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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 예비레포트2025.01.191. Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR은 Denaturation, Annealing, Extension 등의 과정을 거쳐 특정 DNA 영역을 증폭시키는 분자 생물학적 기술이다. PCR 기법에는 다양한 종류가 존재하며, 민감도 상승을 위한 Nested PCR, 미지 영역의 서열 확인을 위한 Inverse PCR, RNA를 분석하는 RT-PCR 등이 있다. PCR에 필요한 구성 요소는 내열성 DNA polymerase, 2가 양이온, dNTP, 주형 DNA, Buffer, forward/reverse pr...2025.01.19
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DNA 추출 및 PCR, PCR 결과 확인(전기영동) 레포트2025.04.251. DNA 추출 DNA 추출 과정에서 Vortexing이나 Tapping을 하지 않고 Inverting하는 이유는 고분자인 gDNA에 물리적인 힘이 크게 가해져 gDNA의 손상이 일어나는 것을 방지하기 위해서이다. gDNA 전기영동 결과에서 Clean band가 나오지 않은 이유는 gDNA가 크기가 무척이나 크기 때문에 일련의 실험 과정에서 많이 부서져 부서진 조각들의 크기가 다양하여 전기영동 시 clean band가 나오지 않고 번진 형태로 나타났기 때문이다. 2. PCR PCR product의 전기영동 결과를 보면 500~60...2025.04.25
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코로나의 영향을 분석한 진로 보고서 / 탐구주제는 코로나 진단키트, 백신, 치료제의 원리2025.01.201. 코로나 진단키트 코로나 진단키트의 이름은 RT-PCR이고, 핵심 원리는 박테리아나 바이러스처럼 눈에 보이지 않는 것을 보이게 하는 것이다. 이렇게 하기 위해서는 유전자를 증폭시켜야 한다. 이것은 기존에 있던 중합효소 연쇄반응 PCR의 원리와 거의 유사하다. 하지만 RT-PCR과 PCR의 차이점이 있다면 PCR은 검체에서 추출한 DNA를 증폭시켜 기존의 코로나바이러스와 비교하여 신종인지 아닌지 가려내기 때문에 24시간이라는 긴 시간이 소요되는 반면에 RT-PCR은 코로나19에만 존재하는 유전자를 검출해 감염 여부를 진단하는 방법...2025.01.20
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
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레닌저 생화학 정리노트 Ch08. 뉴클레오타이드와 핵산2025.05.101. 뉴클레오타이드와 핵산 뉴클레오타이드는 DNA와 RNA의 구성요소로 유전정보를 포함하는 분자 저장고가 되며, ATP는 에너지 통화 및 중요한 조절신호로 세포 대사에서 중심적인 역할을 합니다. 뉴클레오타이드와 핵산은 특징적 염기와 오탄당을 가지고 있으며, 퓨린기와 피리미딘기로 구분됩니다. DNA는 이중나선 구조를 가지며 수소결합에 의해 상보적으로 결합하고, RNA는 단일가닥 구조로 다양한 3차원 구조를 가집니다. 뉴클레오타이드와 핵산은 비효소적 변환을 겪으며, 돌연변이, 탈아미노화, 탈퓨린화, 방사선 및 화학적 손상 등이 발생할 ...2025.05.10
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분자생물학 및 유전공학의 실험방법2025.05.101. Restriction endonuclease DNA의 specific short sequences를 인식하고 쪼갤 수 있는 enzyme입니다. Cloning vectors는 host cell에 외래 DNA를 삽입하기 위해 사용할 수 있는 DNA로, selectable markers와 replication origins을 가지고 있습니다. 2. Nucleases Nucleases(핵산가수분해효소)는 phospho diester bond의 ester bond를 Hydrolyze하는 enzyme이며, Phosphatases(인산분해...2025.05.10
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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분자생물학 실험 (A+) PCR and restriction enzyme digestion 예비보고서2025.01.041. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, 소량의 DNA 샘플에서 수백만 개의 복사본을 만들어낼 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 제한효소 절단은 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 자르는 기술로, PCR 산물의 확인이나 유전자 지문 분석 등에 사용됩니다. 2. 제한효소 절단 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 자르는 효소입니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기와 패턴을 확인할 수 있으며, 유전자 지문 분석, 유전자 ...2025.01.04
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