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제한 효소와 소화 실험 보고서2024.09.191. 유전자 클로닝을 위한 제한효소 실험 1.1. 제한효소 EcoRI의 특성 EcoRI는 대장균의 플라스미드 RY13에서 코드되며 DNA의 특수한 6염기배열 5′-GAATTC-3′을 인식하여 다음과 같이 절단한다. 즉, 5′-인산과 3′-OH말단이 생성된다. EcoRI는 50mM NaCl, 100mM tris-HCl 완충액(pH 7.5), 5mM MgCl2액에서 최적반응조건을 나타낸다. 그러나 고농도의 글리세롤이나 저농도의 염분 조건에서는 스타 활성(AATT만 인식)이 나타나기 쉽다. EcoRI는 가격이 저렴하여 유전자지도만들기(...2024.09.19
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λDNA와 제한효소를 사용한 DNA ladder 만들기2024.10.101. 제한효소와 DNA 분석 1.1. 제한효소의 기능 1.1.1. 제한효소의 특성 제한효소의 특성은 다음과 같다. 제한효소는 DNA 사슬 상의 특정한 염기배열을 인식한 후, DNA의 두 사슬을 모두 절단하는 endonuclease이다. 제한효소는 인식하고 절단하는 염기배열에 따라 세 종류(I, II, III)로 나뉜다. 그 중 type II 제한효소는 특정 염기배열(일반적으로 4~6개의 염기쌍으로 구성됨)을 인식하고 인식한 염기서열 내의 특정 부위를 절단한다. 이러한 특성 때문에 제한효소는 DNA 분석, 지도 작성과 gene...2024.10.10
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크리스퍼가 온다2024.11.031. 크리스퍼 유전자가위 1.1. 크리스퍼 유전자가위의 정의 CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat)는 세균의 적응 면역 시스템에서 유래된 유전자 편집 도구이다. CRISPR는 규칙적으로 배열된 짧은 반복 서열로 구성된 DNA를 말한다. 세균은 바이러스에 감염되면 바이러스의 DNA 일부를 자신의 유전체에 기억해 두었다가 차후 바이러스가 침입하면 그 정보를 이용해 바이러스 DNA를 찾아서 절단하는 방어 시스템을 가지고 있다. 이러한 세균의 적응 면역 시스템이...2024.11.03