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인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 5. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정2025.01.051. Hemocytometer를 이용한 세포 수 산정 이번 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 세포 부유액에 있는 세포의 수를 현미경으로 측정하여 단위 세포수를 계산해보았다. Hemocytometer는 혈액 속의 혈구의 개수를 정확하게 계산하기 위해 만들어진 도구로, 사각형 모양의 슬라이드와 유리 뚜껑으로 구성되어 있다. Cell counting은 현미경을 통해 보았을 때 1 mm2인 정사각형의 격자무늬 안에 있는 세포의 수를 계산하고 4개를 평균치 내어 평균치 X를 도출하였다. 이후 희석배수를 포함한 2104을 곱하여 ...2025.01.05
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[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험을 위해 clean bench 내부를 소독하고 실험 재료를 준비합니다. 배양액을 37°C로 유지하고, 세포 상태를 현미경으로 확인합니다. 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신을 처리하여 세포를 분리합니다. 분리된 세포를 원심분리하여 세포 펠릿을 수집하고, 새로운 배양액에 재현탁하여 새로운 배양접시에 분주합니다. 2. 현미경 관찰 세포 배양 접시를 현미경 위에 올려놓고 세포의 상태를 관찰합니다. 세포 밀도가 70-80% 정도인지 확인합니다. 3. 트립신 처리 트립신-EDTA 용액을 세포 배양 접시...2025.04.25
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[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서2025.04.261. EGFP 유전자 발현 조절 이번 실험에서는 CRISPR-CAS9을 이용해 EGFP 유전자 발현을 조절하는 방법을 사용했다. EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야 하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해야 한다. 2. CHO-S 세포 배양 이번 실험에서는 CHO-S 세포를 사용했다. CHO-S 세포는 부유하면서 자랄 수 있어 배양 속도와 공간 활용도가 adherent 세포에 비해 좋아 생산성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간과 진화적으로 가까워 human-like PTM, ...2025.04.26
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LDH assay2025.01.231. 단백질 정제 실험 주제에서 다루고 있는 LDH assay는 단백질 정제 과정에 대한 내용을 포함하고 있습니다. 단백질 정제는 다양한 종류의 단백질이 섞여 있는 샘플에서 원하는 단백질을 분리하는 작업입니다. 크로마토그래피, SDS-PAGE, Western blot 등의 방법을 통해 단백질의 순도를 점차 높여나가는 과정이 설명되어 있습니다. 2. 효소 활성 측정 이 실험에서는 LDH(Lactate Dehydrogenase)라는 효소의 활성을 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 효소 활성은 반응 속도, 특정 활성, 수율 등으로...2025.01.23
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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08
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간 배양 실습레포트2025.01.221. 간의 기능 간은 산소가 풍부한 동맥혈과 산소가 적은 정맥피가 함께 섞이는 특별한 장소이며 혈액의 창고라고 할 만큼 우리 몸 전체 혈액의 3분의 1정도가 항상 존재한다. 간은 angiotensin 1을 만드는 angoitensinogen을 분비하고, glucose를 glycogen으로 만들어 저장하며, 공복 시 저장된 glycogen을 분해하여 혈중으로 포도당을 내보내 혈중농도를 일정하게 유지시킨다. 또한 간은 오래된 erythrocytes를 파괴하고, 혈액 응고, 물질 이동, 철 결합, 단백질 분해 억제에 관련된 많은 단백질을...2025.01.22
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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험2025.01.181. 동물세포 배양 동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번 실험에서는 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행하였다. 2. 마우스 종양 세포 4T1 마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마...2025.01.18
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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분자생물학 실험 (A+) Bacterial Cell culture 결과보고서2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 세포 배양 실험 결과를 다루고 있습니다. 세포 배양은 살아있는 세포를 실험실 환경에서 증식시키는 기술로, 생물학 및 의학 연구에 널리 사용됩니다. 이 실험에서는 대장균 세포를 배양하여 성장 곡선, 배양액 pH 변화 등을 관찰하고 분석했습니다. 세포 배양 기술은 질병 치료제 개발, 유전자 조작, 조직 공학 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. 대장균 배양 이 보고서는 대장균 세포를 배양하여 실험을 진행했습니다. 대장균은 대표적인 박테리아로, 유전자 조작 및 단백질 생산 등의 연구에 널리 사용됩니다. ...2025.01.04
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