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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 DNA 구조의 이해 결과보고서2025.01.131. DNA 구조 DNA는 유전정보를 가지고 있는 디옥시리보뉴클레오티드로 이루어진 고분자 중합체이다. 단일가닥이나 이중가닥의 형태로 존재할 수 있지만 세포를 가진 생물의 DNA는 모두 이중가닥 형태를 가진다. DNA 이중나선 구조에서 나선이 짧게 마주보는 쪽을 minor groove, 넓게 마주보는 쪽을 minor groove 라고 한다. 이 두가지가 번갈아 나오는 형태를 보이며 인산기, 당, 염기가 일직선상에 배열되어 있지 않기 때문에 발생할 수 있다. 2. DNA 염기쌍 DNA의 4가지 염기는 구아닌, 아데닌, 타이민, 사이토신...2025.01.13
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 예비보고서2025.01.041. DNA ligation DNA ligation은 DNA 단편을 연결하는 과정으로, 제한효소로 절단된 DNA 단편을 연결하여 재조합 DNA를 만드는 데 사용됩니다. 이 과정에서 DNA ligase 효소가 사용되며, 이를 통해 DNA 단편의 인접한 3' 수산기와 5' 인산기 사이의 공유 결합이 형성됩니다. DNA ligation은 유전자 클로닝, 유전자 조작, 유전체 연구 등 다양한 분자생물학 실험에서 중요한 기술입니다. 2. DNA transformation DNA transformation은 외부 DNA를 세포 내로 도입하는 ...2025.01.04
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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원핵세포와 진핵세포의 차이점2025.01.061. 원핵세포 원핵세포는 단세포 생물로 약 35억년 전 지구상에 출현한 최초의 세포입니다. 원핵세포는 세포막, 세포질, 리보솜, DNA로 구성되어 있으며, 당질피질, 세포벽, 섬모, 편모, 플라스미드, 봉입, 내생포자와 같은 부속구조를 가지고 있습니다. 원핵세포는 DNA가 세포질 내 뉴클레오이드에 있고 히스톤 단백질과 결합되어 있지 않으며, 구획화가 되어 있지 않아 무작위적인 분자운동을 합니다. 원핵세포는 세포분열 시 이분법이나 단순분열을 하며, 리보솜이 진핵세포보다 약간 작고 다른 RNA와 단백질로 구성되어 있습니다. 2. 진핵세...2025.01.06
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유전자 발현에서의 오페론과 되먹임 억제2025.05.111. 음성 피드백 음성 피드백은 결과가 원인을 억제하여 결과를 적절하게 유지하는 조절 작용을 말한다. 이러한 음성 피드백은 우리 몸의 모든 항상성 조절 과정과, 대부분의 호르몬 조절 과정에 관여한다. 티록신의 분비 조절이 대표적인 예시이다. 2. 되먹임 억제 유전자 발현에서도 음성 피드백과 유사한 현상인 되먹임 억제가 일어난다. 되먹임 억제는 최종 산물이 앞선 효소 반응을 억제하는 반응을 말한다. 대장균의 트립토판 합성 과정에서 트립토판이 억제자 단백질과 결합하여 오페론의 작동을 멈추게 하는 것이 대표적인 예이다. 3. 오페론 기능...2025.05.11
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생물공정실험 예비보고서_RNA Extraction and Quantification2025.01.071. 유전자 발현과 조절 유전자 발현 경로는 전사와 번역으로 나뉘며, 전사 개시, 전사 후 가공, 번역 단계에서 조절될 수 있다. 전사 활성은 크로마틴 구조 변화, 전사인자 결합 등으로 조절되며, 전사 후에는 mRNA 가공, 번역에서는 mRNA 사용 속도 조절 등으로 이루어진다. 2. TRIzol을 이용한 RNA 추출 TRIzol 시약은 페놀-구아니딘 이소티오시아네이트로 구성되어 세포막을 파괴하고 RNase를 억제하여 RNA를 선택적으로 추출할 수 있다. 세포 용해액을 원심분리하면 RNA가 수용층에 존재하게 되며, 이후 isopro...2025.01.07
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초파리 침샘염색체 관찰2025.04.251. 침샘염색체 초파리 유충의 침샘 세포에는 체세포 염색체에 비해 약 100배 정도 큰 염색체가 존재합니다. 이 염색체에는 특징적인 띠(band)가 나타나 구별이 용이하며, 퍼프라는 구조도 관찰됩니다. 퍼프는 염색체의 응축이 풀어진 것으로, 유전자 전사 활동이 일어나고 있음을 나타냅니다. 이를 통해 유전자 발현이 조직마다 차별적으로 일어난다는 것을 간접적으로 확인할 수 있습니다. 2. 염색체 구조 초파리 침샘 염색체는 4쌍으로 구성되어 있으며, 각 염색체에는 특징적인 밴드 패턴이 나타납니다. X염색체와 4번째 염색체는 동원체가 염색...2025.04.25
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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PEI 나노 복합체를 이용한 세포 내 siRNA 전달 및 RNA 간섭 평가2025.01.051. Polyethylenimine (PEI) 나노 복합체 이번 실험에서는 양이온성 branched polyethylenimine (B-PEI)를 이용해 siRNA/PEI 나노입자를 만들고, GFP-silencing siRNA를 암세포 내로 전달하여 RNA interference (RNAi) 간섭 효율을 세포 내 GFP 발현량의 감소로 확인하였다. N/P ratio에 따른 RNA 간섭 효율 변화를 살펴보았는데, N/P ratio가 높아질수록 siRNA가 더욱 응축되어 작은 나노 입자가 형성되고, 나노 입자의 표면 전하가 커져 세포막...2025.01.05