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molecular affinity2024.11.071. 단백질 정제 및 분석 1.1. 단백질 발현과 정제 1.1.1. Ni-NTA Agarose Resin을 이용한 His-tagged 단백질 정제 Ni-NTA Agarose Resin을 이용한 His-tagged 단백질 정제는 친화성 크로마토그래피 기법 중 하나이다. Ni-NTA Agarose Resin은 니켈 이온(Ni2+)을 리간드로 사용하며, 이 니켈 이온이 His-tag(6개의 히스티딘 아미노산 서열)와 강한 친화력을 가지는 것을 이용하여 목표 단백질을 분리하는 것이다. His-tag는 단백질의 C-말단 또는 N-말단...2024.11.07
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생화학실험 레포트 단백질 정성분석2024.09.151. 단백질 정량 분석 1.1. 정량 분석과 정성 분석의 개념 정량 분석은 물질을 구성하는 양적 관계를 명확하게 하는 분석법으로, 물질의 구성성분을 알아내는 정성분석과는 구분된다. 정량분석은 물리화학적인 기계·기구를 사용해서 수행하는 기기분석과 화학반응을 이용해서 성분의 양을 결정하는 화학분석으로 나뉜다. 기기분석은 조작이 간단하고 정밀도가 높아 폴라로그래피, 광흡수분석법, 질량분석법 등의 방법이 사용된다. 화학분석은 중량분석과 용량분석이 있고, 비색분석, 비탁분석 및 전기분해분석 등의 방법이 있다. 반면 정성분석은 물질을 구...2024.09.15
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세포생물학 단백질 정량2024.09.251. 단백질 정량 분석 1.1. 실험 목적 실험 목적은 단백질 정량 원리에 대해 이해하고, 대표적인 단백질 정량법인 BCA법을 이용하여 직접 단백질을 정량해보는 것이다." 1.2. 단백질 정량법 1.2.1. Biuret 정량법 Biuret 정량법은 펩타이드 결합의 존재를 감지하는 데 사용되는 화학 테스트이다. 펩타이드 결합이 있으면 구리 이온(Cu2+)이 구리 1가 이온(Cu+)으로 환원된다. 이때 이온은 알칼리성 용액에서 보라색의 조정 복합체를 형성한다. 펩타이드 결합은 펩타이드 내 아미노산 당 동일한 주파수로 발생하기 때...2024.09.25
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단백질 정량실험2024.09.241. 단백질 정량 실험 1.1. 실험 목적 및 이론적 배경 1.1.1. 단백질 정량의 목적 단백질 정량의 목적은 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 것이다. 단백질 정량은 대부분의 생화학실험의 기본이 되는 과정으로, 실험 결과의 신뢰성을 높이기 위해 정확한 단백질 정량이 중요하다. 생물학 분야의 실험의 경우 다른 분야에 비해 실험적 오류를 파악하기 어려우므로, 단백질 정량이 잘못되면 실험을 처음부터 다시 시작해야 한다. 따라서 실험을 준비하는 단계에서 정확한 단백질 정량을 실시하는 것이 필수적이다. 1.1.2. 단...2024.09.24
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신장 조직 균질화, 단백질 농도 측정2024.09.271. 간 생리학 및 기능 1.1. 간의 구조와 기능 간은 우리 몸의 가장 크고 중요한 내장기관 중 하나로, 횡격막 아래에 위치하며 적갈색을 띠고 있다. 성인의 경우 간의 무게는 약 1.0~1.5kg으로 내장기관 중 가장 크다. 간은 크게 오른쪽엽과 왼쪽엽으로 나뉘며, 간동맥과 간문맥으로부터 혈액을 공급받는다. 간동맥은 간의 영양혈관으로 동맥혈을 공급하고, 간문맥은 소화관으로부터 흡수된 영양소를 간으로 운반하는 혈관이다. 간은 다양한 중요한 기능을 수행한다. 첫째, 탄수화물 대사에서 중요한 역할을 한다. 간은 혈당량이 높아지면 포...2024.09.27
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단백질정량 bradford2024.10.041. 단백질 정량 1.1. Bradford법을 이용한 단백질 정량 1.1.1. 실험 목적 Coomassie blue 시약과 단백질이 반응하여 색이 변화하는 정도를 흡광도 측정하여 단백질을 정량할 수 있다. 1.1.2. 실험 이론 Bradford법은 Coomassie blue 시약과 단백질이 반응하면 적색의 시약이 청색으로 변하는 것을 이용한 단백질 정량법이다. 단백질이 Coomassie blue 시약과 반응하면 적색의 시약이 청색으로 변하는데, 이때 생성된 청색 복합체의 흡광도를 595nm에서 측정하여 단백질 농도를 정량한다. ...2024.10.04
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분자세포생물학 실험 Bradford assay 및 Western Blot 결과보고서2024.10.151. 단백질 전기영동 기술 1.1. 단백질 전기영동의 소개 단백질 전기영동은 단백질을 크기별로 분리하는 기법으로, 생명과학 연구에서 기본적으로 사용되는 중요한 실험 방법이다. 단백질 전기영동은 단백질의 고유한 특성을 이용하여 전기장 내에서 단백질 분자를 크기별로 분리하는 기술이다. 단백질 분자는 전하를 띠고 있기 때문에 전기장 내에서 이동하게 되며, 분자량이 작은 단백질일수록 빠르게 이동하고 분자량이 큰 단백질일수록 느리게 이동하게 된다. 이러한 원리를 이용하여 단백질을 크기별로 분리하고 분석할 수 있다. 단백질 전기영동은 다양한...2024.10.15
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세포배양 기초2024.08.211. 서론 1.1. 세포배양의 개념과 중요성 세포배양이란 생물의 조직이나 기관으로부터 분리한 세포를 적당한 배양액 속에서 생육시키는 것을 말한다. 세포배양은 다양한 측면에서 중요한 의의를 가지고 있다. 첫째, 세포배양은 생물체 조직의 특성과 기능을 연구하는 데 활용된다. 실험실 환경에서 동물이나 식물의 특정 세포를 분리, 배양함으로써 자연 상태에서는 관찰하기 어려운 세포의 대사과정, 신호전달 기작, 유전자 발현 등을 관찰하고 분석할 수 있다. 이를 통해 생체 내 세포활동의 메커니즘을 이해할 수 있다. 둘째, 세포배양 기술은 ...2024.08.21
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세포배양 이론2024.08.211. 서론 1.1. 세포배양법과 단백질정량법의 이해 세포배양법은 다세포 생물에서 분리한 세포를 특수한 용기 내에서 성장 및 보존하는 방법이다. 특수한 용기, 온도, 습도, 영양소 등의 배양조건이 필요하며, 오염을 방지하는 것이 필수적이다. 세포는 배양접시의 바닥에 한 층으로 붙어서 자라게 되는데, 세포의 증식이 멈추게 되면 새로운 배양접시로 옮겨 계대배양을 하게 된다. 세포배양배지는 동물 세포 배양에 필요한 까다로운 환경조건과 수많은 생장인자를 포함하고 있다. 대표적인 세포배양배지로는 DMEM(Dulbecco's modifie...2024.08.21
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브래드포드법2024.12.261. 단백질 정량 실험 1.1. Bradford 단백질 정량법 1.1.1. Bradford Assay의 원리 Bradford Assay의 원리는 산성용액에서 Coomassie Brilliant Blue 염료(470nm)가 단백질의 특정 아미노산과 결합하여 단백질 복합체를 형성하면 빛의 파장이 변화하여 595nm에서 파란색으로 변하는 것을 이용한 것이다. 이때 분광광도계(UV-Visible spectrophotometer)를 이용하여 흡광도 변화를 측정함으로써 단백질을 정량할 수 있다. 이 방법은 매우 빠르고 비용이 낮은 장점...2024.12.26
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