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λDNA와 제한효소를 사용한 DNA ladder 만들기2024.10.101. 제한효소와 DNA 분석 1.1. 제한효소의 기능 1.1.1. 제한효소의 특성 제한효소의 특성은 다음과 같다. 제한효소는 DNA 사슬 상의 특정한 염기배열을 인식한 후, DNA의 두 사슬을 모두 절단하는 endonuclease이다. 제한효소는 인식하고 절단하는 염기배열에 따라 세 종류(I, II, III)로 나뉜다. 그 중 type II 제한효소는 특정 염기배열(일반적으로 4~6개의 염기쌍으로 구성됨)을 인식하고 인식한 염기서열 내의 특정 부위를 절단한다. 이러한 특성 때문에 제한효소는 DNA 분석, 지도 작성과 gene...2024.10.10
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TA cloning2024.10.091. 실험 소개 1.1. Gel Extraction Gel extraction 실험은 아가로스 전기영동을 통해 확인한 PCR product를 gel 상에서 분리 및 정제하는 것이 목적이다. DNA 분자는 아가로즈 겔 내에서 전기영동되어 분리된 후, 특정 DNA 밴드를 겔에서 잘라내어 추출하는 과정을 거치게 된다. 우선 젤 슬라이스에 FADF 버퍼를 넣고 vortexing하여 젤이 완전히 용해되도록 한다. 이때 0.8% 아가로스 겔을 사용했기 때문에 FADF 버퍼를 500㎕ 첨가했다. 이후 55℃에서 10분간 incubation...2024.10.09