 효소로, 바이러스의 침입으로부터 자신을 방어하는 역할을 한다. 따라서 제한효소는 DNA의 특정 염기서열을 구분하고 이중 나선 DNA를 절단하는 능력을 가지고 있으며, 이를 통해 자신의 DNA는 보호하고 외부 유입 DNA는 제거하는 기능을 수행한다. 또한...2024.09.19
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