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BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)2025.05.121. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖는 아미노산)과 결합하면 푸른색으로 변하게 됩니다. 이 과정에서 단백질의 소수성 부위가 노출되어 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루고, 양전하를 띠는 아민기와 염색약의 음전하 부위가 이온결합을 이루면서 단백질과 염색약의 결합이 더욱 강화됩니다. 2. 온도에 따른 단백질 변성 이 실험에서는 프...2025.05.12
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성균관대학교 화학과 생물화학실험 레포트2025.01.211. 단백질 정량법 단백질정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정이다. 단백질 함량을 측정하기 위한 다양한 방법이 존재하며, 한가지 단백질로 이루어진 용액은 측정방법에 따라 다른 결과를 가져 올 수 있다. 방법에 따라 모두 장단점이 있기 때문에 측정하는 샘플 내 단백질의 특성, 추출물의 순도, 필요로 하는 정확도 등에 따라 적절한 방법을 선택하는 것이 좋다. 단백질 정량법에는 크게 colormetric 방법과 electrophoresis 방법이 있으며 대부분 색시약을이용하여 흡광도를 측정하는 colormetr...2025.01.21
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단백질 정량법 비교(BCA, Bradford)2025.01.271. 단백질 정량법 본 실험은 BCA Assay와 Bradford Assay를 이용하여 미지시료의 단백질 농도를 추정하고 어떤 방법이 단백질 정량에 더 적절한 방법인지 비교 분석하고자 하였다. BCA Assay 결과 미지시료의 농도는 711μg/mL, Bradford Assay 결과 1705μg/mL로 추정되었다. 표준곡선의 결정계수(R2)는 Bradford Assay가 0.9283으로 BCA Assay의 0.9094보다 약간 더 높아 신뢰성이 있는 것으로 나타났다. 그러나 국립과학원의 분석기준에 따르면 습식분석의 경우 R2가 0....2025.01.27
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[화공생물공학단위조작실험1] 단백질 정량법 비교 (BCA, Bradford)2025.05.111. 단백질 정량법 단백질은 다양한 종류의 아미노산이 펩타이드 결합을 통해 형성된 고분자 화합물로, 결합 길이나 아미노산 종류에 따라 화학적∙물리적 성질이 다르다. 이러한 성질의 차이로 단백질 정량법의 종류도 다양하다. 정량법에는 Biuret assay, BCA assay, Bradford assay, 동위원소 희석 LC-MS method, 분광학적 정량법 등이 있다. 2. Biuret Assay Biuret(H2N-CO-NH-CO-NH2)구조가 알칼리성의 CuSO4와 반응하면 2가의 구리이온과 보라색의 착화합물을 형성한다. Biu...2025.05.11
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화공생물공학 단위조작실험1 단백질 정량법 비교2025.01.151. BCA Assay BCA Assay는 단백질이 구리 이온(Cu2+)을 1가 양이온(Cu1+)으로 환원시킬 수 있는 성질을 이용한 단백질 정량법입니다. 환원된 구리 이온은 Bicinchoninic Acid(BCA) 분자 2개와 반응하여 보랏빛의 착물을 형성하게 되며, 이 화합물의 흡광도 측정을 통해 단백질 농도를 정량할 수 있습니다. BCA Assay는 일반적인 버퍼 물질에 간섭을 덜 받고, 높은 온도에서 민감하고 빠른 반응을 할 수 있으며, 계면활성제와 함께 사용할 수 있다는 장점이 있습니다. 하지만 실온에서 반응이 완전히 수...2025.01.15